肖 蒙，孟昭旭，彭 悅，杜 鵬，霍貴成

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江哈爾濱150000)

益生菌(probiotics)是達(dá)到一定的數(shù)量并對(duì)人體有益的微生物的總稱。乳酸菌是益生菌中的重要組成部分，其中主要包括乳桿菌、雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、不具有致病性的大腸桿菌、腸球菌、芽孢桿菌、酵母等。關(guān)于乳酸菌的發(fā)現(xiàn)最早可以追溯到20世紀(jì)初，俄國(guó)生物學(xué)家，諾貝爾獎(jiǎng)的獲得者M(jìn)echnikoff在他的“長(zhǎng)壽學(xué)說(shuō)”中指出保加利亞地區(qū)的人之所以長(zhǎng)壽，原因是他們食用的酸奶中富含一種對(duì)人體腸道有益的乳酸菌［1］。隨著科學(xué)研究的深入，人們對(duì)乳酸菌的研究已經(jīng)不僅局限在食品領(lǐng)域，而是逐漸把研究熱點(diǎn)轉(zhuǎn)向利用乳酸菌治療一些人體常見(jiàn)疾病，如胃腸道疾病、陰道炎、胰腺炎、乳房炎、腹瀉、口腔疾病、濕疹、便秘、皮膚炎等。通過(guò)文獻(xiàn)報(bào)道，乳酸菌治療疾病的機(jī)理主要如圖1［2］所示。由于考慮到不同疾病的發(fā)病機(jī)理、乳酸菌對(duì)不同疾病治療機(jī)理、治愈狀況等存在差異性，所以本文主要針對(duì)口腔疾病進(jìn)行探討?？谇恢写蠹s含有700種微生物，由30～100個(gè)種組成，它們寄生在口腔黏膜、牙齒、舌頭上以及唾液中，這些微生物共同保衛(wèi)人體的口腔健康。當(dāng)內(nèi)在或外在因素變化造成口腔中的微生態(tài)系統(tǒng)失去平衡時(shí)，就易引起常見(jiàn)的口腔疾病，如齲齒、牙周炎、牙齦炎和口臭等。Kragen H［3］是最早對(duì)乳酸菌治療口腔疾病進(jìn)行研究的學(xué)者，他開(kāi)啟了此領(lǐng)域的先河。

圖1 乳酸菌治療疾病的機(jī)理Fig.1 The mechanism of lactic acid bacteria cure diseases

1 齲齒

1.1 造成齲齒的微生物種類

齲齒是一種發(fā)病率極高的口腔疾病，主要由產(chǎn)酸，以及耐酸能力強(qiáng)的變形鏈球菌(Streptococcus mutans)和乳桿菌引起［4］。大量研究表明，變形鏈球菌是造成齲齒的主要原因［5］。同時(shí)，也有學(xué)者指出少部分唾液鏈球菌(Streptococcus salivarius)同樣能增加患齲齒的風(fēng)險(xiǎn)［6－7］。Becker［8］通過(guò)分子生物學(xué)方法對(duì)齲齒患者口腔菌群進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者口腔中戈氏放線菌(Actinomyces gerencseriae)，雙歧桿菌(Bifidobacterium)，韋永氏球菌(Veilonclla)，唾液鏈球菌(Streptococcus salivarius)，變形鏈球菌(Streptococcus mutans)，星座鏈球菌(Streptococcus constellatus)，血鏈球菌 (Streptococcussanguis)，發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)含量明顯比健康人高。由于大多數(shù)益生菌能通過(guò)發(fā)酵乳糖產(chǎn)生乳酸，而乳酸又能促進(jìn)齲齒的發(fā)生，所以也有少量文獻(xiàn)提出，用益生菌來(lái)治療齲齒有一定的弊端，如 Fitzgerald RJ［9］明確指出，在初期致齲過(guò)程中乳酸桿菌并不致齲，齲壞進(jìn)入深層時(shí)，乳酸桿菌由于其較強(qiáng)的耐酸性而大量繁殖并產(chǎn)酸，協(xié)同變形鏈球菌致齲?？梢?jiàn)，造成人齲齒的口腔微生態(tài)系統(tǒng)和機(jī)理較復(fù)雜，菌種多樣性及各菌之間的相互聯(lián)系仍需要進(jìn)一步研究。

1.2 治療齲齒益生菌的篩選與改良

雖然益生菌的來(lái)源非常廣泛，但學(xué)者們還是經(jīng)常從人體自身篩選出益生菌，用于治療相應(yīng)的疾病，因?yàn)?，從其?yīng)用的器官中篩選的益生菌才能長(zhǎng)期定植在所需部位而達(dá)到良好的治療效果［10］。如Simark－Mattsson C從健康人的口腔中篩選出23株能抑制變形鏈球菌生長(zhǎng)的乳桿菌，并指出其中干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)、植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)的抑菌效果最好［11］。這表明了從人的口腔中篩選出的益生菌的確具有治療齲齒的潛在價(jià)值。

同時(shí)，經(jīng)過(guò)基因工程改良的菌株在工程上應(yīng)用成功的案例很多，但將工程菌用于人體疾病治療領(lǐng)域的成功案例很少。經(jīng)過(guò)基因手段改良的變形鏈球菌A2JM雖然在營(yíng)養(yǎng)成分要素需求上要求較高，但它不僅不具備了致齲性，而且還能顯著降低齲齒發(fā)病率［12］。這為之后通過(guò)基因工程改良益生菌的生物性狀，為其將來(lái)應(yīng)用于各種疾病治療上指明了方向。

1.3 不同的食用方式和益生菌對(duì)治療齲齒的影響

眾所周知，酸奶、干酪是人體攝入乳酸菌的重要途徑，所以很多研究者讓實(shí)驗(yàn)對(duì)象食用含有特定乳酸菌的酸奶、干酪，從而研究不同的乳酸菌對(duì)治療齲齒的影響。Nase L等［13］對(duì)594個(gè)1～6歲的孩子進(jìn)行人體實(shí)驗(yàn)，讓實(shí)驗(yàn)對(duì)象食用了含有鼠李糖乳桿菌(LGG)發(fā)酵的酸奶，7個(gè)月后齲齒發(fā)病率明顯比不食用的孩子低，而且變形鏈球菌的數(shù)量也更少。Ahola AJ［14］也對(duì)LGG進(jìn)行了相關(guān)人體實(shí)驗(yàn)研究，與前者的不同之處是把酸奶換成了干酪，結(jié)果發(fā)現(xiàn)食用了含LGG的干酪后不僅能降低口腔中的變形鏈球菌數(shù)目，還能降低口腔中的酵母數(shù)目。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)不足之處在于沒(méi)有對(duì)小孩做喂養(yǎng)普通酸奶(或普通干酪)的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，所以不能完全確定是酸奶(或干酪)還是LGG造成的治療效果。但其它很多研究也已經(jīng)表明，LGG的確具有明顯的抗齲齒和其它保健功能，而且它已經(jīng)成功應(yīng)用于國(guó)際市場(chǎng)，表現(xiàn)出了益生菌行業(yè)廣闊的市場(chǎng)前景。

另外，Caglar E［15］讓 24 個(gè)人食用含乳雙歧桿菌(Bifidobacterium lactis)Bb－12的冰淇淋40天之后，檢測(cè)其口腔菌群的變化。雖然唾液中的乳桿菌數(shù)量變化很小，但變形鏈球菌數(shù)目明顯減少。Nikawa H，Petti S和Comelli EM通過(guò)各自的抑菌實(shí)驗(yàn)也都表明羅伊氏乳桿菌(Lactobacillus reuteri)，普通酸奶等都能抑制諸多致齲病菌的生長(zhǎng)［16－18］。由此可見(jiàn)，乳雙歧桿菌Bb－12和羅伊氏乳桿菌等乳酸菌都具有應(yīng)用于市場(chǎng)抗齲產(chǎn)品的潛在價(jià)值，但它們?cè)谌梭w實(shí)驗(yàn)以及定植能力上還要進(jìn)行深入研究。

1.4 益生菌治療齲齒機(jī)理

1.4.1 益生菌的粘附作用 粘附能力的大小是益生菌益生功能強(qiáng)弱的重要指標(biāo)之一，因?yàn)橹挥休^強(qiáng)粘附能力的乳酸菌才能長(zhǎng)時(shí)間定植在口腔中發(fā)揮益生功能，才能降低齲齒復(fù)發(fā)率。計(jì)算乳酸菌對(duì)細(xì)胞的粘附數(shù)量是測(cè)定乳酸菌的粘附能力的常用手段，但由于考慮到口腔環(huán)境的特殊性，所以研究者發(fā)明了一種專門篩選治療齲齒的益生菌的實(shí)驗(yàn)方法，即向液體培養(yǎng)基中插入一條玻璃管，用此玻璃棒模擬牙齒，將乳酸菌培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)定玻璃管上粘附的細(xì)菌數(shù)，從而檢測(cè)各乳酸菌的粘附能力［19］。這為之后測(cè)定治療齲齒的益生菌的粘附能力奠定了基礎(chǔ)。

更深層次對(duì)粘附機(jī)制的研究也是目前學(xué)者們研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。關(guān)于乳酸菌粘附機(jī)制的爭(zhēng)論主要集中在菌體產(chǎn)生的胞外多糖和菌體的疏水性質(zhì)這兩個(gè)方面。Kralj S［20］指出細(xì)菌胞外多糖是細(xì)菌對(duì)口腔進(jìn)行粘附的關(guān)鍵因素，其中的葡聚糖就是胞外多糖中增加菌體粘附能力的典型代表。但也有研究者對(duì)此持反對(duì)意見(jiàn)，并指出乳桿菌胞外多糖在口腔粘附作用中的作用很?。?1－23］，如 Rosenberg M 等［24］研究者則通過(guò)對(duì)牙菌斑篩選的微生物進(jìn)行有機(jī)溶劑濁度分析之后，指出細(xì)菌表面的疏水性才是口腔粘附的重要機(jī)制，牙菌斑是牙齒表面逐漸沉積的生物薄膜，由食物殘?jiān)⒚撀涞目谇簧掀そM織細(xì)胞、唾液和細(xì)菌組成，它是造成口腔疾病的重要原因之一。其實(shí)對(duì)乳酸菌粘附機(jī)制的研究不僅僅局限在以上兩個(gè)方面，更加復(fù)雜的機(jī)制也逐漸被人們所揭示，如研究者發(fā)現(xiàn)有一株乳酸菌能改變唾膜蛋白的組成，它能通過(guò)除去重要的吸附蛋白和唾液中的細(xì)胞凝集素gp340(它與變形鏈球菌的吸附作用有重要關(guān)系)，從而影響了變形鏈球菌在口腔的定植能力［25］，而達(dá)到治療口腔疾病的目的?？梢?jiàn)，關(guān)于乳酸菌粘附機(jī)制以及乳酸菌間接影響相關(guān)致病菌的定植能力的研究還需要進(jìn)一步深入。

1.4.2 益生菌產(chǎn)生的H2O2和細(xì)菌素 眾所周知，乳酸菌通過(guò)產(chǎn)生H2O2和細(xì)菌素抑制致病菌的生長(zhǎng)，是乳酸菌發(fā)揮益生功能的重要基礎(chǔ)，所以H2O2和細(xì)菌素對(duì)致齲病菌的抑制作用是學(xué)者們必須研究的內(nèi)容。血鏈球菌(Streptococcus sanguinis)是口腔中的正常菌群，它能通過(guò)產(chǎn)生H2O2和血鏈素抑制口腔有害菌的生長(zhǎng)，如能與變形鏈球菌發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)現(xiàn)象［8］。Kreth J［26］在2005年指出血鏈球菌對(duì)變形鏈球菌產(chǎn)生的乳酸和細(xì)菌素很敏感，但同時(shí)血紅鏈球菌能夠通過(guò)產(chǎn)生H2O2抑制變形鏈球菌的生長(zhǎng)，他之后又在2008年通過(guò)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在氧氣的存在下，血鏈球菌的量增多，這同時(shí)又刺激了變形鏈球菌對(duì)抑制鏈球菌的變鏈素IV的產(chǎn)量增多［27］。不僅口腔中的血鏈球菌能進(jìn)行齲齒預(yù)防，取自于健康人體牙菌斑的寡發(fā)酵鏈球菌(Streptococcus oligofermentans)同樣也能抑制口腔有害微生物生長(zhǎng)，其中一個(gè)重要機(jī)理就是它能利用變形鏈球菌產(chǎn)生的乳酸而增加H2O2的產(chǎn)量［28］。

KrügerC［29］將 一 株 重 組 的 玉 米 乳 桿 菌(Lactobacillus zeae)接種在患有齲齒的小鼠口腔中之后，發(fā)現(xiàn)它能刺激機(jī)體對(duì)變形鏈球菌分泌scFv抗體，從而降低變形鏈球菌數(shù)目。scFv抗體是醫(yī)學(xué)工作者研究的比較熱門的一種免疫物質(zhì)，它對(duì)靶細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺滅作用，但同時(shí)對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)影響很小，可見(jiàn)，乳酸菌能間接刺激機(jī)體產(chǎn)生的一些免疫物質(zhì)，從而阻止致齲菌的生長(zhǎng)［30］。

2 牙齦炎和牙周炎

2.1 造成牙齦炎和牙周炎的微生物

牙齦炎主要是由細(xì)菌的入侵造成的，其中變形鏈球菌是主要因素［48］，造成牙周炎的微生物則主要為牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)，放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)，福賽斯坦納菌(Tannerellaforsythensis)和齒垢密螺旋體(Treponema denticola)［31－32］。同時(shí)由于牙齦與牙齒的結(jié)構(gòu)存在差異性，所以二者在癥狀上有較大區(qū)別，牙齦炎主要表現(xiàn)為牙齦出血，紅腫，脹痛，繼續(xù)發(fā)展侵犯硬組織，產(chǎn)生牙周炎癥?？梢?jiàn)牙齦炎是牙周炎的初級(jí)階段，所以可以把牙齦炎和牙周炎結(jié)合在一起闡述。

2.2 不同的食用方式對(duì)治療牙齦炎和牙周炎的影響

關(guān)于乳酸菌對(duì)牙齦炎和牙周炎疾病的研究較少，2006 年，Krasse P［33］讓牙齦炎患者食用含羅伊氏乳桿菌的口香糖14d后，口腔中的羅伊氏乳桿菌的數(shù)量顯著增高，牙菌斑中有害微生物明顯減少，牙齦炎病癥明顯降低，而且指出不同的羅伊氏乳桿菌對(duì)唾液的粘附能力有一定的差異性。Twetman S［34］在2009年進(jìn)行了和Krasse P同樣的實(shí)驗(yàn)，得到了同樣的結(jié)論，但他則更加深入的從細(xì)胞因子水平進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn):實(shí)驗(yàn)對(duì)象口腔上皮細(xì)胞的腫瘤壞死因子(TNF－α)和白細(xì)胞介素－8(IL－8)也明顯減少，但是當(dāng)康復(fù)的患者不食用此口香糖2周后，牙齦炎便復(fù)發(fā)了。這與Horz HP［35］對(duì)患者喂養(yǎng)唾液鏈球菌藥片的實(shí)驗(yàn)結(jié)果類似，都是取消治療一段時(shí)間后，患者不同程度地出現(xiàn)了復(fù)發(fā)現(xiàn)象。在益生菌對(duì)很多疾病的治療中，復(fù)發(fā)現(xiàn)象的確是一個(gè)比較常見(jiàn)的問(wèn)題，這可能主要是因?yàn)橐嫔ㄖ材芰ι喜粡?qiáng)，以及殺菌能力與抗生素相比還有一定的差距性有關(guān)。在治療牙周炎方面，研究發(fā)現(xiàn)，患者食用含唾液乳桿菌WB21的片劑能顯著降低牙周袋深度，特別是對(duì)吸煙者效果更顯著，同時(shí)也能降低牙周炎菌斑的數(shù)目［36－37］。

在治療口腔疾病中，不僅乳酸菌菌種的選擇很重要，不同類型的治療方法也同樣重要，因?yàn)橹挥惺褂煤?jiǎn)單而實(shí)用的治療方法才能更好地預(yù)防和治療口腔疾病。如漱口水就是一種較好的選擇，讓患者食用含有三種不同口腔鏈球菌的漱口水和含Nisin的漱口水后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩種漱口水分別能顯著降低引起牙周炎、牙齲齒的細(xì)菌數(shù)量和牙菌斑數(shù)［38－39］，從而達(dá)到治療或緩解牙周炎的目的。

2.3 益生菌治療牙齦炎和牙周炎機(jī)理

關(guān)于乳酸菌在調(diào)節(jié)人體免疫方面，有學(xué)者進(jìn)行過(guò)相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，口腔中細(xì)胞炎癥因子(如金屬蛋白酶、一氧化氮合成酶、前列腺素E2、干擾素－γ)與牙齦炎癥狀(如齦溝液增多)呈正相關(guān)關(guān)系，但當(dāng)患者食用含乳酸菌的食物后，體內(nèi)細(xì)胞炎癥因子水平顯著降低［40］，因此我們可以利用乳酸菌能降低促炎癥因子的產(chǎn)生的原理［41］，利用乳酸菌治療牙齦炎和牙周炎。

在益生菌的代謝產(chǎn)物抑制牙齦炎方面，Pangsomboon K［42］發(fā)現(xiàn)一株干酪乳桿菌產(chǎn)生的一種細(xì)菌素能夠顯著抑制牙齦卟啉單胞菌引起的牙齦炎。也有學(xué)者同樣發(fā)現(xiàn)兩株不同的緩癥鏈球菌(Streptococcus mitis)都能通過(guò)分泌一種表面活性劑，從而減少造成牙周炎的變形鏈球菌等致病菌粘附能力［43］，達(dá)到最終治療目的。

3 益生菌對(duì)其他口腔疾病的治療

有學(xué)者指出某些類型的口臭可能是由一些唾液鏈球菌通過(guò)刺激牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)產(chǎn)生粘蛋白類物質(zhì)而引起的［44］。但是并不是所有唾液鏈球菌都是導(dǎo)致口臭的罪魁禍?zhǔn)祝承┩僖烘溓蚓瑯幽芤种圃斐煽诔舻奈⑸锏纳L(zhǎng)［45］。如 Tagg JR［30］和 Kroes I［46］就發(fā)現(xiàn)一株唾液鏈球菌K12能有效地防止喉嚨感染和口臭。Cosseau C［47］則將唾液鏈球菌K12對(duì)人體免疫系統(tǒng)的影響進(jìn)行了更加深入的研究，結(jié)果表明:唾液鏈球菌K12能降低IL－8的分泌水平，調(diào)控抗菌肽LL－37的表達(dá)和細(xì)胞內(nèi)的代謝平衡，從而達(dá)到抑制口臭的功效。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)食竇魏斯氏菌(Weissella cibaria)能減少由具核梭桿菌(Fusobacterium nucleatum)產(chǎn)生的硫化氫氣體造成的口臭癥狀，且效果顯著，原因可能是由于食竇魏斯氏菌產(chǎn)生了H2O2以及與具核梭桿菌競(jìng)爭(zhēng)吸附位點(diǎn)［48］，可見(jiàn)不同的益生菌對(duì)不同類型的口臭治療機(jī)制可能不同，不同的學(xué)者從不同的角度研究，得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4 結(jié)論

目前，關(guān)于乳酸菌對(duì)口腔疾病的研究尚處于初級(jí)階段，篩選或改良出對(duì)口腔疾病治療效果較好的菌株是所面臨的重大問(wèn)題，因?yàn)檫@樣的菌株必須滿足以下條件才能達(dá)到更好的治療效果:能長(zhǎng)時(shí)間定植在比較難吸附的口腔上皮細(xì)胞、唾液和牙齒上，有利于防止口腔疾病復(fù)發(fā);菌株產(chǎn)酸能力較差，產(chǎn)細(xì)菌素、H2O2能力較強(qiáng)，因?yàn)楫a(chǎn)酸能力強(qiáng)的菌易造成齲齒，所以要求益生菌菌株主要通過(guò)產(chǎn)細(xì)菌素和H2O2達(dá)到最終的抑菌目的;最好從口腔直接篩選出所需的乳酸菌，因?yàn)檫@樣的乳酸菌更能適應(yīng)口腔環(huán)境，能減緩或防止疾病復(fù)發(fā);能相當(dāng)于疫苗一樣，引起口腔組織產(chǎn)生免疫物質(zhì)，從而殺滅致病菌的益生菌菌株以及調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的益生菌都是研究的新興熱點(diǎn)領(lǐng)域，這些機(jī)理必將為科研工作者篩選出性狀較好的益生菌，預(yù)防或治療口腔疾病提供了一個(gè)新的方向。

［1］Metchnikoff E，Schlesinger EB.The prolongation of life:optimistic studies［M］.New York:Putnam，1908.

［2］Haukioja A.Probiotics and Oral Health［J］.Eur J Dent，2010，4:348－355.

［3］Kragen H.The treatment of inflammatory affections of the oral mucosa with a lactic acid bacterial culture preparation［J］.Zahnarztl Welt，1954，9:306－308.

［4］Aas JA，Paster BJ，Stokes LN，et al.Defining the normal bacterial flora of the oral cavity［J］.J Clin Microbiol，2005，43:5721－5732.

［5］Loesche WJ.Role of Streptococcus mutans in human dental decay［J］.Microbiol Rev，1986，50:353－380.

［6］Matsumoto M，Tsuji M，Sasaki H，et al.Cariogenicity of the probiotic bacterium Latobacillus salivarius in rats［J］.Caries Res，2005，39:479－483.

［7］Lien CP，Rob JM，Wilfred FM，et al.Effects of probiotic Lactobacillus salivarius W24 on the compositional stability of oral microbial communities［J］.Archives of Oral Biology，2009，54:132－137.

［8］Becker MR，Paster BJ，Leys EJ，et al.Molecular analysis of bacterial species associated with childhood caries［J］.J Clin Microbiol，2002，40:1001－1009.

［9］Fitzgerald RJ，Adams BO，Davis ME.A microbiologicdy of recurrent dentinal caries［J］.Caries Res，1994，28:409－415.

［10］David C，Johan R，F(xiàn)reek B，et al.Proteomic analysis of log to stationary growth phase Lactobacillus plantarum cells and a 2－DE database［J］.Proteomics，2006，6:6485－6493.

［11］Simark－Mattsson C，Emilson CG，Hakansson EG，et al.Lactobacillus mediated interference of mutans streptococci in caries－free vs.caries－ active subjects［J］.Eur J Oral Sci，2007，115:308－314.

［12］Hillman JD，Mo J，McDonell E，et al.Modification of an effect strain for replacement therapy of dental caries to enable clinical safety trials［J］.J Appl Microbiol，2007，102:1209－1219.

［13］Nase L，Hatakka K，Savilahti E，et al.Effect of long－term consumption of a probiotic bacterium，Lactobacillus rhamnosus GG，in milk on dental caries and caries risk in children［J］.Caries Res，2001，35:412－420.

［14］Ahola AJ，Yli－Knuuttila H，Suomalainen T，et al.Short－term consumption of probiotic－containing cheese and its effect on dental caries risk factors［J］.Arch Oral Biol，2002，47:799－804.

［15］Caglar E，Kuscu OO，Selvi Kuvvetli S，et al.Short－ term effect of ice－cream containing Bifidobacterium lactis Bb－12 on the number of salivary mutans streptococci and lactobacilli［J］.Acta Odontol Scand，2008，66:154－158.

［16］Nikawa H，Makihira S，F(xiàn)ukushima H，et al.Lactobacillus reuteri in bovine milk fermented decreases the oral carriage of mutans streptococci［J］.Int J Food Microbiol，2004，95:219－223.

［17］Petti S，Tarsitani G，Simmonetti DA.Antibacterial activity of yoghurt against viridans streptococci in vitro［J］.Arch Oral Biol，2008，53:985－990.

［18］Comelli EM，Guggenheim B，Stingele F，et al.Selection of dairy bacterial strains as probiotics for oral health［J］.Eur J Oral Sci，2002，110:218－224.

［19］Samot J，Lebreton J，Badet C.Adherence capacities of oral lactobacilli for potential probiotic purposes［J］.Anaerobe，2011，17:69－72.

［20］Kralj S，Geel－ Schutten GH，Rahaoui H，et al.Molecular characterization of a novel glucosyltransferase from Lactobacillus reuteri strain 121 synthesizing a unique，highly branched glucan with α－(1→4)and α－(1→6)glucosidic bonds［J］.Appl Environ Microbiol，2002，68:4283－4291.

［21］Vuyst DL，Degeest B.Heteropolysaccharides from lactic acid bacteria［J］.FEMS Microbiol Rev，1999，23:153－177.

［22］Harding LP，Marshall VM，Hernandez Y，et al.Structural characterisation of a highly branched exopolysaccharide produced by Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus NCFB2074［J］.Carbohydr Res 2005，340:1107－1111.

［23］Lipinski T，Jones C，Lemercinier X，et al.Structural analysis of the Lactobacillus rhamnosus strain KL37C exopolysaccharide［J］.Carbohydr Res，2003，338:605－609.

［24］Rosenberg M，Judes H，Weiss E.Cell surface hydrophobicity of dental plaque microorganisms in situ［J］.Infect Immun，1983，42:831－834.

［25］Haukioja A，Loimaranta V，Tenovuo J.Probiotic bacteria affect the composition of salivary pellicle and Streptococcal adhesion in vitro［J］.Oral Microbiology and Immunology，2008，23:336－343.

［26］Kreth J，Merritt J，Shi W，et al.Competition and coexistence between Streptococcus mutans and Streptococcus sanguinis in the dental biofilm［J］.J Bacteriol，2005，187:7193－7203.

［27］Kreth J，Zhang Y，Herzberg MC.Streptococcal antagonism in oral biofilms:Streptococcus sanguinis and Streptococcus gordonii interference with Streptococcus mutans［J］.J Bacteriol，2008，190:4632－4640.

［28］Tong H，Chen W，MerrittJ，etal.Streptococcus oligofermentans inhibits Streptococcus mutans through conversion of lactic acid into inhibitory H2O2:a possible counteroffensive strategy for interspecies competition［J］.Mol.Microbiol，2007，63:872－880.

［29］Krüger C，Hu YZ，Pan Q，et al.in situ delivery of passive immunity by lactobacilli producing single－ chain antibodies［J］.Nature Biotech，2002，20:702－706.

［30］Tagg JR，Dierksen KP.Bacterial replacement therapy:adapting‘germ warfare’to infection prevention［J］.Trends Biotechnol，2003，21:217－223.

［31］Pihlstrom BL，Michalowicz BS，Johnson NW.Periodontal diseases［J］.Lancet，2005，66:1809－1820.

［32］Oringer RJ.Modulation of the host response in periodontal therapy［J］.J Periodontol，2002，73:460－470.

［33］Krasse P，Carlsson B，Dahl C，et al.Decreased gum bleeding and reduced gingivitis by the probiotic Lactobacillus reuteri［J］.Swedish Dental journal，2006，30:55－60.

［34］Twetman S，Derawi B，Keller M，et al.Short－term effect of chewing gums containing probiotic Lactobacillus reuteri on the levels of inflammatory mediators in gingival crevicular fluid［J］.Acta Odontologica Scandinavica，2009，67:19－24.

［35］Horz HP，Meinelt A，Houben B，et al.Distribution and persistence of probiotic Streptococcus salivarius K12 in the human oral cavity as determined by real－time quantitative polymerase chain reaction［J］.Oral Microbiol Immunol，2007，22:126－130.

［36］Shimauchi H，Mayanagi G，Nakaya S，et al.Improvement of periodontal condition by probiotics with Lactobacillus salivarius WB21:a randomized，double－ blind，placebo－ controlled study［J］.J Clin Periodontol，2008，35:897－905.

［37］Mayanagi G，Kimura M，Nakaya S，et al.Probiotic effects of orally administered Lactobacillus salivarius WB21－containing tablets on periodontopathic bacteria:a double－blinded，placebocontrolled，randomized clinical trial［J］.J Clin Periodontol，2009，36:506－513.

［38］Zahradnik RT，Magnusson I，Walker C，et al.Preliminary assessment of safety and effectiveness in humans of ProBiora3，a probiotic mouth－wash［J］.J Appl Microbiol，2009，107:682－690.

［39］Noordin K，Kamin S.The effect of probiotic mouthrinse on plaque and gingival inflammation［J］.Annal Dent Univ Malaya，2007，14:19－25.

［40］Staab B，Eick S，Kn?fler G，et al.The influence of a probiotic milk drink on the development of gingivitis:a pilot study［J］.J Clin Periodontol，2009，36:850－856.

［41］Lammers KM，Vergopoulos A，Babel N，et al.Probiotic therapy in the prevention of pouchitis onset:decreased interleukin－1β，interleukin－8，and interferon－ γ gene expression［J］.Inflamm Bowel Dis，2005，11:447－454.

［42］Pangsomboon K，Kaewnopparat S，Pitakpornpreecha T，et al.Antibacterial activity of a bacteriocin from Lactobacillus paracasei HL32 against Porphyromonas gingivalis［J］.Arch Oral Biol，2006，51:784－793.

［43］Hoogmoed CG，Der KM，Der Mei HC，et al.Inhibition of Streptococcus mutans NS adhesion to glass with and without a salivary conditioning film by biosurfactant－releasing Streptococcus mitis strains［J］.Appl Environ Microbiol，2000，66:659－663.

［44］Sterer N，Rosenberg M.Streptococcus salivarius promotes mucin putrefaction and malodor production by Porphyromonas gingivalis［J］.J Dent Res，2006，85:910－914.

［45］Burton JP，Chilcott CN，Tagg JR.The rationale and potential for the reduction of oral malodour using Streptococcus salivarius probiotics［J］.Oral Dis，2005，11:29－31.

［46］Kroes I，Lepp PW，Relman DA.Bacterial diversity within the human subgingival crevice［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1999，96:14547－14552.

［47］Cosseau C，Devine DA，Dullaghan E，et al.The commensal Streptococcus salivarius down－regulates immune responses of human epithelial cells and promotes host－microbe homeostasis［J］.Infect Immun，2008，76:4163－4175.

［48］Kang MS，Kim BG，Chung J，et al.Inhibitory effect of Weissella cibaria isolates on the production of volatile sulphur compounds［J］.J Clin Periodontol，2006，33:226－232.