摘要:將新鮮生姜研磨過(guò)濾獲得100%鮮姜汁,稀釋成75%、50%、25% 3個(gè)梯度濃度,以無(wú)菌水作為對(duì)照,以大腸桿菌(Escherichia coli)、巨大芽孢桿菌(Bacillus magaterium)為試驗(yàn)菌,采用濾紙貼片法測(cè)定抑菌作用,比較不同濃度姜汁的抑菌活性。結(jié)果表明,隨著姜汁濃度的增大,抑菌作用增強(qiáng)。
關(guān)鍵詞:姜汁;抑制作用;大腸桿菌;巨大芽孢桿菌
中圖分類號(hào):R285,TS264 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2013)06-1315-02
生姜是姜屬植物姜(Zinggiber ofcinale Rosc)的根莖。姜是熱帶、亞熱帶地區(qū)的一種重要栽培植物,在中國(guó)的中部、東南部、西南部廣為栽培。生姜作為藥食兩用的植物在中國(guó)具有悠久的種植和食用的歷史。在中醫(yī)藥用性能上,生姜味辛、性溫,有開胃止嘔、化痰止咳、發(fā)熱解汗等作用,適用于外感風(fēng)寒、咳嗽、胃寒嘔吐或吐清水,也可用于增進(jìn)血行、驅(qū)散寒氣、益胃氣、助發(fā)汗。生姜中含有揮發(fā)性油,主要成分有姜醇、姜烯、甲基庚烯酮、姜辣素等[1]。醫(yī)學(xué)研究表明生姜對(duì)細(xì)菌有抑制作用,對(duì)陰道滴蟲有殺滅作用;有明顯的抗?jié)?、抗菌、治療心臟血管疾病等藥用保健功能[2,3]。其所含成分被證明有降血脂等功能[8,9]。生姜是一種天然的抗氧化劑,具有較好的保鮮作用,對(duì)食品工業(yè)和人體健康具有重要意義[4]。生姜在食品工業(yè)中作為抗氧化劑及防腐劑添加[5-7]。
現(xiàn)代科學(xué)研究證實(shí),生姜有消炎抗菌的作用。生姜的水浸劑對(duì)傷寒桿菌、鏈球菌、沙門氏菌、肺炎球菌有明顯的抑制作用,可用于治療痢疾和腹瀉。鮮姜汁對(duì)大腸桿菌、啤酒酵母、青霉菌有較明顯的抑菌作用。付愛華等[10]報(bào)道,生姜提取物用液態(tài)沙堡瓊脂培養(yǎng)基稀釋為0.062 5%~0.250 0%對(duì)培養(yǎng)基中的皮膚癬菌、紅色毛癬菌、犬小孢子菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌有極為顯著的抑菌、殺菌作用。陳碰玉等[11]研究發(fā)現(xiàn),新鮮生姜對(duì)幽門螺桿菌具有較好的抑菌作用。
試驗(yàn)以人體腸道常見微生物大腸桿菌(Escherichia coli)和巨大芽孢桿菌(Bacillus magaterium)為材料,利用濾紙片法測(cè)定抑菌圈,明確姜汁的抑菌作用,為生姜的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 材料與儀器
1.1.1 生物材料 生姜:鮮品,購(gòu)買于超市;供試菌種:大腸桿菌、巨大芽孢桿菌菌種均為商丘師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。
1.1.2 儀器 電磁爐、電子天平、高壓蒸汽滅菌鍋、電熱恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)等。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 姜汁的制備 將姜洗凈,晾干,放在紫外燈下照射20 min消毒[12]后放入無(wú)菌的研缽,在無(wú)菌操作臺(tái)上加入少許石英砂研磨,用4層紗布過(guò)濾得到鮮姜汁,定這時(shí)濃度為100%,用無(wú)菌水稀釋(V/V)到75%、50%、25%,即得到4個(gè)濃度的姜汁。
1.2.2 培養(yǎng)基的制備 稱取牛肉膏5 g、蛋白胨10 g、氯化鈉5 g、瓊脂20 g,量取1 000 mL蒸餾水,混合加熱至完全溶解,調(diào)節(jié)pH至7.0~7.4后分裝于250 mL三角瓶中,同時(shí)制試管斜面,滅菌[13]。
1.2.3 菌種的活化 將大腸桿菌和巨大芽孢桿菌按照無(wú)菌操作規(guī)程分別接入試管斜面, 37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。
1.2.4 菌懸液的制備 用接種環(huán)挑取一定量的活化后的大腸桿菌和巨大芽孢桿菌菌苔,放入裝有10 mL無(wú)菌水的試管中,振蕩5 min,使菌體充分散開,制成2種菌的菌懸液。
1.2.5 抑菌試驗(yàn) 采用濾紙片法[14],取直徑6 mm的滅菌濾紙片放入各濃度的姜汁中浸泡30 min,對(duì)照濾紙片用無(wú)菌水浸泡。將待試菌懸液各1 mL加于平板培養(yǎng)基后用無(wú)菌涂布棒涂布均勻制成含菌平板,平板靜置30 min后用無(wú)菌鑷子把濾紙片貼在含菌平板上,每個(gè)平板放4片同種濾紙片,每個(gè)濃度4個(gè)重復(fù),每組1個(gè)對(duì)照。平板于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48 h,取出測(cè)定并記錄抑菌圈直徑,比較不同濃度姜汁的抑菌效果。
2 結(jié)果與分析
抑菌圈測(cè)量結(jié)果見表1、表2。由表1、表2可見,姜汁濃度越大,抑菌效果越強(qiáng),抑菌圈直徑越大。空白對(duì)照均未出現(xiàn)抑菌圈,說(shuō)明濾紙片對(duì)兩種受試菌均無(wú)抑菌活性。
3 小結(jié)與討論
實(shí)驗(yàn)以大腸桿菌和巨大芽孢桿菌作為受試菌種,研究鮮姜汁的抑菌活性,證明姜汁對(duì)2種細(xì)菌具有明顯的抑菌作用,與鄭俏然等[15]用乙醇提取法進(jìn)行的試驗(yàn)結(jié)果相比較,抑菌圈直徑明顯較小,可能是由于多種因素影響導(dǎo)致結(jié)果的不同。生姜中揮發(fā)油的化學(xué)提取工藝有索氏法、超臨界CO2流體萃取法、水蒸氣蒸餾法、共水回流冷凝法等[16]。本試驗(yàn)采用的是鮮姜直接研磨提取,并且未進(jìn)行濃縮處理,結(jié)果的差異可能是由于提取工藝的差別造成的。鮮姜汁對(duì)巨大芽孢桿菌的抑菌研究尚未有相關(guān)的報(bào)道,本試驗(yàn)證明鮮姜汁對(duì)巨大芽孢桿菌有抑菌作用。
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