方 潔，張愛珍，陳建國

巴拿巴的植物名為“大葉紫薇”，又名滿堂紅、海棠樹等，為落葉灌木，主要生長在澳洲和熱帶地區(qū)，在我國主要分布于廣東、廣西、福建、臺灣等地。在菲律賓、新加坡等東南亞國家，大葉紫薇被稱為“巴拿巴”，其葉、花和果實(shí)都被用于糖尿病的治療。巴拿巴軟膠囊是一種保健食品，其主要成分是以科羅索酸為主的3種植物酸，對于糖尿病患者有輔助降血糖作用[1-2]。本研究就巴拿巴軟膠囊對四氧嘧啶造模糖尿病小鼠血糖的影響進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物及試劑 選取健康、成熟、體質(zhì)量24～26 g、ICR小鼠200只，雌雄各半(由浙江省實(shí)驗(yàn)動物中心提供)，屬清潔級動物。小鼠在室溫20～25 ℃、相對濕度60%～70%條件下分籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食、飲水，密切觀察癥狀、體征和死亡情況。四氧嘧啶由Sigma公司生產(chǎn)，血糖試劑盒由寧波慈城生化試劑廠生產(chǎn)，0.9%氯化鈉注射液由揚(yáng)州中寶制藥有限公司生產(chǎn)。巴拿巴軟膠囊由杭州青春寶健康產(chǎn)品有限公司和杭州巴拿巴健康科技有限公司共同研制，本實(shí)驗(yàn)用的巴拿巴軟膠囊由杭州青春寶健康產(chǎn)品有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 小鼠糖尿病模型制備及分組方法 200只小鼠適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境5 d后，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)抽取30只小鼠(雌雄各半)作為正常對照組(NC組)，其余小鼠禁食24 h后按200 mg/kg腹腔注射四氧嘧啶0.9%氯化鈉注射液，72 h后測空腹血糖，取血糖值在15～30 mmol/L的小鼠120只，按血糖值、體質(zhì)量根據(jù)隨機(jī)表法分成糖尿病模型組(MC組)、巴拿巴高劑量組(HD組)、巴拿巴中劑量組(MD組)、巴拿巴低劑量組(LD組)，每組30只，雌雄各半。其中，MC組1只小鼠在實(shí)驗(yàn)過程中死亡，最終為29只。

1.2.2 給藥方法 臨用時(shí)將巴拿巴軟膠囊內(nèi)容物取出，用色拉油配置成所需濃度。巴拿巴按100、20、4 mg·kg-1·d-1溶于5 ml色拉油中分別給HD組、MD組、LD組小鼠灌胃，MC組和NC組小鼠等劑量色拉油灌胃。連續(xù)進(jìn)行42 d，分別在實(shí)驗(yàn)的第14天、第28天、第42天將小鼠禁食12 h，測量體質(zhì)量后測定血糖。

1.2.3 空腹血糖測定方法 小鼠禁食12 h，尾部采血，取血清按葡萄糖氧化酶法用試劑盒、島津UV-2100型紫外-可見光分光光度計(jì)測定血糖水平。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠體質(zhì)量的變化 各組小鼠給藥前及給藥后不同時(shí)間體質(zhì)量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F時(shí)間×組別=3.304，P<0.01；F時(shí)間=172.198，P<0.01；F組別=4.533，P<0.01)；MC組、LD組、MD組、HD組小鼠給藥前體質(zhì)量較NC組小鼠下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，符合糖尿病對機(jī)體體質(zhì)量的影響，提示造模成功。而給藥后，除了第28天時(shí)MD組小鼠體質(zhì)量高于MC組小鼠(P<0.05)外，其余各給藥組小鼠體質(zhì)量與MC組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表1)。

2.2 各組小鼠空腹血糖水平的變化 各組小鼠給藥前及給藥后不同時(shí)間空腹血糖水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F時(shí)間×組別=25.166，P<0.01，F(xiàn)時(shí)間=10.318，P<0.01；F組別=11.250，P<0.01)；給藥前，MC組、LD組、MD組、HD組小鼠空腹血糖較NC組升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，造模成功；給藥后第14天，LD組、HD組小鼠空腹血糖低于MC組，給藥后第28天LD組、MD組、HD組小鼠空腹血糖均低于MC組，給藥后第42天MD組、HD組小鼠空腹血糖低于MC組，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

組別只數(shù)給藥前給藥后第14天 第28天 第42天NC組3026 5±1 2 27 4±1 329 4±1 6 29 6±1 4MC組2921 3±1 9?25 4±1 225 6±1 8 27 0±2 0LD組3022 8±2 7?26 0±3 027 0±3 1 27 1±3 5MD組3023 2±1 5?26 0±1 527 8±2 3△27 5±2 2HD組3023 0±2 8?24 1±2 327 4±1 9 28 4±1 8F組間8 0641 8724 2672 486P0 0000 1310 050 056

注：NC組=正常對照組，MC組=糖尿病模型組，LD組=巴拿巴低劑量組，MD組=巴拿巴中劑量組，HD組=巴拿巴高劑量組；與NC組比較，*P<0.01，與MC組比較，△P<0.05

組別只數(shù)給藥前給藥后第14天 第28天 第42天NC組30 6 2±1 1 6 7±1 2 5 8±0 7 5 2±0 6 MC組2920 5±5 0▲28 2±4 4 29 5±4 1 25 5±4 7 LD組3020 5±5 0▲22 4±7 7?23 5±8 7?20 5±9 8 MD組3020 3±4 9▲23 7±7 2 23 1±7 4?17 3±8 6?HD組3020 2±4 6▲17 4±7 6△18 9±7 1△16 7±8 2△F組間23 28919 16821 64711 612P0 0000 0000 0000 000

注：與NC組比較，▲P<0.01；與MC組比較，*P<0.05，△P<0.01

2.3 各組小鼠胰島素水平的比較 給藥后第42天小鼠禁食12 h后眼眶采血，進(jìn)行胰島素水平測定。結(jié)果顯示NC組、MC組、LD組、MD組、HD組小鼠胰島素水平分別為(887±249)、(576±96)、(696±191)、(679±179)、(728±122)pg/ml，各組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=4.232，P=0.005)；其中HD組小鼠高于MC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

近年來，糖尿病患病率在我國呈逐年上升趨勢，糖尿病及其并發(fā)癥已成為除腫瘤和心腦血管疾病之外嚴(yán)重威脅我國人民健康的疾病，也是我國百姓看病難、看病貴的主要疾病之一。全國流行病學(xué)調(diào)查顯示，目前我國糖尿病患者約4 000多萬人，90%以上是由于生活方式和飲食結(jié)構(gòu)不當(dāng)引起的，而且發(fā)病年齡提前。流行病學(xué)資料顯示，糖尿病患者發(fā)生心血管疾病的危險(xiǎn)性是非糖尿病的2～4倍[3-5]，發(fā)生腦血管疾病的危險(xiǎn)性是非糖尿病的2倍[6-7]。此外，糖尿病是一種慢性、終生性疾病。有效控制血糖水平一般需終身用藥，糖尿病的醫(yī)療費(fèi)用占整個(gè)健康支出的比例已經(jīng)從基礎(chǔ)的2.5%增加到15.0%，并

且有逐年增長的趨勢，給患者及家庭帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，特別對農(nóng)村糖尿病患者來說，負(fù)擔(dān)更加沉重。目前臨床上使用的口服降糖藥都有一定的不良反應(yīng)。因此開拓研究具有調(diào)節(jié)血糖水平且無不良反應(yīng)的營養(yǎng)保健食品已引起廣泛關(guān)注。

本研究中所用的巴拿巴軟膠囊有效成分為科羅索酸，又名2α-羥基熊果酸，是一種三萜化合物，由巴拿巴葉子中提取出來的。大葉紫薇在東南亞國家作為一種東方傳統(tǒng)藥物用于治療糖尿病，它的葉子曾被報(bào)道有抗糖尿病功效。近年來，對大葉紫薇功能作用的研究越來越受到人們的關(guān)注，日本、美國、菲律賓等國家都對大葉紫薇的化學(xué)成分、功能作用等進(jìn)行研究。Syoichi等[8]用含1%科羅索酸的大葉紫薇提取物膠囊喂養(yǎng)小鼠，90 min后小鼠的血糖水平比對照組明顯下降。Judy等[9]臨床研究表明，科羅索酸能降低2型糖尿病患者的血糖。然而，其具體確切的機(jī)制尚不十分清楚。可能的機(jī)制為科羅索酸能刺激細(xì)胞膜的葡萄糖運(yùn)輸通道，增強(qiáng)細(xì)胞對葡萄糖的利用，進(jìn)而降低血糖水平。本研究亦發(fā)現(xiàn)，巴拿巴灌胃后隨著時(shí)間的延長小鼠空腹血糖有降低趨勢，尤其是高劑量灌胃的小鼠空腹血糖降低更為顯著，提示巴拿巴降血糖作用具有劑量依賴性及時(shí)間依賴性。

本研究還發(fā)現(xiàn)，HD組小鼠巴拿巴給藥后第42天胰島素水平顯著高于糖尿病模型小鼠，提示巴拿巴有促進(jìn)胰島素分泌的作用。2型糖尿病患者由于胰島素抵抗的發(fā)生和發(fā)展，人體對胰島素的利用率降低，先期會導(dǎo)致高胰島素血癥，引起代謝綜合征。晚期由于高血糖、高血脂對胰島β細(xì)胞產(chǎn)生的“糖毒性”和“脂毒性”作用，使胰島β細(xì)胞凋亡和死亡，引起胰島素分泌減少。而巴拿巴促進(jìn)胰島素分泌的作用，能促進(jìn)體內(nèi)血糖調(diào)節(jié)，有效幫助糖尿病患者控制血糖。

總之，巴拿巴能夠降低糖尿病小鼠的血糖水平，且此作用具有劑量依賴性和時(shí)間依賴性，但具體的作用環(huán)節(jié)和靶點(diǎn)還有待于進(jìn)一步研究。

1 Wen X，Sun H，Liu J，et al.Pentacyclic triterpenes.Part 1：the first examples of naturally occurring pentacyclic triterpenes as a new class of inhibitors of glycogen phosphorylases[J].Bioorg Med Chem Lett，2005，15(22)：4944-4948.

2 梁茂雨，陳怡平，縱偉.降血糖功能因子科羅索酸研究進(jìn)展[J].中國食物與營養(yǎng)，2007(5)：17-18.

3 Raza J A，Movahed A.Current concepts of cardiovascular diseases in diabetes mellitus[J].Int J Cardiol，2003，89(2/3)：123-124.

4 李兵強(qiáng),李廣平，袁如玉，等.正?？崭寡桥c心血管疾病危險(xiǎn)因素的相關(guān)性研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2011，14(1)：136.

5 范慧，張鵬睿，徐援.2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝與胰島素抵抗及心血管病變發(fā)生的關(guān)系研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2011，14(1)：147.

6 呂仁和.糖尿病及其并發(fā)癥中西醫(yī)診治學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1979：10.

7 王瑾.高血糖對腦血管病急性期患者預(yù)后的影響[J].實(shí)用心腦肺血管病雜志，2012，20(5)：859.

8 Syoichi H，Hideharu K，Katsuya K.Glucose effect on blood glucose in rats[J].Yakuri to Chiryo，1999，27(6)：1075-1077.

9 Judy WV,Hari SP,Stogsdill WW,et al.Antidiabetic activity of a standardized extract(Glucosol) from Lagerstroemia specious leaves in type Ⅱ diabetics.A dose-dependence study[J].Journal of Ethnopharmacology，2003，87(1)：115-117.