王瓊瑤，童曉文，紀(jì)亞忠

(上海市同濟(jì)醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，上海 200065)

Downs綜合征(Downs syndrome，DS)，又稱 21三體綜合征，是發(fā)現(xiàn)最早、最常見(jiàn)的染色體病，在新生兒中的發(fā)病率為1/600～1/800［1］，占新生兒染色體病的70%～80%。母親生育年齡是影響其發(fā)病率的重要因素(大于35歲時(shí)發(fā)病率明顯增高)。DS患兒出生時(shí)體質(zhì)量偏低，肌張力低下，頭顱小而圓，臉圓而扁平，臉裂細(xì)且上外傾斜，眼距過(guò)寬，常有斜視，嘴小唇厚，舌大外伸(伸舌樣癡呆之名由此而來(lái))，形成特有的面容。約1/2以上的患者有先天性心臟病，主要是室間隔缺損、動(dòng)脈導(dǎo)管未閉等。男性患者常有隱睪，睪丸有生精過(guò)程，但精子常減少，性欲下降，尚未見(jiàn)有生育者。女性患者通常無(wú)月經(jīng)，但少數(shù)能妊娠和生育。精神發(fā)育遲滯或智能低下是本病最突出最嚴(yán)重的表現(xiàn)?；颊咂骄鶋勖鼮?6.2歲［2］，其生活往往不能自理，其社會(huì)適應(yīng)和勞動(dòng)能力較差，給家庭和社會(huì)造成了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。2003年，我國(guó)每一新發(fā)病例造成39萬(wàn)元的家庭經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，給社會(huì)造成約45萬(wàn)元負(fù)擔(dān)，而所有新發(fā)病例造成的社會(huì)負(fù)擔(dān)達(dá)81億元［3］。產(chǎn)前篩查和診斷能在孕早期識(shí)別胎兒嚴(yán)重的缺陷，及時(shí)干預(yù)，從而減少缺陷兒的出生。我國(guó)目前對(duì)年齡35歲以上的孕婦進(jìn)行產(chǎn)前篩查，對(duì)篩查高危的孕婦常規(guī)行進(jìn)一步的診斷，這對(duì)產(chǎn)前檢出DS胎兒、防止這類胎兒的出生起到了一定作用。本文就近年來(lái)該綜合征的產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷研究進(jìn)展綜述如下。

1 產(chǎn)前篩查

Downs綜合征的產(chǎn)前篩查根據(jù)孕期，即在孕早期及孕中期均有不同的標(biāo)志物。孕早期(11～13周)篩查常用的指標(biāo)有:胎兒頸后透明層(nuchal translcene，NT)厚度、孕婦血清游離 β-hCG、妊娠相關(guān)血漿蛋白A(pregnancy associated plasma protein A，PAPP-A)及孕婦年齡。NT是覆蓋胎兒頸部脊柱軟組織和皮膚之間的皮下透明層，在早孕期NT的增厚與2l三體的高風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。hCG為胎盤(pán)分泌的一種糖蛋白激素，在孕10周前隨著孕齡的增加而增加，隨后隨著孕齡逐漸減少，在早、中孕期，孕21三體胎兒孕婦的血hCG高于孕正常胎兒的孕婦。PAPP-A是一種胎盤(pán)合成的高分子量的糖蛋白，在早孕期隨著妊娠周數(shù)增加，母體血清PAPP-A水平也增加。將這三種篩查標(biāo)志物聯(lián)合起來(lái)共同評(píng)估胎兒患Downs綜合征的風(fēng)險(xiǎn)，可提高檢出率［4］。

孕中期(15～20周)母血篩查是最經(jīng)典的方法，臨床上常用的有二聯(lián)篩查和三聯(lián)篩查。二聯(lián)篩查即以血清甲胎蛋白(AFP)和游離β-hCG為指標(biāo)，結(jié)合孕婦年齡等參數(shù)計(jì)算胎兒患Downs綜合征風(fēng)險(xiǎn)的方法。將AFP、hCG和雌三醇(μE3)三項(xiàng)指標(biāo)合起來(lái)進(jìn)行所謂三聯(lián)篩查。研究［5］顯示在AFP下降的同時(shí)，母血中hCG明顯增高，通常可達(dá)正常孕婦2倍以上，游離μE3的水平則比正常低25%左右，且各指標(biāo)間相互獨(dú)立。

目前，妊娠中期的血清三聯(lián)檢測(cè)因其檢測(cè)通量高、價(jià)廉，是使用最廣泛的組合。一般情況下DS檢出率為 65% ～75%［6］，假陽(yáng)性率 5%［7］。另外，將AFP值、hCG值以及孕婦的年齡、體質(zhì)量、懷孕周數(shù)利用產(chǎn)前篩查軟件可計(jì)算出胎兒患Downs綜合征的風(fēng)險(xiǎn)。如果結(jié)果顯示低于1/270，就表示胎兒患病風(fēng)險(xiǎn)較低，不到1%。但如果高于1/270，就表示胎兒患病的危險(xiǎn)性較高，應(yīng)做羊膜腔穿刺進(jìn)一步檢查。

產(chǎn)前篩查對(duì)孕婦及胎兒的創(chuàng)傷小，且費(fèi)用低，普遍應(yīng)用可以減少Downs綜合征兒的出生率，減輕國(guó)家及家庭的負(fù)擔(dān)。但是，我國(guó)目前產(chǎn)前篩查的工作尚不規(guī)范，各實(shí)驗(yàn)室間變異系數(shù)較大［8］。另外由于不能準(zhǔn)確確定孕齡，不在空腹?fàn)顟B(tài)下采血，篩查出高風(fēng)險(xiǎn)后確診率低，活產(chǎn)兒隨訪時(shí)間短或缺乏隨訪等，使得篩查的結(jié)果不理想［5］。

2 產(chǎn)前診斷

產(chǎn)前診斷的適應(yīng)證有［9］:①年齡＞35歲;②有染色體病或家族中有遺傳病;③有先天畸形兒或染色體病兒孕史，或有習(xí)慣性流產(chǎn)史;④Downs篩查高危;⑤超聲檢查胎兒NT＞3 mm;⑥孕期超聲檢查有胎畸形或?qū)m內(nèi)發(fā)育不良。

2.1 侵入性產(chǎn)前診斷 傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷為侵入性方法，通過(guò)羊膜腔穿刺、絨毛取樣或臍靜脈穿刺取材，獲得胎兒細(xì)胞進(jìn)行診斷。

2.1.1 羊膜腔穿刺術(shù) 是產(chǎn)前診斷最常用的取材方法。由于胎齡大的羊水細(xì)胞活力較差，細(xì)胞培養(yǎng)難以成功，且胎兒宮內(nèi)活動(dòng)較頻繁，取羊水時(shí)易損傷胎兒，所以通常認(rèn)為羊膜腔穿刺的最佳時(shí)期為16～20周［10］。羊膜腔穿刺術(shù)有多種并發(fā)癥，近來(lái)文獻(xiàn)［11］報(bào)道孕中期羊膜腔穿刺的胎兒丟失率在0.5% ～1.0%之間。有2% ～3%孕婦可出現(xiàn)子宮收縮、腹部腫脹、壓痛、陰道出血、感染、漏水或胎兒損傷等并發(fā)癥［12］。

2.1.2 臍靜脈穿刺術(shù) 1983年Daffos等［13］報(bào)道了在超聲引導(dǎo)下經(jīng)母腹行臍靜脈穿刺術(shù)，使染色體疾病的產(chǎn)前診斷有了新的途徑。但是臍靜脈穿刺術(shù)技術(shù)要求較高，不同的孕周在技術(shù)上存在著差異。孕周過(guò)小時(shí)，臍血管直徑太小不易刺入，刺中后也易脫落;孕周過(guò)大，則胎兒軀體遮蓋臍帶，使臍帶暴露差，且臍帶角質(zhì)較厚不易刺通，故一般以孕18～26周為宜［14］。該穿刺術(shù)的并發(fā)癥比羊膜腔穿刺多，如出血、流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎兒心動(dòng)過(guò)緩、穿刺后畸形羊水過(guò)多等。臍帶穿刺術(shù)的胎兒丟失率為1.2% ～4.9%［15］。

2.1.3 絨毛取樣法 有經(jīng)腹絨毛取樣、經(jīng)陰道絨毛取樣兩種途徑，多在早孕期B型超聲引導(dǎo)下進(jìn)行。因有流產(chǎn)、宮內(nèi)感染、羊水滲漏、血腫及母體免疫反應(yīng)等并發(fā)癥，故術(shù)前要對(duì)孕婦進(jìn)行詳細(xì)全面的病史了解、全身檢查、婦科檢查及必要的化驗(yàn)檢查。

2.2 非侵入性產(chǎn)前診斷 由于傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷為侵入性操作取得標(biāo)本，不僅對(duì)胎兒及孕婦造成一定的創(chuàng)傷，并且會(huì)帶來(lái)一些臨床并發(fā)癥，因此尋找和建立一種行之有效的非創(chuàng)性產(chǎn)前診斷方法，降低產(chǎn)前診斷風(fēng)險(xiǎn)、減少成本、縮短診斷時(shí)間，是目前產(chǎn)前診斷研究的方向。國(guó)內(nèi)外已有多種無(wú)創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的研究，多是通過(guò)母血中胎兒的遺傳物質(zhì)進(jìn)行診斷。母血中胎兒的遺傳物質(zhì)主要有:胎兒有核細(xì)胞、胎兒游離DNA、胎兒游離RNA，目前用于產(chǎn)前診斷研究較多的是胎兒有核細(xì)胞和胎兒游離DNA。

2.2.1 母血中胎兒有核細(xì)胞 1969年，Walknowsks等［16］首次報(bào)道在母血循環(huán)中可能存在胎兒細(xì)胞，隨后一些學(xué)者相繼證實(shí)了這一發(fā)現(xiàn)。進(jìn)入20世紀(jì)90年代以來(lái)，隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等技術(shù)的發(fā)展與完善，形成了從母血循環(huán)中識(shí)別、分離和檢測(cè)胎兒細(xì)胞等一系列遺傳學(xué)診斷技術(shù)，并應(yīng)用于產(chǎn)前診斷。孕婦血中胎兒細(xì)胞的主要類型包括滋養(yǎng)層細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、有核紅細(xì)胞(NRBC)等。①滋養(yǎng)層細(xì)胞是最早被發(fā)現(xiàn)存在于母體外周血循環(huán)中的胎兒細(xì)胞，存在時(shí)間從4～5周至分娩后，數(shù)量多且形態(tài)特別，但是由于細(xì)胞常具有多核及嵌合核型特征，從而影響遺傳學(xué)結(jié)果分析。因此滋養(yǎng)層細(xì)胞在非侵入性產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用尚有許多問(wèn)題需要解決。②胎兒淋巴細(xì)胞因在母血循環(huán)中出現(xiàn)的時(shí)間晚，存在時(shí)間長(zhǎng)(長(zhǎng)達(dá)1～5年)，且量極少(僅為胎兒NRBC的0.1%)，難以用于產(chǎn)前診斷。③胎兒有核紅細(xì)胞是母血中分離量最多也是最容易分離得到的細(xì)胞，在妊娠6周時(shí)即可出現(xiàn)，妊娠13周時(shí)達(dá)高峰，后隨著孕齡的增加而減少，產(chǎn)后3個(gè)月即從母體循環(huán)中消失。且NRBC攜帶胎兒全部基因組信息，可提供遺傳學(xué)和分子生物學(xué)分析。母血循環(huán)中的胎兒有核紅細(xì)胞，可以通過(guò)熒光激活細(xì)胞分離技術(shù)(fluorescence-activated cell sorting，F(xiàn)ACS)和磁性細(xì)胞分離技術(shù)(magnetic cell sorting，MACS)分離純化［17-18］，然后通過(guò)PCR或FISH技術(shù)對(duì)胎兒?jiǎn)位虿』蛉旧w異常進(jìn)行診斷。目前已經(jīng)可以成功地進(jìn)行13-三體、18-三體、21-三體等非整倍體胎兒的產(chǎn)前診斷。

2.2.2 母血胎兒游離 DNA 1997 年，Lo等［19］在母體外循環(huán)中發(fā)現(xiàn)了胎兒來(lái)源的游離DNA，從而為無(wú)創(chuàng)性產(chǎn)前診斷又提供了一個(gè)獲取胎兒遺傳物質(zhì)的新選擇。研究發(fā)現(xiàn)，胎兒游離DNA在孕5周時(shí)即可在孕婦外周血中檢測(cè)到，并隨孕周數(shù)增加而升高。血漿中胎兒DNA的清除半衰期約為16.3 min，分娩后2 h孕婦血漿已經(jīng)檢測(cè)不到胎兒DNA。胎兒DNA的提取方法有多種，Chiu等［20］將孕婦外周血經(jīng)EDTA抗凝之后，以1 600 g離心10 min，取上清液重復(fù)離心1次，然后按照血樣DNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)中血液或體液DNA的提取方案提取DNA，該方法是目前最為常用的提取方法。

2.3 產(chǎn)前診斷方法 用于產(chǎn)前診斷的方法有多種，較常見(jiàn)的有細(xì)胞遺傳學(xué)方法和分子生物學(xué)技術(shù)。

2.3.1 細(xì)胞遺傳學(xué)方法 細(xì)胞遺傳學(xué)方法是傳統(tǒng)的、臨床上最常用的染色體數(shù)目異常的診斷方法，也是18-三體、21-三體等染色體疾病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。其主要從染色體的數(shù)目形態(tài)和結(jié)構(gòu)來(lái)研究人類的遺傳現(xiàn)象。在產(chǎn)前診斷中，常將取得的絨毛、羊水、臍帶血進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，將培養(yǎng)后的細(xì)胞進(jìn)行核型鑒定，以發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)的改變。利用絨毛進(jìn)行染色體核型分析，由于結(jié)果易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性，所以核型異常者需要進(jìn)行羊水細(xì)胞培養(yǎng)以明確診斷。為了正確診斷，羊水細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)至少有15個(gè)以上可供分析的核型，顯帶應(yīng)達(dá)到400條左右。故該方法需要較長(zhǎng)時(shí)間的細(xì)胞培養(yǎng)及大量的人工操作，對(duì)染色體核型分析人員技術(shù)要求高，失敗風(fēng)險(xiǎn)較大。在羊水細(xì)胞培養(yǎng)失敗、DNA分析無(wú)法診斷或錯(cuò)過(guò)絨毛和羊水取樣時(shí)機(jī)等情況下，可利用臍帶血進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)分析。

2.3.2 分子生物學(xué)技術(shù) 分子生物學(xué)技術(shù)是近幾年發(fā)展起來(lái)的診斷方法。常用于染色體疾病產(chǎn)前診斷的技術(shù)有:熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR)、引物延伸預(yù)擴(kuò)增法(primer extension prea-mplification，PEP)、套式PCR。

2.3.2.1 FISH FISH 是在 20 世紀(jì) 80 年代末在的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非放射性分子細(xì)胞遺傳技術(shù)，以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法。FISH的基本原理是將DNA或RNA探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記，然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上，再用熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與分子特異性結(jié)合來(lái)檢測(cè)DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析。常用的探針有以下三類:①染色體重復(fù)序列探針，主要是指著絲粒α-衛(wèi)星 DNA重復(fù)序列探針和端粒重復(fù)序列探針，用以檢測(cè)染色體數(shù)目異常，同時(shí)由于G顯帶時(shí)，端粒區(qū)是蒼白的，因此涉及此區(qū)的易位常難以檢測(cè)，而應(yīng)用端粒探針則彌補(bǔ)了G顯帶的不足;②染色體涂染探針，包括通過(guò)流式分選或顯微切割獲得的全染色體或染色體臂以及特異性區(qū)帶的涂染探針，用以檢測(cè)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常;③染色體單一序列探針，包括各類人工染色體探針，如酵母人工染色體(yeast artificial chromosome，YAC)、細(xì)菌人工染色體(bacterial artificial chromosome，BAC)、P1 人工染色體(P1 artificial chromosome，PAC)探針，主要用以識(shí)別染色體的易位、缺失和擴(kuò)增。目前國(guó)產(chǎn)的已用于臨床的染色體診斷的FISH 探針有:21、18、13/21、13/18 號(hào)和 X、Y 等探針［21-22］。FISH比傳統(tǒng)的核型分析操作簡(jiǎn)便迅速、直觀性強(qiáng)，可用于外周血細(xì)胞、臍血、未經(jīng)培養(yǎng)的分裂期和間期細(xì)胞。間期細(xì)胞容易獲得，且其數(shù)量多使分析的細(xì)胞數(shù)目也相應(yīng)的增多，這是FISH技術(shù)最大的優(yōu)勢(shì)。但FISH探針試劑價(jià)格昂貴，極大限制了它在臨床上的應(yīng)用。

2.3.2.2 RTFQ PCR 雖然孕婦血中胎兒游離DNA較胎兒完整細(xì)胞含量豐富，但其絕對(duì)量仍然微乎其微，PCR技術(shù)的發(fā)展使得極少量的胎兒DNA不再成為限制產(chǎn)前基因診斷的因素。熒光定量PCR在1993年首次被應(yīng)用于Downs綜合征的產(chǎn)前診斷［23］。其原理是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記探針，通過(guò)光電傳導(dǎo)系統(tǒng)直接探測(cè)PCR擴(kuò)增過(guò)程中熒光信號(hào)的變化來(lái)獲得定量結(jié)果，所以還具有DNA雜交的高特異性和光譜技術(shù)的高精確性。應(yīng)用于染色體異常的產(chǎn)前診斷時(shí)，常選用目標(biāo)染色體上的幾個(gè)微衛(wèi)星重復(fù)序列STR作為標(biāo)記，利用PCR擴(kuò)增，將其產(chǎn)物熒光染色后，根據(jù)熒光強(qiáng)度的變化，確定是否存在染色體數(shù)目的異常。該方法在每次實(shí)驗(yàn)中均有管家基因?yàn)閮?nèi)參照基因，通過(guò)穩(wěn)定的內(nèi)參照基因校正，可以較準(zhǔn)確地反映目的及數(shù)量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的整個(gè)反應(yīng)過(guò)程以及結(jié)果的測(cè)定都在密閉儀器中自動(dòng)完成，避免了由于污染造成的假陽(yáng)性。與常規(guī)PCR相比，實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有特異性更強(qiáng)、數(shù)據(jù)穩(wěn)定、有效解決PCR污染和自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。該方法對(duì)普通染色體非整倍體檢測(cè)的靈敏度非常高，平均為99.2%，并且在很多研究中心敏感度達(dá)到了100%［24-25］?，F(xiàn)已在國(guó)外多個(gè)產(chǎn)前診斷中心被廣泛應(yīng)用［25-27］，將QF-PCR的陽(yáng)性結(jié)果作為終止妊娠的指征［28］。

2.3.2.3 基因組測(cè)序 基因組測(cè)序技術(shù)可應(yīng)用于母血中胎兒有核紅細(xì)胞的檢測(cè)，也可應(yīng)用于分析母血中胎兒游離DNA。用于Downs綜合征產(chǎn)前診斷的技術(shù)主要是大規(guī)模并行基因組測(cè)序技術(shù)，其基本原理是對(duì)孕婦血漿中的所有DNA片段進(jìn)行高通量測(cè)序，然后對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行生物信息分析，由于孕21三體胎兒的孕婦外周血中21號(hào)染色體的游離DNA比例高于孕正常胎兒的孕婦，因此可計(jì)算出胎兒患Downs綜合征的風(fēng)險(xiǎn)。2008年，Chiu等［29］利用此技術(shù)檢測(cè)了28例孕婦外周血標(biāo)本，其中14例Downs綜合征胎兒和14例正常胎兒均被準(zhǔn)確檢測(cè)。2010年，Lo等［30］的研究也證明了該技術(shù)應(yīng)用于利用母血胎兒游離DNA進(jìn)行非侵入性產(chǎn)前診斷是可行的。2011年，Chiu等［31］的研究中，該項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于產(chǎn)前診斷，Downs綜合征胎兒的檢出率達(dá)100%。該技術(shù)有所需樣本量少、檢出率高等優(yōu)點(diǎn)，但因容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果、檢測(cè)準(zhǔn)確率不高而在臨床上廣泛應(yīng)用有一定的局限性。

2.3.2.4 套式PCR 原理是針對(duì)某一個(gè)待檢基因，設(shè)計(jì)兩對(duì)特異性引物，其中一對(duì)引物巢居于另一對(duì)引物擴(kuò)增產(chǎn)物的內(nèi)部。首先利用外側(cè)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得一定量的產(chǎn)物后，再用第二對(duì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，PCR反應(yīng)的敏感性和特異性都得到明顯提高。其缺點(diǎn)就是第二對(duì)引物擴(kuò)增時(shí)引起交叉污染的概率較大。

2.3.2.5 PEP-PCR 引物延伸預(yù)擴(kuò)增法(primer extension prea-mplification，PEP)是一種通過(guò)隨機(jī)引物將細(xì)胞克隆或單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行全基因組擴(kuò)增，有效地使模板DNA的含量達(dá)到足以被檢測(cè)水平的方法。在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行特異序列的擴(kuò)增，即聚合酶鏈反應(yīng)即可完成對(duì)微量靶基因的分析。它對(duì)于用孕婦外周血中極少量的胎兒遺傳物質(zhì)進(jìn)行產(chǎn)前基因診斷十分重要，使一個(gè)樣本完成多個(gè)位點(diǎn)的基因分析成為可能。目前已有研究，將母血中單個(gè)NRBC應(yīng)用PEP-PCR擴(kuò)增技術(shù)進(jìn)行產(chǎn)前診斷的報(bào)道［32］。

2.3.3 兩種方法的比較 分子生物學(xué)技術(shù)與傳統(tǒng)的G顯帶核型分析相比具有以下優(yōu)點(diǎn):快速。核型分析方法因需要對(duì)胎兒細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)然后進(jìn)行，通常從獲得標(biāo)本到出報(bào)告需要2～3周的時(shí)間，而利用QF-PCR或者FISH技術(shù)不需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，可以直接提取胎兒DNA進(jìn)行試驗(yàn)，整個(gè)過(guò)程只需數(shù)小時(shí)，孕婦及家人可以在采集標(biāo)本后的24～48 h內(nèi)收到診斷報(bào)告，大大縮短孕婦等待時(shí)間及減輕其在等待期間的焦慮。陽(yáng)性結(jié)果的孕婦，可以及早終止妊娠，爭(zhēng)取最佳醫(yī)療處理時(shí)間。所需樣本量少。完成核型分析至少需要15～20 ml的羊水標(biāo)本或2～4 mg的絨毛標(biāo)本，而QF-PCR和FISH只需要2 ml外周血就可以完成實(shí)驗(yàn)［33］。成本低。與核型分析相比較，分子生物學(xué)技術(shù)的檢測(cè)成本大大減低，可以大大減輕孕婦及家人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。操作簡(jiǎn)便。核型分析操作復(fù)雜，對(duì)操作人員技術(shù)要求高，而應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)操作簡(jiǎn)便，并且可以自動(dòng)化操作，適合在我國(guó)現(xiàn)有國(guó)情下進(jìn)行大規(guī)模應(yīng)用。但是分子生物學(xué)技術(shù)仍有一些不足之處，如熒光定量PCR技術(shù)目前只能夠檢測(cè)21、18、13、X及Y5種染色體非整倍體，無(wú)法對(duì)所有染色體進(jìn)行檢測(cè)。且存在一定的局限性，若單獨(dú)應(yīng)用將會(huì)有染色體結(jié)構(gòu)異常及嵌合體不能檢出。

3 展望

利用母血中胎兒的遺傳物質(zhì)進(jìn)行Downs綜合征的產(chǎn)前診斷，因取材無(wú)創(chuàng)、檢測(cè)時(shí)間短有著明顯的優(yōu)勢(shì)。無(wú)創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的基礎(chǔ)研究已取得很大進(jìn)展，臨床應(yīng)用研究也取得了初步成功，但由于其尚處于起步階段，在臨床應(yīng)用中仍存在有許多問(wèn)題，如何有效地提取胎兒DNA，避免母血細(xì)胞的污染，以及減少費(fèi)用等等。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展，這些問(wèn)題逐步被解決，無(wú)創(chuàng)性的產(chǎn)前檢查技術(shù)可望成為產(chǎn)前診斷的常規(guī)。

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