劉細(xì)祥，蘭翠玲，史兵方，何柳媚

（百色學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)系，廣西 百色 533000）

0 引言

甲醛是一種具有強(qiáng)烈刺激性氣味的氣體，屬于高毒性物質(zhì)，已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織（WHO）確定為致癌、致畸形物質(zhì)，對呼吸道和人體免疫系統(tǒng)均有較大影響[1].食品中違禁使用吊白塊和水發(fā)食品用甲醛浸泡等事件的發(fā)生，使甲醛問題成為全球公共衛(wèi)生關(guān)注的焦點(diǎn)[2]，并被列入國家食品安全戰(zhàn)略研究的重點(diǎn).因此建立安全快速的食品中甲醛測定方法尤為重要.食品中甲醛和吊白塊的測定首先要進(jìn)行樣品預(yù)處理.目前國內(nèi)采用的樣品前處理方法主要是農(nóng)業(yè)部頒布的蒸餾法（NY 5172—2002）,但是蒸餾法操作麻煩、費(fèi)時，不適合于大批量食品樣品中的甲醛含量分析的預(yù)處理.

超聲提取作為一種新的前處理技術(shù)，具有設(shè)備簡單、提取時間短和提取效果好等優(yōu)點(diǎn)，近年來在環(huán)境分析、食品工業(yè)和中藥提取等方面有較多研究報道[3-5]，但是超聲提取用于食品中甲醛提取鮮有研究報道.本研究采用超聲提取技術(shù)提取粉絲、腐竹等食品實(shí)際樣品中的甲醛，采用乙酰丙酮法進(jìn)行分析，并與蒸餾法進(jìn)行了對比研究.

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

甲醛（AR，廣東光華化學(xué)廠），乙酰丙酮（AR，廣東西隴化工廠），硫酸（AR，廣東光華化學(xué)廠），磷酸（AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），液體石蠟（CP，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），乙酸銨（AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），冰乙酸（AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），五水硫代硫酸鈉（AR，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司），碘（AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），碘化鉀（AR，天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司），可溶性淀粉（AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），重鉻酸鉀（AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）.

甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液：吸取甲醛（37%～40%）10.00 mL，加入0.5 mL（1+35）硫酸溶液用水稀釋至500 mL，搖勻，甲醛濃度用碘量法[6]進(jìn)行標(biāo)定.

甲醛標(biāo)準(zhǔn)使用液：取甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.00 mL，加蒸餾水稀釋至1 L.

1.2 儀器

721型可見分光光度法計：上海菁華科技儀器有限公司；AL204電子分析天平：梅特勒-托利多儀器上海有限公司；KQ-200KDB型高功率數(shù)控超聲清洗器：昆山市超聲儀器有限公司.

1.3 樣品中甲醛提取方法

1.3.1 蒸餾法

準(zhǔn)確稱量10 g剪碎粉絲于500 mL蒸餾瓶中，加入2.5 mL液體石蠟和10 mL 10%H3PO4，加蒸餾水至200 mL，蒸餾1 h后，將澄清的餾出液移入100 mL容量瓶中，定容后取6 mL進(jìn)行光度法分析.

1.3.2 超聲提取法

準(zhǔn)確稱量0.5 g剪碎粉絲于25 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水，旋緊管塞后置于超聲清洗器中水浴，在一定溫度下超聲提取一定時間后，取出比色管用冷水冷卻到室溫.取上清液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后取6 mL進(jìn)行光度法分析.

1.4 分析方法

采用乙酰丙酮分光光度測定提取液中甲醛的含量，并將光度法測定的甲醛含量換算成食品中的甲醛含量（mg/kg），甲醛含量計算公式為：

式中：c為光度法測得的提取液中甲醛的含量，mg/L；m為稱量食品樣品的質(zhì)量，g.

2 結(jié)果與分析

2.1 超聲提取條件的優(yōu)化

2.1.1 超聲功率對超聲提取甲醛效果的影響

準(zhǔn)確稱量0.5 g剪碎的粉絲于25 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水并旋緊管塞，提取溫度60℃，提取時間為5 min，分別選取超聲功率80 W、100 W、140 W、160 W、200 W進(jìn)行超聲提取試驗(yàn)，超聲提取甲醛效果用不同超聲功率條件下提取液中實(shí)際測得的粉絲中甲醛含量（mg/kg）表示，結(jié)果見圖1.由圖1可知，隨著超聲功率的升高，測得的粉絲中甲醛含量也隨之升高，當(dāng)超聲功率為100 W時，測得的粉絲中甲醛含量達(dá)到最大值5.09 mg/kg.但隨著超聲功率的繼續(xù)升高，測得的粉絲中甲醛含量下降，主要是因?yàn)殡S著超聲功率的增加，樣品的糊化程度增加，影響了測量.綜合考慮，將最佳超聲功率確定為100 W.min、10 min、15 min、20 min進(jìn)行超聲提取試驗(yàn)，超聲提取甲醛效果用不同提取時間條件下提取液中實(shí)際測得的粉絲中甲醛含量（mg/kg）表示，結(jié)果見圖2.由圖2可知，隨著提取時間增加，測得的粉絲中甲醛含量增加，提取時間為10 min時，測得的粉絲中甲醛含量達(dá)到最大值，為11.39 mg/kg，提取時間超過10 min后，測得的粉絲中甲醛含量基本保持不變，故確定最佳提取時間為10 min.

圖2 提取時間對超聲提取甲醛效果的影響

2.1.3 提取溫度對超聲提取甲醛效果的影響

準(zhǔn)確稱量0.5 g剪碎的粉絲于25 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水并旋緊管塞，提取時間為10 min，超聲功率為100 W，分別選取提取溫度50℃、60℃、65℃、70℃、75℃進(jìn)行超聲提取試驗(yàn)，超聲提取甲醛效果用不同提取溫度條件下提取液中實(shí)際測得的粉絲中甲醛含量（mg/kg）表示，結(jié)果見圖3.由圖3可知，隨著提取溫度的升高，測得的粉絲中甲醛含量增加，提取溫度為65℃時，測得的粉絲中甲醛含量達(dá)到最大值，為9.76 mg/kg，提取溫度在65℃后繼續(xù)升高，測得的粉絲中甲醛含量有所降低，主要是隨著提取溫度升高，樣品的糊化程度增加，影響了測量，因此確定最佳提取溫度為65℃.

圖3 提取溫度對超聲提取甲醛效果的影響

圖1 超聲功率對超聲提取甲醛效果的影響

2.1.2 提取時間對超聲提取甲醛效果的影響

準(zhǔn)確稱量0.5 g剪碎的粉絲于25 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水并旋緊管塞，提取溫度60℃，超聲功率為100 W，分別選取提取時間3 min、5

2.2 超聲提取和蒸餾法提取的比較

超聲提取和蒸餾法提取的比較試驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)［7］中的方法進(jìn)行.

（1）超聲提取法：準(zhǔn)確稱量0.5 g剪碎粉絲于25 mL具塞比色管中，分別加入10 mL的蒸餾水，加入2 mL 7.9 mg/L的甲醛標(biāo)準(zhǔn)使用液，浸泡12 h，旋緊管塞后置于超聲清洗器中水浴，在最佳超聲提取條件下進(jìn)行提取，提取完成后，取出比色管用冷水冷卻到室溫.取上清液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后進(jìn)行光度法分析，平行測定3次.

（2）蒸餾法：準(zhǔn)確稱量10 g剪碎粉絲樣品于蒸餾燒瓶中，加入40 mL 7.9 mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)使用液，浸泡12 h，加入2.5 mL液體石蠟和10 mL 10%H3PO4，加蒸餾水至200 mL，蒸餾1 h后，將澄清的流出液移入100 mL容量瓶中定容后進(jìn)行光度法分析，平行測定3次.

扣除本底值，計算回收率，試驗(yàn)結(jié)果如表1所示.

表1 超聲提取與蒸餾法提取回收率的比較

由表1可知，對于粉絲樣品，超聲提取優(yōu)化條件下的回收率為80%～90%，優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)蒸餾法的30%～40%，蒸餾法則需要1 h左右，而且操作過程繁瑣.與蒸餾法比較，超聲提取具有試劑用量少、提取時間短、提取效率高、操作簡便等優(yōu)點(diǎn).

2.3 實(shí)際樣品的測定

分別準(zhǔn)確稱量0.5 g的剪碎粉絲、腐竹、竹筍、香菇樣品，依次加入到4個25 mL具塞比色管中，均加入10 mL的蒸餾水，旋緊管塞后置于超聲清洗器中水浴，在最佳超聲提取條件下進(jìn)行提取，提取完成后，取出比色管用冷水冷卻到室溫.取上清液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后進(jìn)行光度法分析并計算出實(shí)際樣品中甲醛的含量，平行測定3次，結(jié)果如表2所示.

表2 實(shí)際樣品中甲醛的提取（n=3）

從表2可以看出，超聲提取方法的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均小于5%，精密度好，每個樣品的提取時間10 min左右，是一種理想的實(shí)際食品樣品中甲醛的快速提取方法.

3 結(jié)論

超聲提取食品中甲醛最佳提取條件為：食品樣品0.5 g，超聲功率為100 W，提取時間為10 min，提取溫度為65℃.超聲提取與蒸餾法提取的比較表明超聲提取的回收率和精密度優(yōu)于蒸餾法.利用超聲提取實(shí)際樣品中的甲醛，精密度好并且快速，是一種操作簡便、回收率高、精密度好的食品中甲醛快速提取方法.

［1］ Takigawa T，Horike T，Ohashi Y，et al.Were volatile organic compounds the inducing factors for subjective symptoms of employees working in new1y constructed hospitals［J］.Environ mental Toxicology，2004，19（4）：280-290.

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［3］ 蔡全英，黃慧娟，呂輝雄，等.超聲提取-高效液相色譜法測定土壤中的4-壬基酚［J］.分析測試學(xué)報，2012，31（2）：185-189.

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［5］ 姜莉莉，焦淑清，張楠楠，等.酒舒顆粒的提取工藝研究［J］.中草藥，2012，43（8）：1540-1542.

［6］ 劉細(xì)祥，蘭翠玲.乙酰丙酮法測定水發(fā)食品中甲醛含量的測定［J］.廣州化工，2011，39（23）：92-94.

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