張穎捷 杜萬紅 黃春桃 施玲 姜德建 劉小陽 邢紅專

安化黑茶是湖南特有的茶葉品種，我們前期研究表明，安化黑茶具有調(diào)脂、降糖、調(diào)節(jié)免疫等功效［1-4］。目前已有關(guān)于多種茶，包括肉蓯蓉茶、靈芝茶、人參花茶、紅茶、綠茶及普洱茶等及其提取物的抗疲勞研究報(bào)道，但國(guó)內(nèi)未見黑茶提取物抗疲勞作用報(bào)道。本研究在前期基礎(chǔ)上，通過建立小鼠運(yùn)動(dòng)疲勞模型評(píng)價(jià)安化黑茶的系列產(chǎn)品(百兩茶)提取物的抗疲勞作用，并初步探討其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 百兩茶提取物由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)天然產(chǎn)物研究中心及湖南省茶業(yè)股份有限公司白沙溪茶廠提供。將百兩茶原料處理成碎狀，按每克茶葉加12 ml沸水進(jìn)行提取，沸水浴1 h，精密過濾，冷卻，經(jīng)低溫真空濃縮后冷卻干燥，得百兩茶提取物的粉末。高效液相色譜法檢測(cè)其中兒茶素含量19.70%;紫外分光光度法檢測(cè)其茶多酚及咖啡因含量分別為48.28%與6.73%。每次實(shí)驗(yàn)取百兩茶提取物1 g，用雙蒸水溶解，濃度20 mg/ml;再分別取上述配置溶液15、7.5 ml配置濃度相應(yīng)為10、5 mg/ml。每次實(shí)驗(yàn)溶劑現(xiàn)配現(xiàn)用。紅景天軟膠囊(廣東長(zhǎng)興科技保健有限公司，批號(hào):20110403)，每次實(shí)驗(yàn)取紅景天軟膠囊1 g(內(nèi)含紅景天苷5.8 mg)，用雙蒸水溶解，濃度0.18 mg/ml。溶劑現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件 雄性ICR(Institute of Cancer Research，ICR)小鼠50 只，體質(zhì)量25 ～30 g，平均(27.45±2.26)g。由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(湘)2011-0003。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào):SCXK(湘)2010-0008。

1.3 器材與試劑 自動(dòng)分析生化儀為日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社產(chǎn)品;乳酸(LA)、尿素氮(BUN)、乳酸脫氫酶(LDH)、肝糖原(LG)及肌糖原(MG)試劑盒為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

1.4 實(shí)驗(yàn)分組 雄性ICR小鼠50只，自由飲水，全價(jià)顆粒飼料飼養(yǎng)3 d適應(yīng)環(huán)境，3 d后按小鼠體質(zhì)量采用隨機(jī)數(shù)字表法分組:空白對(duì)照組(雙蒸水)、陽性對(duì)照組(紅景天300 mg/kg)、百兩茶組，其中百兩茶組又分為低、中、高(100、200、400 mg/kg)劑量組，共5組。每組每日灌胃1次，正常對(duì)照組每日1次給予灌胃等體積的雙蒸水0.2 ml/10 g，陽性對(duì)照組每日1次給予灌胃紅景天提取物300 mg/kg，百兩茶組每日1 次給予灌胃低、中、高(100、200、400 mg/kg)3 種劑量百兩茶提取物。每次灌胃時(shí)間為同一時(shí)間，上午9:00。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法 分別在灌胃每周末測(cè)量體質(zhì)量，28 d給藥1 h后行轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)，之后連續(xù)給予灌胃5 d，第5天末次灌胃后行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)完成后通過摘取眼球采血檢測(cè)相關(guān)生化指標(biāo)。

1.5.1 轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)［5］:ICR雄性小鼠50只按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，分別為空白對(duì)照組，陽性對(duì)照組，百兩茶低劑量組、中劑量組、高劑量組。空白對(duì)照組每天給予雙蒸水0.2 ml/10 g，陽性對(duì)照組每天給予紅景天提取物300 mg/kg，百兩茶實(shí)驗(yàn)組予以百兩茶水提取物100、200、400 mg/kg，連續(xù)灌胃 28 d，末次灌胃 1 h 后把小鼠放置于電動(dòng)轉(zhuǎn)棒上(轉(zhuǎn)速為2檔，20 r/min)以15 s不落為準(zhǔn)，觀察各組小鼠的耐力時(shí)間(s)。實(shí)驗(yàn)完成后，將小鼠依次放入籠中正常飼養(yǎng)。

1.5.2 負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)［5］:經(jīng)轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)后繼續(xù)灌胃相應(yīng)受試物5 d后，在第5天末次灌胃30 min后，將尾根部負(fù)荷2% ～5%體質(zhì)量鉛絲的小鼠置于高30 cm，寬10 cm的恒溫游泳箱作為負(fù)重游泳的器皿，水深為20 cm，水溫25.0℃ ±0.5℃。記錄前，都使小鼠適應(yīng)環(huán)境2 min，然后開始記錄，終止標(biāo)準(zhǔn)為小鼠頭部浸入水中6～8 s不能游回水面，即小鼠負(fù)重游泳時(shí)間(s)。小鼠游泳后，迅速將其撈出水池，用吹風(fēng)筒吹干即刻采血。每次游泳結(jié)束后，更換新鮮干凈水。

1.5.3 生化指標(biāo)的測(cè)定:經(jīng)轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)及負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)完成后，撈出擦干，迅速經(jīng)摘取眼球采血，離心，制備血清，備用。將采血后的小鼠立即取肝臟和后腿部的肌肉，經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，保存，備用。嚴(yán)格按照試劑盒提供方法檢測(cè)血LA、血 BUN、血LDH及LG、MG指標(biāo)。

2 結(jié)果

2.1 百兩茶提取物對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響 4周后各組小鼠活潑，精神狀態(tài)好，皮毛光滑，未見任何不良反應(yīng)。高劑量組給藥第7、14天出現(xiàn)體質(zhì)量增長(zhǎng)量明顯低于其他各組;給藥第21天時(shí)，與空白對(duì)照組相比，其他各組小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)明顯減低;與陽性對(duì)照組相比，高劑量組體質(zhì)量明顯降低(P＜0.01);與低、中劑量組相比，高劑量茶組體質(zhì)量明顯降低(P＜0.01);低、中劑量組組間體質(zhì)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，與陽性對(duì)照組組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。百兩茶提取物對(duì)小鼠體重的影響的結(jié)果見表1。

表1 百兩茶提取物對(duì)各組小鼠體質(zhì)量的影響±s，g，n=10)

表1 百兩茶提取物對(duì)各組小鼠體質(zhì)量的影響±s，g，n=10)

注:與空白對(duì)照組比較，＊＊P＜0.01;與陽性對(duì)照組比較，△P＜0.05

組別 實(shí)驗(yàn)前 第7天 第14天 第21天空白對(duì)照組 27.56±0.87 30.64±1.12 32.40±1.14 37.32±1.72陽性對(duì)照組 27.39±1.36 31.36±1.71 32.57±1.47 33.84±1.61＊＊低劑量組 27.83±1.48 31.83±1.62 32.89±1.43 33.78±1.11＊＊中劑量組 27.03±1.63 30.49±1.95 31.96±1.36 33.25±1.02＊＊高劑量組 27.14±1.13 29.37±1.11＊＊ 31.02±1.07＊＊△ 32.56±1.04＊＊△

2.2 百兩茶提取物對(duì)小鼠轉(zhuǎn)棒時(shí)間的影響 轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)是反映小鼠耐力的一個(gè)方面，轉(zhuǎn)棒時(shí)間的長(zhǎng)短反映動(dòng)物抗阻力運(yùn)動(dòng)時(shí)的疲勞程度。如圖1所示，與空白對(duì)照組比較，百兩茶提取物中、高劑量組及陽性對(duì)照組小鼠可以明顯延長(zhǎng)小鼠的轉(zhuǎn)棒時(shí)間(P＜0.05);百兩茶低劑量組與空白對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與百兩茶低劑量組相比，百兩茶提取物中、高劑量組及陽性對(duì)照組小鼠可以明顯延長(zhǎng)小鼠的轉(zhuǎn)棒時(shí)間(P＜0.05);與陽性對(duì)照組相比，百兩茶高劑量組小鼠轉(zhuǎn)棒時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P＜0.01);百兩茶高劑量組小鼠轉(zhuǎn)棒時(shí)間較中劑量組顯著延長(zhǎng)(P＜0.05)。

圖1 百兩茶提取物對(duì)小鼠轉(zhuǎn)棒時(shí)間的影響

2.3 百兩茶提取物對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響 負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)是反映小鼠運(yùn)動(dòng)性疲勞程度的指標(biāo)。如表2所示，與空白對(duì)照組相比，給藥各組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.05);與陽性對(duì)照組相比，百兩茶高劑量組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P＜0.01);中劑量組無顯著變化(P＞0.05)。與百兩茶中劑量組相比，高劑量組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.05);百兩茶低、中劑量組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表2 百兩茶提取物對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響±s，s，n=10)

表2 百兩茶提取物對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響±s，s，n=10)

注:與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05;與陽性對(duì)照組比較，△△P＜0.01;與中劑量組比較，#P＜0.05

組別 負(fù)重游泳時(shí)間空白對(duì)照組443.64±24.05陽性對(duì)照組 737.23±26.62*低劑量組 541.68±22.31*中劑量組 646.19±36.43*高劑量組 907.41±28.48＊△△#

2.4 百兩茶提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后BUN、LDH及LA的影響 如表3所示，與空白對(duì)照組相比，給藥各組小鼠BUN及LA水平顯著降低(P＜0.01)。與陽性對(duì)照組相比，百兩茶高劑量組小鼠運(yùn)動(dòng)后LA水平降低(P＜0.05);與百兩茶低劑量組相比，百兩茶提取物中、高劑量組小鼠運(yùn)動(dòng)后LA水平降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與空白對(duì)照組相比，百兩茶提取物高劑量組LDH活力提高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);其他給藥各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表3 百兩茶提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后BUN、LDH及LA的影響±s，n=10)

表3 百兩茶提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后BUN、LDH及LA的影響±s，n=10)

注:與空白對(duì)照組比較，＊＊P＜0.01;與陽性對(duì)照組比較，△P＜0.05;與低劑量組比較，#P＜0.05

組別 BUN(mmol/L)LDH(KU/L)LA(U/L)10.34±1.61 3682±443 27.47±4.17陽性對(duì)照組 7.36±0.84＊＊ 3795±537 17.02±2.08＊＊低劑量組 8.38±1.71＊＊ 3862±674 21.66±1.27＊＊中劑量組 8.21±1.48＊＊ 3875±137 18.04±1.81＊＊#高劑量組 7.76±1.42＊＊ 4126±524* 13.19±1.23＊＊△#空白對(duì)照組

2.5 百兩茶提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后MG、LG的影響如表4所示，與空白對(duì)照組相比，給藥各組LG水平顯著增加(P＜0.01)。與陽性對(duì)照組相比，百兩茶高劑量組LG水平顯著增加(P＜0.01);中劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與百兩茶低劑量組相比，百兩茶提取物中、高劑量組及陽性對(duì)照組LG水平均顯著增加(P＜0.01)。

表4 百兩茶提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)LG、MG的影響(±s，mg/g，n=10)

表4 百兩茶提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)LG、MG的影響(±s，mg/g，n=10)

注:與空白對(duì)照組比較，＊＊P＜0.01;與陽性對(duì)照組比較，△△P＜0.01;與低劑量組比較，##P＜0.01

組別LG MG空白對(duì)照組3.62±0.696.37±0.61 3.02±1.46陽性對(duì)照組 9.32±1.82＊＊ 3.34±1.41低劑量組 7.73±0.66＊＊ 3.08±0.39中劑量組 9.54±0.83＊＊## 3.28±1.37高劑量組 12.11±1.95＊＊△△##

3 討論

疲勞是機(jī)體極其復(fù)雜的生理或病理變化過程，是指腦力或體力到達(dá)一定程度時(shí)必然出現(xiàn)的一種正常生理現(xiàn)象。它既標(biāo)志著機(jī)體原有工作能力的暫時(shí)下降，又可能是機(jī)體發(fā)展到疾病狀態(tài)的先兆。1982年第五屆國(guó)際運(yùn)動(dòng)生化會(huì)議統(tǒng)一了疲勞的概念:機(jī)體生理過程不能持續(xù)其功能在一特定水平或各器官不能維持預(yù)定的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度［6］。疲勞的表現(xiàn)主要是運(yùn)動(dòng)時(shí)體內(nèi)能量降低和肌肉力量下降，測(cè)定機(jī)體持續(xù)運(yùn)動(dòng)到力竭的時(shí)間可以反映機(jī)體耐力;而負(fù)荷運(yùn)動(dòng)引起機(jī)體的生化指標(biāo)變化可反映疲勞的程度。從中樞到外周，從整體、組織器官到細(xì)胞分子水平都是疲勞產(chǎn)生的部位，因此抗疲勞藥物研究應(yīng)從不同角度、不同層次進(jìn)行。

3.1 疲勞產(chǎn)生的機(jī)制及茶葉抗疲勞研究 延緩疲勞發(fā)生和促進(jìn)疲勞的恢復(fù)一直是運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)、保健醫(yī)學(xué)、康復(fù)醫(yī)學(xué)等學(xué)科的研究重點(diǎn)。目前抗疲勞研究主要集中在以下途徑:(1)增加能源物質(zhì)，改善能量代謝而抗疲勞;(2)提高內(nèi)分泌功能，提高激素水平;(3)清除代謝產(chǎn)物而抗疲勞;(4)提高耐缺氧能力，清除自由基而抗疲勞;(5)改善心腦代謝，保護(hù)心肌而抗疲勞。部分化學(xué)藥品和生物制品已經(jīng)被證實(shí)具有提高運(yùn)動(dòng)能力、延緩和消除疲勞的作用，但由于其無法避免的不良反應(yīng)及所含的興奮劑成分給機(jī)體造成了很大的危害，及其他因素的限制，各種抗疲勞措施在效果上均存在局限性。因此尋找更加安全、有效的抗疲勞物質(zhì)己經(jīng)成為該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

徐家玉等［7］研究了靈芝茶對(duì)小鼠的抗疲勞作用，其結(jié)果顯示靈芝茶對(duì)受試小鼠的爬桿時(shí)間均值明顯長(zhǎng)于對(duì)照組;實(shí)驗(yàn)組(3.3 g/kg)血清BUN含量均值明顯低于對(duì)照組。梁勇等［8］在對(duì)云南綠茶的抗疲勞作用研究結(jié)果表明與空白對(duì)照組相比，綠茶顯著延長(zhǎng)小鼠力竭游泳時(shí)間，降低運(yùn)動(dòng)后LA含量，LDH活性增加，MG和LG的儲(chǔ)備量增加顯著。張愛香等［9］觀察松果菊苷抗疲勞及抗氧化作用，能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。劉維佳等［10］報(bào)道人參花茶抗疲勞實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果顯示人參花茶能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，減少小鼠血清BUN產(chǎn)生，減少小鼠血LA含量，但對(duì)小鼠LG含量無明顯影響。

3.2 百兩茶提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)耐力的影響 運(yùn)動(dòng)能力下降是疲勞最直觀表現(xiàn)，包括運(yùn)動(dòng)時(shí)能量輸出最大功率降低和肌肉力量下降，測(cè)定機(jī)體持續(xù)運(yùn)動(dòng)到力竭的時(shí)間可以反映機(jī)體的耐力。而延長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)耐力及提高運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度則是抗疲勞作用最直觀表現(xiàn)。本研究通過轉(zhuǎn)棒和負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，反映小鼠抗阻力與耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)疲勞的程度，客觀反映小鼠的運(yùn)動(dòng)能力及百兩茶提取物抗疲勞作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，給小鼠灌胃100～400 mg/kg百兩茶提取物能顯著延長(zhǎng)小鼠轉(zhuǎn)棒及負(fù)重游泳時(shí)間，其中以高劑量組最為明顯，且優(yōu)于陽性對(duì)照組。茶葉中有效成分兒茶酸通過抑制腸道消化酶來減少腸道組織對(duì)碳水化合物、蛋白質(zhì)的吸收，加速其在糞便中的排泄，而達(dá)到減輕體質(zhì)量的目的。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)百兩茶提取物高劑量組在給藥后第7天表現(xiàn)出延緩體質(zhì)量增加的作用;給藥第21天各給藥組與空白對(duì)照組相比體質(zhì)量增長(zhǎng)量均減少。

3.3 百兩茶提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)性小鼠LA、BUN、LDH的作用 LA是糖酵解的最終產(chǎn)物。劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，血LA濃度增高，其在體內(nèi)堆積過多會(huì)直接或間接引起肌肉運(yùn)動(dòng)能力下降，這是運(yùn)動(dòng)性疲勞產(chǎn)生的重要因素之一。因此，LA被作為判斷疲勞程度、有氧代謝能力、控制運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度等的重要指標(biāo)［11］。BUN反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平及其承受運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的能力。大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)蛋白質(zhì)將作為能量，從而使血BUN生成增多，因此將血BUN作為判斷運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度大小及疲勞程度的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。BUN與機(jī)體對(duì)耐力運(yùn)動(dòng)適應(yīng)性成反比。LDH是糖代謝過程重要的一類氧化還原酶，運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下，骨骼肌在無氧酵解時(shí)產(chǎn)生丙酮酸，而丙酮酸在LDH催化下才能還原成LA，從而使糖酵解產(chǎn)生ATP途徑得以順利進(jìn)行。因此通常將LDH活性作為評(píng)價(jià)機(jī)體無氧代謝能力的指標(biāo)。當(dāng)機(jī)體在正常情況下，血漿LDH活性維持一種穩(wěn)定狀態(tài);機(jī)體在長(zhǎng)時(shí)間高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)，血LDH活性增高，繼而加速LA的分解，從而達(dá)到消除疲勞的作用［12］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，給小鼠灌胃100～400 mg/kg百兩茶提取物能顯著降低血LA及BUN水平，其中以高劑量組最為明顯。高劑量百兩茶提取物能顯著提高LDH活性。與陽性對(duì)照組相比，百兩茶提取物中、高劑量組降低BUN水平作用更明顯。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，百兩茶提取物通過降低LA生成、加快LA清除速度、提高耐力運(yùn)動(dòng)的適應(yīng)性，增強(qiáng)機(jī)體抗疲勞的能力。

3.4 百兩茶提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)性小鼠糖代謝的作用 糖原是大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)的主要能量來源，它既能以無氧酵解方式又能以有氧代謝方式再合成ATP。機(jī)體功能的衰竭總是和糖原的耗竭同時(shí)發(fā)生，因此糖原的含量能說明疲勞發(fā)生的快慢或程度。MG的動(dòng)用有利于提高運(yùn)動(dòng)輸出功率，MG含量越高，抗低氧能力及運(yùn)動(dòng)耐力愈強(qiáng)。短時(shí)間高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)，MG酵解提供能量，產(chǎn)生大量LA，而LA的大量堆積則限制運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度提高。MG消耗時(shí)，LG分解為葡萄糖釋放到血液，以維持血糖濃度相對(duì)穩(wěn)定。因此，LG與長(zhǎng)時(shí)間耐力運(yùn)動(dòng)也存在密切關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，給小鼠灌胃100～400 mg/kg百兩茶提取物，能顯著提高LG水平;百兩茶提取物能使LG儲(chǔ)備能力增強(qiáng);而MG變化不明顯，可能與實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度未至力竭有關(guān)。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)證明百兩茶提取物可加快LA清除與減少其產(chǎn)生，降低LA的堆積，提高小鼠的運(yùn)動(dòng)能力與機(jī)體對(duì)高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)的適應(yīng)性;增加小鼠LG的貯備能力，延長(zhǎng)耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)間。

［1］杜萬紅，劉仲華，施玲，等.十兩茶提取物抗高脂誘導(dǎo)家兔動(dòng)脈粥樣硬化形成涉及調(diào)節(jié)ADMA/NO通路［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2008，13(7):747-752.

［2］杜萬紅，劉仲華，施玲，等.花卷茶提取物對(duì)高膽固醇血癥大鼠血脂和內(nèi)皮功能的影響［J］.中南藥學(xué)，2008，6(2):129-132.

［3］杜萬紅，彭世喜，劉仲華，等.十兩茶提取物對(duì)小鼠免疫功能的影響［J］.藥物分析雜志，2010，30(11):2237-2240.

［4］黃春桃，杜萬紅，劉小陽，等.十兩茶水提取物降糖作用及機(jī)制研究［J］.生命科學(xué)研究，2012，16(3):233-236.

［5］李乃民，賈丹兵.疲勞學(xué)［M］.北京:學(xué)苑出版社，2009:568-569.

［6］張穎捷，杜萬紅.國(guó)內(nèi)外抗疲勞研究進(jìn)展［J］.實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012，19(7):1112-1116.

［7］徐家玉，侯蘊(yùn)華，曾令福，等.靈芝茶對(duì)小鼠的抗疲勞作用研究［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，1998，25(3):304-305.

［8］梁勇，邵宛芳，黃業(yè)偉，等.云南綠茶抗疲勞作用研究［J］.食品工業(yè)科技，2011，32(1):217-276.

［9］張愛香，呂偉紅，徐珊，等.松果菊苷抗氧化作用研究［J］.實(shí)用老年醫(yī)學(xué)，2009，23(4):310-312.

［10］劉維佳，夏立營(yíng)，李明喜，等.人參花茶抗疲勞實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2009，47(15):59-61.

［11］Wang J，Li S，F(xiàn)an Y，et al.Anti-fatigue activity of the water-soluble polysaccharides isolated from Panax ginseng C.A.Meyer［J］.J Ethnopharmacol，2010，130(2):421-423.

［12］Cai RL，Yang MH，Shi Y，et al.Antifatigue activity of phenylethanoid-rich extract from Cistanche deserticola［J］.Phytother Res，2010，24(2):313-315.