董海偉

卡式微柱凝膠試驗在臨床輸血檢驗中的應(yīng)用

董海偉

目的分析卡式微柱凝膠試驗在臨床輸血檢驗中的價值。方法選取本院收治的1288例住院患者進行抽血檢查，對血液樣品同時進行傳統(tǒng)方法與卡式微柱凝膠法檢驗血型。結(jié)果在1288例患者血液中用卡式微柱凝集法檢測到一次性正確率正定型為100.00%，反定型為99.84%。用鹽水法檢測出一次性正確率正定型為99.38%，反定型為98.76%。RhD型共10例，占0.78%。結(jié)論卡式微柱凝膠試驗加強臨床輸血安全保障。

卡式微柱凝膠；臨床輸血；檢驗

輸血工作的關(guān)鍵在于快速安全，但傳統(tǒng)血液配對方法卻不能滿足現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的要求，所以許多學(xué)者對于臨床輸血檢驗進行探索試驗，發(fā)現(xiàn)卡式微柱凝膠試驗用于臨床輸血檢驗可以完全滿足現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對于臨床輸血的要求。卡式微柱凝膠是一種免疫檢測血型血清的方法，其可以準(zhǔn)確快速進行血液配對，而且污染率小，所需樣品劑量小[1]?？ㄊ轿⒅z試驗已經(jīng)逐漸取代傳統(tǒng)血型血清檢測方法應(yīng)用于臨床輸血檢驗中，現(xiàn)將筆者對本院患者進行血液檢驗資料總結(jié)匯報如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取自2011年9月到2012年10月本院收治的住院患者共1288例，其中男685例，女603例，年齡13～72歲，平均年齡(32.1±14.2)歲。1288例患者均取肘靜脈血3 ml，加入肝素抗凝。

1.2檢測原理 血液中指示性紅細(xì)胞上包被中有抗人IgG抗體，抗體的Fc段可以與指示性細(xì)胞反應(yīng)結(jié)合，如果待測血清中有抗血小板抗體就可以與這段結(jié)合形成復(fù)合物，加入交聯(lián)試劑后就可以聚通過合成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)?？ㄊ轿⒅z系統(tǒng)柱子具有一定離心力，起到分析篩選作用，網(wǎng)狀復(fù)合物可以與凝膠表面結(jié)合，就可分離紅細(xì)胞與復(fù)合物，而且凝膠與不同網(wǎng)狀復(fù)合物的結(jié)合程度不同，產(chǎn)生的陽性凝集陽性不同，進一步鑒別復(fù)合物。

1.3檢測方法 按照規(guī)范要求用鹽水在試管內(nèi)對正向定型與反向定型進行檢驗。取卡式凝膠管并做好標(biāo)記，將生理鹽水將配制成0.05%的紅細(xì)胞懸液，在A、B管中加入取50ul的5%紅細(xì)胞懸液、抗A、抗B血清20ul與待測血清50ul加入標(biāo)記好的凝膠管中，在D管中加入待檢血清50ul與抗D血清20 ul。在A1、B1管中分別加入A、B型0.5%的紅細(xì)胞懸液50 ul與待測血清50ul。設(shè)置溫度為37℃，進行孵育10 min，在向凝膠管中加入50 ul的O型血混合血小板，再進行900～1000轉(zhuǎn)/min離心3 min，取出觀察結(jié)果。

1.4判斷標(biāo)準(zhǔn) 管中紅細(xì)胞全部沉淀于柱底為陰性，部分甚至全部與柱內(nèi)凝膠結(jié)合為陽性。

2 結(jié)果

在1288例患者血液中用卡式微柱凝集法檢測到一次性正確率正定型為100.00%，反定型為99.84%。用鹽水法檢測出一次性正確率正定型為99.38%，反定型為98.76%。RhD型共10例，占0.78%。針對26例不符合者血清，再采用生理鹽水清洗后再進行鑒定，發(fā)現(xiàn)有4例患者紅細(xì)胞數(shù)量異常，7例患者血清蛋白中含有纖維蛋白，4例血液樣品因保存時間太久導(dǎo)致不能使用。剩余的11例患者血液進行進一步檢查發(fā)現(xiàn)有5例有腫瘤因子，4例有產(chǎn)生自身凝集，2例有自身凝集障礙。兩種方法檢驗結(jié)果見表1。

表1 兩種方法檢驗結(jié)果比較(例，%)

3 討論

輸血在醫(yī)學(xué)中的地位是無可替代的，傳統(tǒng)的輸血方法有鹽水法、酶法、聚凝胺法等，這些方法的最低檢測限高、操作過程繁瑣，自動化程度低，不容易被標(biāo)準(zhǔn)化，人為影響因素較多。眾所周知，對于輸血患者應(yīng)是危重患者，若不及時給予輸血治療可能會致殘，甚至是死亡，但是如果血型血清不匹配可能會形成抗凝現(xiàn)象，出現(xiàn)血管內(nèi)栓塞，最后誘發(fā)心血管疾病引起殘疾或者死亡，后果也十分嚴(yán)重，所以輸血前需要快速、準(zhǔn)確的配對。臨床上運用傳統(tǒng)方法進行血型配對、血清配對出現(xiàn)的醫(yī)療事故較多，對患者以及醫(yī)院都造成不可抹滅的陰影，是激發(fā)廣大學(xué)者對血型配對的探究。卡式微柱凝膠試驗是近年來發(fā)展起來的一種新型快速進行血型血清配對的檢驗方法，可以通過細(xì)小的凝膠顆粒組成的濾網(wǎng)，配合系統(tǒng)調(diào)控的離心速率下，快速將凝結(jié)的紅細(xì)胞與非凝結(jié)的紅細(xì)胞分離，在電腦顯示屏幕上可以反應(yīng)出不同的圖譜，再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的解讀法解讀圖譜，做到標(biāo)準(zhǔn)化[2]?？朔鹘y(tǒng)配對方法的缺點，可以快速、準(zhǔn)確進行血液配對，保障臨床輸血快速、安全?？ㄊ轿⒅z試驗分別與傳統(tǒng)血型檢驗方法進行比較，發(fā)現(xiàn)卡式微柱凝膠試驗準(zhǔn)確率、操作步驟、安全性、靈敏度等均優(yōu)于傳統(tǒng)試驗方法，從實踐證明卡式微柱凝膠實驗的優(yōu)越性。

血小板抗體在臨床輸血中有重要意義，快速檢測血小板自身抗體可以有效預(yù)防患者免疫性血小板減少性疾病[3]。尤其是多次接受輸血的患者容易產(chǎn)生血小板抗體，但是目前臨床上對于血液中血小板抗體的檢測方法不多，增加多次輸血患者接受輸血的危險性。史恩祥等人將卡式微柱凝膠試驗方法用于血小板抗體的檢測，發(fā)現(xiàn)卡式微柱凝膠試驗檢測血小板抗體的靈敏度以及準(zhǔn)確度都非常高，經(jīng)過卡式微柱凝集試驗后可以準(zhǔn)確有效的選取合適患者的血小板樣品進行輸入，減少患者不良反應(yīng)的產(chǎn)生。

本次資料中有發(fā)現(xiàn)某些患者因自身疾病會影響卡式微柱凝膠試驗的準(zhǔn)確性，比如對于患有自身凝血功能障礙、免疫性溶血性貧血等疾病時就會影響鑒定結(jié)果，且對于癌癥患者(產(chǎn)生腫瘤)也不適合進行卡式微柱凝膠試驗，也會影響鑒定結(jié)果，所以在進行卡式微柱凝膠試驗前應(yīng)對患者自身疾病進行判斷[4]。按照規(guī)范的標(biāo)準(zhǔn)對血液進行保存處理后再進行有關(guān)血型血清的檢查是非常重要的，本次資料中發(fā)現(xiàn)有4例因血液樣品保存太久，導(dǎo)致不能檢測，當(dāng)卡式微柱凝膠柱用時間過長以后，這些因素就可能造成檢查反應(yīng)的假陽性或者假陰性，誤導(dǎo)醫(yī)護人員。當(dāng)然對于靈敏度高的卡式凝集微柱有影響，對于傳統(tǒng)檢驗方法影響更為嚴(yán)重，所以在進行血型血清檢查前做好預(yù)處理是十分重要的工作。但總的來說，卡式微柱凝膠試驗符合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)追求的快速、高效、安全的理念，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，傳統(tǒng)經(jīng)典方法只能成為過去，新型科學(xué)性方法必將代替?zhèn)鹘y(tǒng)方法?？ㄊ轿⒅z試驗不僅僅可以有效挽救患者生命，也避免醫(yī)護人員因接觸血液樣品，減少醫(yī)護人員對血液樣品的污染，造成血液樣品檢驗不準(zhǔn)確，也避免血液樣品中可能存在的病菌侵襲醫(yī)護人員，對醫(yī)護人員的生命安全也是一種保障。

[1] 林燕.微柱凝膠卡式配血法的臨床應(yīng)用.實驗與檢驗,2011,29(4):381-382.

[2] 史恩祥.卡式微柱凝膠法檢測血小板抗體的應(yīng)用.臨床輸血與檢驗,2007,9(1):70-71.

[3] 袁碧和.卡式微柱凝膠方法在血型鑒定中的應(yīng)用及價值.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(15):1838.

[4] 賴科.全自動血型儀在血型檢測中的應(yīng)用.臨床血液學(xué)雜志,2009,2(4):207-208.

461000 河南省許昌市人民醫(yī)院輸血科