洪瑾芳 福建省福清市畜牧獸醫(yī)中心石竹畜牧獸醫(yī)站 350301
小麥中粗蛋白的含量約為9%~14%,小麥作為原料生產(chǎn)淀粉、乳酸、谷氨酸以及相關(guān)生化用糖的過程中,還能得到大量的小麥蛋白。小麥蛋白俗稱谷朊粉,又叫活性面筋蛋白,蛋白質(zhì)含量很高達(dá)75%~85%,還含有脂肪、纖維素、礦物質(zhì)等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它是植物性飼料中營(yíng)養(yǎng)豐富的蛋白質(zhì)飼料。
小麥蛋白主要由麥谷蛋白和麥醇溶蛋白組成,它們都含有豐富的谷氨酸(G1utamate,G1u)和脯氨酸。而G1u與谷氨酰胺(G1utamine,G1n)在小麥蛋白中含量尤其高,約占小麥蛋白氨基酸總量的35%,小麥蛋白中酰胺基是G1u的主要存在形式,G1u有67.4%的活性基團(tuán)為酰胺基活性基團(tuán)。因此,小麥蛋白可以作為G1n肽的重要來源。但是小麥蛋白自身的粘性大,溶解度低,極容易導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生過敏性反應(yīng),這些因素都影響到小麥蛋白的廣泛應(yīng)用。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中能夠利用小麥蛋白的延展性、黏彈性和持水性,作為水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑。
小麥蛋白的重要功能性氨基酸—G1n,是動(dòng)物機(jī)體大量存在的游離氨基酸之一,大概占總游離氨基酸的40%~60%。動(dòng)物體需要的G1n多數(shù)由自身組織合成,G1n參與動(dòng)物機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成,也可作為氮源參與核酸和糖蛋白的合成[1],對(duì)動(dòng)物體產(chǎn)生特定的保護(hù)作用及免疫功能。G1n為機(jī)體內(nèi)迅速增殖和分化的細(xì)胞,如腸黏膜上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等,提供主要能源供應(yīng)。對(duì)于多數(shù)動(dòng)物來說,小腸是G1n的主要吸收?qǐng)鏊?,小腸中存在豐富的腸絨毛,能夠吸收腸道中大多數(shù)G1n,其中相當(dāng)一部分的G1n被吸收后直接在腸道細(xì)胞內(nèi)被利用,腸道細(xì)胞對(duì)于G1n的需求量遠(yuǎn)高于其它氨基酸。G1n在合成腸道分泌型免疫球蛋白A(Secretory immunog1obu1in A,SIgA),調(diào)節(jié)腸道淋巴組織功能,防止腸道內(nèi)細(xì)菌易位發(fā)揮了關(guān)鍵作用。手術(shù)、燒傷、創(chuàng)傷、斷乳、高溫等情況下,都容易使動(dòng)物機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài),此時(shí)動(dòng)物體內(nèi)需要的G1n急劇增長(zhǎng),使得自身合成的G1n嚴(yán)重不足,容易導(dǎo)致體內(nèi)G1n缺乏,引起腸道萎縮、分解和吸收功能下降、免疫系統(tǒng)紊亂等癥狀[2]。這時(shí)如果給動(dòng)物體額外添加G1n可以緩解這些癥狀的出現(xiàn),因而G1n又被稱為“條件性必需氨基酸”[3]。
G1n的生理作用歸納為:(1)G1n的載體功能。在機(jī)體循環(huán)中,約30%~35%的氨基酸利用G1n的α-氨基和酰胺基作為載體,實(shí)現(xiàn)其在各組織器官之間的流動(dòng),這種結(jié)合具有特異性,故G1n又稱作“氮梭”。(2)G1n是構(gòu)成機(jī)體的基礎(chǔ)物質(zhì)。G1n普遍存在于機(jī)體內(nèi),參與機(jī)體新陳代謝,是核酸生物合成所必需的氮源,對(duì)蛋白質(zhì)的合成與分解有調(diào)節(jié)作用。(3)G1n作為一系列快速增殖細(xì)胞的關(guān)鍵性能源物質(zhì),可以提高機(jī)體免疫功能,保護(hù)腸道的形態(tài)完整和屏障功能,防止腸道內(nèi)細(xì)菌和有害物質(zhì)的易位。(4)G1n能夠促進(jìn)損傷組織的修復(fù)。額外添加G1n能有效促進(jìn)創(chuàng)傷組織的恢復(fù),并且起到節(jié)氮和提高機(jī)體抗感染能力。(5)G1n作為谷胱甘肽的前體物質(zhì),通過調(diào)節(jié)谷胱甘肽的合成達(dá)到調(diào)節(jié)機(jī)體的炎癥反應(yīng)。
G1n的特殊生理活性使其在動(dòng)物臨床營(yíng)養(yǎng)上的應(yīng)用空間十分寬廣,尤其對(duì)與年幼的動(dòng)物更加有意義。有研究指出,添加了G1n的氨基酸營(yíng)養(yǎng)液,可使離體小腸黏膜蛋白質(zhì)含量、DNA、RNA含量增加[4]。Wu[5]在早期斷乳仔豬的日糧中添加1%的G1n,可有效減少仔豬腸道絨毛的萎縮,提高仔豬的飼料轉(zhuǎn)化率。劉濤[6]通過在斷乳仔豬的日糧中添加G1n,能夠提高早期斷乳仔豬的平均日增重,降低腹瀉率,但飼料轉(zhuǎn)化率提高不顯著。張軍民等[7]研究了G1n對(duì)飼喂生大豆仔豬腸道通途性和消化吸收能力的影響,指出G1n能夠有效緩解采食生大豆對(duì)仔豬腸道造成的損傷,改善氮代謝,降低腹瀉率,促進(jìn)腸道水分吸收。另據(jù)研究表明,G1n對(duì)仔豬小腸黏膜形態(tài)與功能保護(hù)作用,可以改善斷乳后的腹瀉情況,增強(qiáng)機(jī)體免疫能力,提高早期斷乳仔豬腸道消化酶活性及消化功能,從而提高仔豬對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性,進(jìn)而改善仔豬生產(chǎn)性能[8]。
當(dāng)前隨著肽營(yíng)養(yǎng)領(lǐng)域的研究越來越深入,人們發(fā)現(xiàn)肽比相同組成的游離氨基酸組合具有更強(qiáng)大的生理功能。肽由兩個(gè)及兩個(gè)以上的氨基酸通過肽鍵連接形成,它作為機(jī)體內(nèi)重要活性成分參與體內(nèi)多種生理活動(dòng)并發(fā)揮功能。肽的生理功能涉及機(jī)體的神經(jīng)調(diào)節(jié)、內(nèi)分泌、細(xì)胞代謝等多方面,并且協(xié)調(diào)機(jī)體不同系統(tǒng)發(fā)揮其相應(yīng)的功能。G1n單體在溶液中的溶解度低,其活性基團(tuán)不穩(wěn)定,遇熱時(shí)極容易變性,這些因素都影響到G1n的廣泛應(yīng)用。通過研究發(fā)現(xiàn),G1n單體的氮端被取代能夠提升其穩(wěn)定性和溶解度,肽中G1n的酰胺基穩(wěn)定性明顯高于單體G1n的酰胺基團(tuán),因此,G1n肽可以作為G1n單體的穩(wěn)定形式之一,代替其在動(dòng)物生產(chǎn)過程中的應(yīng)用。
動(dòng)物試驗(yàn)和人體試驗(yàn)都已經(jīng)證明了G1n小肽代替G1n單體的可行性和安全性[9]。蔣建文等[10]在全胃腸外營(yíng)養(yǎng)支持的豬自體移植小腸的營(yíng)養(yǎng)液中加入甘氨酰谷氨酰胺二肽后,豬自體移植小腸的腸道細(xì)胞代謝、生理形態(tài)、吸收功能以及防止細(xì)菌移位等方面都有顯著改善。Steh1e等指出,丙氨酰谷氨酰胺二肽能促進(jìn)體外培養(yǎng)的腸黏膜細(xì)胞的增殖,并具有改善回腸營(yíng)養(yǎng)的作用[9]。在早期斷乳仔豬日糧中應(yīng)用G1n肽,可以降低早期斷乳對(duì)仔豬造成的應(yīng)激,有效提高仔豬的生產(chǎn)性能[11]。席鵬彬等[12]、曾翠平[13]、楊彩梅[14]也有相似報(bào)道。
目前可以通過酶法、堿法、人工嫁接法及基因表達(dá)法等方法獲取肽。利用酶法分解小麥蛋白來制備小麥活性肽是近年來的研究熱點(diǎn)。小麥蛋白在酶的作用下,得到的小肽分子量大小容易控制且無毒,小麥蛋白原有的多種性質(zhì)發(fā)生了改變,包括乳化、起泡、吸水、增稠等性質(zhì),一定程度提高了小麥蛋白的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和生理功能[15]。酶解后得到的小肽中含有豐富的G1n活性肽,這些小分子肽可以被動(dòng)物腸道直接吸收,對(duì)動(dòng)物體發(fā)揮動(dòng)力、載體、運(yùn)輸、遞質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)等生理功能。
最早利用麥谷蛋白制得富含G1n活性肽的營(yíng)養(yǎng)液并申請(qǐng)專利的是日本的研究者[16]。最近的研究表明[17],利用小麥蛋白制得的G1n活性肽營(yíng)養(yǎng)液中有效G1n的量可以高達(dá)213.5 mg/g。Tanabe等[18]酶解谷蛋白后得到的富含G1n小肽的營(yíng)養(yǎng)液能夠顯著提高大鼠腸道黏膜的代謝速率,降低腸道炎癥的產(chǎn)生,其生理功能優(yōu)于相同氨基酸組成的氨基酸單體混合物。楊小軍等[19]給SD大鼠灌喂小麥蛋白的胃蛋白酶解物,能夠有效提高SD大鼠免疫器官的增殖,增加腸道SIgA的分泌量,增強(qiáng)腸道免疫功能。周業(yè)飛[20]利用彈性蛋白酶制得的小麥蛋白酶解物可以一定程度提高AA肉雞免疫器官的重量和免疫器官指數(shù)。王石等[21]研究表明,仔豬斷乳前期,在日糧中添加小麥蛋白酶解物能有效降低仔豬的腹瀉率,且效果優(yōu)于血漿蛋白添加組。國(guó)外最新研究表明,經(jīng)過特殊生化處理制得的水解小麥蛋白飼料,可提高仔豬飼料的消化效率,無抗?fàn)I養(yǎng)因子,可促進(jìn)仔豬腸道絨毛的發(fā)育,獲得較高的飼料轉(zhuǎn)化效率,可替代昂貴的噴霧干燥血漿蛋白(2.5%~8%),同時(shí)用作犢牛的代乳料,可替代大豆分離蛋白(5%~8%)[22]。
通過酶解法制取小麥蛋白源活性肽,特別是G1n肽因其各種優(yōu)點(diǎn)而受到青睞的同時(shí),在實(shí)際生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)室制備時(shí),酶解法因受酶特異性以及小麥蛋白特性影響,還存在酶解率低、產(chǎn)物純度差等不足之處。在保證酶解產(chǎn)物生物活性同時(shí)如何提高蛋白酶解效率仍然是需要解決的課題。此外,實(shí)際生產(chǎn)中酶解工藝線性放大也需要進(jìn)行更深入的研究[23]。
總之,G1n肽作為G1n切實(shí)可行的應(yīng)用形式,越來越受到人們的重視,并被越來越廣泛地應(yīng)用。在特定的工藝和生產(chǎn)條件下得到的小麥蛋白酶解物富含G1n肽,無抗原、無生物隱患、高蛋白、低灰分,是營(yíng)養(yǎng)的綠色添加劑,將其作為動(dòng)物的功能性營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑應(yīng)用于饑餓、創(chuàng)傷、斷乳、高溫等應(yīng)激條件下的動(dòng)物,這是動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究的一個(gè)方向。
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