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對乙肝“小三陽”前S1灰區(qū)結(jié)果分析

2013-08-24 07:44:30農(nóng)榮欣
實驗與檢驗醫(yī)學(xué) 2013年6期
關(guān)鍵詞:灰區(qū)小三陽拷貝

農(nóng)榮欣

(平南縣第二人民醫(yī)院檢驗科,廣西 平南537307)

乙型肝炎病毒(HBV)為嗜肝DNA病毒,其外膜蛋白包括S、前S1、前S2三種成分。前S1蛋白主要存在于Dane顆粒及管狀顆粒上,具有較高免疫原性。前S1蛋白在病毒感染、裝配、復(fù)制和機(jī)體免疫應(yīng)答方面起著重要作用。因此,國內(nèi)外許多學(xué)者對前S1蛋白的研究都比較深入,但有關(guān)前S1抗原研究的相關(guān)報道主要偏重于HBeAg與HBVDNA關(guān)聯(lián)方面,而對乙肝“小三陽”前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)作為研究對象的報道甚少。隨著對HBV檢測、預(yù)防、治療措施的發(fā)展和應(yīng)用,HBV感染傳播方式即已發(fā)生了根本的改變。HBeAb陽性以往被認(rèn)為是機(jī)體對乙肝病毒感染具有保護(hù)和預(yù)后良好的征象,但在現(xiàn)實的檢測中,我們發(fā)現(xiàn)HBeAb陽性的部分患者仍可檢測出HBV-DNA和HBVPreS1陽性,說明這一部分病人仍有病毒復(fù)制并具有傳染性。目前HBeAg陰性的乙肝患者正在不斷遞增,并隨著對前S1抗原在乙肝發(fā)病機(jī)制,病毒感染與復(fù)制等方面研究深入,發(fā)現(xiàn)還有一部分這樣的病人仍存在病毒復(fù)制,本文對192例乙肝“小三陽”前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本作為對象,研究分析前S1抗原顯色深淺與其標(biāo)本的HBV-DNA拷貝/ml量的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集本實驗室于2007年10月至2009年3月間,在我院就診的乙肝“小三陽”(經(jīng)兩對半+前S1抗原檢驗)前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本192例,其中男性106例,女性86例,年齡8~64歲。留取清晨空腹時靜脈血3.5 ml,分離血清,-20℃凍存待檢。

1.2 試劑 HBV-M試劑盒由英華新科(廈門)科技有限公司提供,前S1抗原試劑盒由上海阿爾法生物技術(shù)有限公司提供,HBV-DNA熒光定量分析試劑盒由深圳達(dá)爾安生物工程有限公司提供。

1.3 儀器 深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司RT-2100C酶標(biāo)儀,新波生物Egate2310洗板機(jī),Line Gene熒光定量分析儀。

1.4 方法

1.4.1 所有標(biāo)本均經(jīng)ELISA方法進(jìn)行HBV-M檢測,質(zhì)控品試劑盒自帶,嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。結(jié)果判定:ELISA方法以標(biāo)本吸光度(A)值與臨界A值的比值 (S/CO)≥1.00為陽性,HBeAb與HB-cAb測定則相反,以≤1.00為陽性。

通過大數(shù)據(jù)智能分析出的數(shù)據(jù),可以為企業(yè)設(shè)計人員提供用戶所需要的設(shè)計元素,例如分析用戶群體的年齡、消費(fèi)能力、消費(fèi)興趣等,推測用戶最需求的金融服務(wù)[8]。為設(shè)計者提供新的設(shè)計思路,使設(shè)計出的產(chǎn)品更具有針對性,更加滿足用戶的使用需求,甚至目前很多金融產(chǎn)品可以實現(xiàn)用戶自行設(shè)計購買方案,十分便捷。靈芝系統(tǒng)就是相對于普適性的信用評價系統(tǒng),采用更多的數(shù)據(jù)類型,對于特殊類型的企業(yè)和個人進(jìn)行獨(dú)特的數(shù)據(jù)分析,獲得更加有針對性的數(shù)據(jù)和結(jié)果,不但能夠有效地進(jìn)行風(fēng)險防控,也能以此為根據(jù)設(shè)計更加符合其消費(fèi)傾向的金融產(chǎn)品,以獲得更加廣闊的市場。

1.4.4 統(tǒng)計學(xué)處理 用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,計數(shù)資料數(shù)據(jù)間比較用χ2檢驗。

1.4.3 乙肝前S1抗原檢測采用雙抗體夾心ELISA方法,質(zhì)控品試劑盒自帶,其試驗操作嚴(yán)格按說明書執(zhí)行,設(shè)陰性、陽性和空白對照,用酶標(biāo)儀(450/630nm)讀取各孔OD值,以O(shè)D值>0.105為陽性,臨界值(CUTOFF)=2.1×陰性對照平均O.D值,計算值小于臨界值為陰性。

(2)從單一參數(shù)探測功能向多參數(shù)探測功能方向發(fā)展。目前具有多種單一探測功能的激光雷達(dá)技術(shù),利用理論模型將多種技術(shù)進(jìn)行有機(jī)融合,是降低探測成本和提高探測效率的有效途徑。

2 結(jié)果

本研究提示乙肝“小三陽”前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本中,仍有高達(dá)92.2%(177/192)標(biāo)本HBV-DNA載量均>103拷貝/ml,且隨著HBV-DNA含量越高其前S1抗原陽性率基本呈上升趨勢。這種情況可能是機(jī)體免疫清除不完全和乙肝病毒株變異所致,且多易發(fā)生在慢性肝炎。

1.4.2 HBV-DNA的檢測 將預(yù)備好的DNA模板和定量的陽性模板同時在Line Gene熒光定量分析儀上進(jìn)行DNA擴(kuò)增和分析。擴(kuò)增參數(shù):93℃預(yù)變120s,再按93℃ 30s,55℃ 60s擴(kuò)增30個循環(huán),儀器自動計算樣品中的DNA拷貝數(shù)。

表1 血清HBV-DNA水平與前S1抗原顯色之間的關(guān)系

3 討論

血清學(xué)檢測結(jié)果認(rèn)為前S1抗原與HBV-DNA陽性率高度吻合,尤其部分HBeAg陰性的乙肝患者前S1抗原與HBV-DNA陽性率亦無顯著差異,但在前S1抗原處于灰區(qū)的標(biāo)本要做進(jìn)一步確認(rèn)試驗。本研究對192例到院就診的乙肝“小三陽”(經(jīng)兩對半+前S1抗原檢驗)前S1抗原結(jié)果處于灰區(qū)標(biāo)本進(jìn)行HBV-DNA檢測表明:143例HBVDNA>103拷貝/ml,49 例 HBV-DNA<103拷貝/ml。復(fù)查前S1抗原結(jié)果,有31例為陽性,146例仍處在灰區(qū),另有15例前S1抗原為陰性并且其HBVDNA載量<103拷貝/ml,陰性率7.8%(15/192),其余177例標(biāo)本HBV-DNA載量均>103拷貝/ml為陽性病例,陽性率高達(dá)92.2%(177/192),HBV-DNA組與HBV-PreS1組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。前S1抗原顯色深淺與其標(biāo)本的HBV-DNA拷貝/ml量相關(guān),見表1。

干擾素α(IFNα)以及核苷類似物拉米夫定等抗HBV病毒藥物應(yīng)用,在一定程度上控制了HBV感染的進(jìn)一步流行,同時,也改變了HBV感染的分布規(guī)律和游行模式,有研究表明,目前流行的HBV病毒株特點(diǎn)與此之前的病毒種群相比較,已經(jīng)發(fā)生了根本的改變,并將繼續(xù)發(fā)生變化。因此,從現(xiàn)在開始就必須對HBV病毒變異給予高度重視。

從前文可以看出,傳統(tǒng)的投入導(dǎo)向規(guī)模報酬不變DEA模型雖然可以對決策單元的效率進(jìn)行測算,但是并不能對所有單元按照效率值大小進(jìn)行測算,原因就是在效率測算結(jié)果中出現(xiàn)了20個DEA有效的決策單元,這些決策單元的效率值均為1,雖然其他的9個決策單元可以按效率值的大小進(jìn)行排序,但是對于這20個效率值為1的決策單元不能進(jìn)行效率排序。而政府通常是根據(jù)機(jī)構(gòu)排名對其進(jìn)行補(bǔ)貼或獎勵,養(yǎng)老機(jī)構(gòu)的管理者也更加關(guān)注其他養(yǎng)老機(jī)構(gòu)的排名問題,而且通過排序,管理者可以借鑒排名靠前的機(jī)構(gòu)來改善其服務(wù)績效。因此,需要進(jìn)一步對投入產(chǎn)出指標(biāo)進(jìn)行超效率CCR模型測算,以便獲取排名,進(jìn)一步確認(rèn)標(biāo)桿企業(yè)。

蘭州石化始終堅持“環(huán)保優(yōu)先、安全第一、質(zhì)量至上、以人為本”的理念,強(qiáng)化HSE體系建設(shè),常年堅持開展公司、分廠和車間三級崗位責(zé)任制大檢查,建立了四級風(fēng)險“管控網(wǎng)”,形成了專業(yè)監(jiān)督、專職檢查、干部走動式巡檢、值班檢查“四位一體”的監(jiān)督檢查體系,做到了現(xiàn)場作業(yè)風(fēng)險識別管控全過程、全覆蓋。蘭州石化嚴(yán)格執(zhí)行環(huán)保新標(biāo)準(zhǔn),推進(jìn)清潔生產(chǎn)、綠色發(fā)展。5年來,公司重點(diǎn)環(huán)保項目建設(shè)投入達(dá)到20多億元,減排成效顯著。

由于 PreS1-Ag與 HbeAb、HBV-DNA均有良好的相關(guān)性,能反映HBV在體內(nèi)的復(fù)制和傳染狀況。所以對PreS1-Ag的檢測有助于對疾病的動態(tài)觀測,特別是PreS1-Ag處在灰區(qū)的結(jié)果,應(yīng)進(jìn)一步作HBV-DNA載量分析,以免漏診延誤治療。

[1]張瑩.酶聯(lián)免疫吸附測定法在醫(yī)學(xué)研究中的新進(jìn)展[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2000,35(4):306-308.

[2]趙祥勝,劉瑜.梁寶鐸,等.檢測乙肝標(biāo)志物非特異性交叉反應(yīng)原因分析[J].華中醫(yī)學(xué)雜志,2000,24(2):110-111.

[3]許斌,朱虎定.ELISA檢測HBsAg影響因素探討[J].臨床檢驗雜志,2000,18(4):232.

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