董 杰

(天津田邊制藥有限公司，天津 300385)

鹽酸沙格雷酯緩釋片為5－HT2受體拮抗劑，臨床上主要用于改善慢性動脈閉塞癥所引起的潰瘍、疼痛以及冷感等缺血性諸癥狀的治療。本實驗采用高效液相色譜法測定鹽酸沙格雷酯緩釋片中鹽酸沙格雷酯的含量，取得了滿意結(jié)果。

1 儀器和試藥

LC－6A高效液相色譜儀(日本島津)，SPD－6AV紫外檢測器，N－2000型色譜工作站。鹽酸沙格雷酯對照品(天津田邊制藥有限公司提供，純度99.0%，批號SAR0201)。鹽酸沙格雷酯緩釋片(自制，批號130711、130712、130713)。乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:Phenomenex C18柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm);流動相:乙腈 － 水 － 三氟乙酸(48∶52∶0.1);柱溫:40 ℃;檢測波長:272 nm;流速:1.0 ml/min;進樣量:10 μl。

2.2 溶液配制

2.2.1 對照品溶液 精密稱取鹽酸沙格雷酯對照品約50 mg，置50 ml量瓶中，加乙腈，振搖使之充分溶解后稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，用乙腈－水(1∶1)稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 取鹽酸沙格雷酯緩釋片20片，稱重，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于含鹽酸沙格雷酯100 mg)，置100ml量瓶中，加乙腈超聲提取，冷卻至室溫后加乙腈稀釋至刻度，搖勻，濾過，續(xù)濾液經(jīng)離心(1500 r/min，5 min)后，精密量取上清液 5 m l，置 50 ml量瓶中，用乙腈－水(1∶1)稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3 空白溶液 按處方中各輔料的比例配制成不含鹽酸沙格雷酯的空白樣品，照“2.2.2”項下方法配制溶液，作為空白溶液。

2.3 方法適用性試驗 依給定的色譜條件，量取鹽酸沙格雷酯對照品溶液、供試品溶液和空白溶液各10 μl，分別進樣，記錄色譜圖，見圖1。鹽酸沙格雷酯的保留時間約為8 min，與其他組分峰的分離度＞1.5，理論板數(shù)為5289;空白輔料對鹽酸沙格雷酯峰無干擾。

2.4 線性關(guān)系 分別取鹽酸沙格雷酯對照品適量，照“2.2.1”項下方法配制溶液，制成濃度為 20、50、100、150、200和300 μg/ml對照品溶液，按給定的色譜條件進行測定，記錄各濃度的色譜峰面積，以峰面積對溶液濃度求得回歸方程為 Y=2.3×104X－3876(r=0.9996)。在 20 ～300 μg/ml范圍內(nèi)，峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。

圖1 對照品(A)樣品(B)空白樣品(C)HPLC色譜圖

2.5 精密度試驗 取濃度為100 μg/ml的對照品溶液，連續(xù)進樣6次，RSD為0.38%。表明所選定的色譜條件系統(tǒng)穩(wěn)定。

2.6 重現(xiàn)性試驗 取同一批樣品(批號130711)進行5次測定，平均含量為標(biāo)示量的 100.1%，RSD為0.35%(n=5)，表明該方法重現(xiàn)性良好。

2.7 回收率試驗 精密稱取鹽酸沙格雷酯對照品80、100和120 mg各3份，分別加入處方量的輔料，照“2.2.2”項下方法配制溶液，依給定的色譜條件，取10 μl進樣，記錄色譜圖，測得平均回收率為99.9%，RSD為 0.27(n=9)，結(jié)果見表 1。

表1 回收率試驗測定結(jié)果

2.8 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液在室溫條件下放置，依給定的色譜條件，測定 0、1、2、4、6 和 8 h 時的峰面積，RSD為0.55%(n=6)，表明樣品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 樣品含量測定 取不同批號的鹽酸沙格雷酯緩釋片各20片，稱重，研細(xì)，照“2.2.2”項下方法配制溶液，依給定的色譜條件，取10 μl進樣，各批分別進樣3次，記錄色譜圖。另精密稱取鹽酸沙格雷酯對照品約50 mg，置 50 ml量瓶中，照“2.2.1”項下方法配制溶液，依給定的色譜條件，取10 μl進樣，記錄色譜圖。按照外標(biāo)法以峰面積計算3批樣品(批號130711、130712、130713)平均標(biāo)示量的百分含量(n=3)，結(jié)果分別為 100.2%、100.4%和 99.8%。

3 討論

3.1 在樣品處理過程中，超聲處理可使樣品充分溶解，經(jīng)離心處理可以去除未被濾除的微小不溶物，以確保溶液的澄清。

3.2 樣品測定結(jié)果表明，采用該方法測定鹽酸沙格雷酯緩釋片含量，能消除輔料的影響，測定結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制。