黃 裕 姜青明 王 冬

子宮內(nèi)膜癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%，近年來其發(fā)病率呈世界性持續(xù)上升趨勢，且發(fā)病年齡降低，呈現(xiàn)年輕化［1］。子宮內(nèi)膜癌在分子水平上的致癌機理尚不完全清楚，它的發(fā)生發(fā)展是多因素參與的結(jié)果，涉及多種癌基因的激發(fā)和抑癌基因的失活。STAT3是新發(fā)現(xiàn)的核轉(zhuǎn)錄因子，能介導機體中多種生長因子信號及細胞因子信號向細胞核中傳導，從而影響腫瘤細胞的增殖及分化［2-5］。雌、孕激素是女性生殖系統(tǒng)中的重要激素，當兩者水平紊亂時可刺激子宮內(nèi)膜，從而誘導子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生［4］。本文將對子宮內(nèi)膜癌患者中 ER、PR、STAT3表達情況進行分析，并探討三者的相關性。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

選取本院2012年1月至2013年3月收治的子宮內(nèi)膜癌患者30例為研究對象，患者經(jīng)病理組織學及影像學診斷證實為子宮內(nèi)膜癌，所有患者均行手術治療且術前未接受放化療?；颊吣挲g為36～76歲，平均年齡為(49.6 ±3.8)歲，患者腫瘤大小為0.8～5.9 cm，平均大小為(2.8±1.4)cm。病理學分級:G1級10例，G2級12例，G3級8例。FIGO臨床分期(2009年):Ⅰ期11例，Ⅱ期10例，Ⅲ期8例，Ⅳ期1例;其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例。選取同期行普通查體的健康婦女30例為對照組，年齡為21～78歲，平均年齡為(48.8±4.2)歲。

1.2 方法

采用免疫熒光組化法檢測2組子宮內(nèi)膜組織中ER、PR、STAT3的表達。兔抗人STAT3多克隆體購于福州邁新生物技術公司，ER、PR鼠抗人多克隆抗體購于北京金橋生物技術公司。以1∶150的濃度將兔抗體STAT3多克隆體稀釋，ER、PR鼠抗體多克隆抗為即用型。ER、PR采用EDTA熱修復處理20 min，STAT3采用檸檬酸緩沖液于高壓鍋中熱修復處理2 min后采用冷水洗滌，并采用PBS緩沖液對樣品進行沖洗，隨后依次在試樣板中加入一抗、二抗以及DAB進行顯色反應。經(jīng)蘇木精復染后采用乙醇對樣本脫水并制成中性樹膠封片，并與已知的陽性切片進行對比，陰性對照則采用PBS緩沖液替代一抗的樣本進行參照。

1.3 免疫組化結(jié)果的判斷

①ER、PR陽性表達為棕黃色顆粒見于細胞核內(nèi)，STAT3陽性表達為棕黃色顆粒見于細胞質(zhì)及細胞核內(nèi)。②在倍數(shù)為100的顯微鏡下觀察細胞著色情況，根據(jù)著色程度由輕至重可分別記為0、1、2、3。隨機選取5個視野點，采用倍數(shù)為400的顯微鏡分別對5個視野進行觀察，每個視野進行細胞計數(shù)，并計算細胞的陽性百分比(以500個細胞作為一組計算單位)，細胞陽性百分率:1為＜10%，2為≥10%～50%，3為 ＞50%。積分計算:①與②計算所得的分值相乘。積分:0分為陰性“－”，1～3分為弱陽性“+”，4～6分為中度陽性“++”，7～9分為強陽性“+++”［5］。

1.4 統(tǒng)計學分析

應用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用百分比表示;組間計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗，相關性采用單因素分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 ER、PR、STAT3 陽性表達情況分析

子宮內(nèi)膜癌組織中ER、PR、STAT3陽性表達率分別為 73.33%(22/30)、80.00%(24/30)、76.66%(23/30)，顯著高于對照組的 10.00%(3/30)、26.67%(8/30)、16.67%(5/30)，組間差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 ER、PR、STAT3陽性表達情況分析(例，%)

2.2 子宮內(nèi)膜臨床病理特征與ER、PR、STAT3陽性表達的關系

子宮內(nèi)膜癌中STAT3、ER表達均與腫瘤臨床分期、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(P均＜0.05);而PR則與臨床分期及病理分級有關(P均＜0.05)，見表2。

2.3 STAT3與ER及PR相關性分析

經(jīng)相關性分析可知，STAT3與ER激素呈正相關(γ =0.452，P=0.000)，與 PR 激素無相關(γ =0.1378，P=0.071)。

3 討論

研究表明，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生及進展與原癌基因的激活、抑癌基因失活及受體異常有關，這些異常因素可導致細胞信號傳導通路受阻，使得正常細胞的血管生成受到影響，促進癌細胞血管生成，從而促進癌細胞分化、生長［6］。

STAT3具有促進細胞增生、抑制細胞凋亡的作用，參與機體腫瘤的生成、發(fā)展及凋亡。研究證實細胞因子信號的轉(zhuǎn)導主要是通過JAK/STAT途徑完成的，JAK信號轉(zhuǎn)導以及STAT3途徑在細胞因子傳導過程中起重要作用［7］。STAT3是重要的核轉(zhuǎn)錄因子，主要存在于細胞質(zhì)中，當機體腫瘤被激活后，其與腫瘤DNA結(jié)合，并通過酪氨酸磷酸化途徑誘導絲氨酸激酶及YAK，調(diào)控靶基因，最終調(diào)控細胞的增生、分化、凋亡。在正常生理狀況下，STAT3的激活狀態(tài)持續(xù)的時間非常短，但對正常細胞生理功能起到重要的作用。大量研究表明腫瘤細胞中STAT3的活性顯著高于正常組織細胞，在胃癌、乳腺癌、惡性黑色素瘤等惡性腫瘤中均可見STAT3的表達，提示STAT3表達異常與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關系。朱麗霞等［8］采用免疫組化法測定子宮內(nèi)膜組織中STAT3的表達情況，發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌患者中STAT3陽性表達率為64%，而對照組子宮內(nèi)膜組織中STAT3僅表達20%。

表2 臨床病理特征與ER、PR、STAT3陽性表達的關系(例，%)

本研究中30例子宮內(nèi)膜癌患者中共發(fā)現(xiàn)23例患者STAT3表達為陽性，總陽性表達率為76.67%，顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織，與腫瘤臨床分期、病理分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關，而與患者年齡、腫瘤大小相關性不顯著，提示STAT3可能參與子宮內(nèi)膜癌的生成及轉(zhuǎn)移過程。

目前研究表明［9］，雌孕激素的過度分泌可刺激子宮內(nèi)膜增生，通過測定ER、PR水平可有效判斷子宮內(nèi)膜增生程度，ER、PR水平的上升與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生有密切關系。雌、孕激素受體傳導信號在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展過程中有重要調(diào)控作用，ER屬于激素核受體家族中的一員，而PR則屬于類固醇激素受體家族成員。類固醇激素可直接通過核膜及細胞膜與細胞核內(nèi)受體結(jié)合，并能通過轉(zhuǎn)錄因子對癌基因進行調(diào)控及表達［10］。周虹等［11］認為，在激素的作用下可刺激子宮內(nèi)膜增生，萎縮性子宮內(nèi)膜盡管失去激素作用基礎，但在低激素水平刺激下可導致腺體活性過度，從而促使子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生。廖化梅等［12］認為ER、PR缺乏是引起子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的獨立危險因素，ER、PR可作為判斷子宮內(nèi)膜癌惡性程度的預測指標之一。本研究中子宮內(nèi)膜癌組織中 ER、PR陽性表達率分別為73.33%、80.00%，ER 表達與腫瘤臨床分期、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關，而PR則與臨床分期及病理分級有關，研究結(jié)果與相關文獻報道一致。同時研究發(fā)現(xiàn)，ER、PR表達水平越低，腫瘤惡性程度越高，分化程度越低，患者預后越差。

近年相關研究表明［13］，雌激素可激活子宮內(nèi)膜癌患者中ER表達，并能通過非核轉(zhuǎn)導激活STAT3表達。本研究中STAT3與ER激素呈正相關(γ=0.452，P=0.000)，而與 PR 激素無相關(γ =0.1378，P=0.071)。通過上述研究可推測雌激素(ER)的調(diào)控與STAT3的表達關系密切，雌激素通過促進胞質(zhì)中STAT3發(fā)生磷酸化激活，轉(zhuǎn)導至胞核內(nèi)發(fā)揮生物功能。而這一過程與PR無相關性，提示PR陰性表達的子宮內(nèi)膜癌患者還可能通過其他靶底物以不同機制參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，尚需探索新的研究方向。

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