摘 要：目的：預(yù)測(cè)扶正抗毒膠囊可能引起的臨床不良反應(yīng)，包括不良反應(yīng)的性質(zhì)、程度、劑量-反應(yīng)和時(shí)間-反應(yīng)關(guān)系等；推測(cè)扶正抗毒膠囊反復(fù)給藥的臨床毒性靶器官或靶組織；預(yù)測(cè)臨床試驗(yàn)用藥的安全劑量范圍，提示臨床試驗(yàn)中需重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的指標(biāo)。方法：扶正抗毒膠囊大鼠連續(xù)灌胃給藥6個(gè)月，觀察藥物對(duì)大鼠體重、血液學(xué)指標(biāo)、血清生物化學(xué)指標(biāo)以及主要臟器指數(shù)和病理組織學(xué)的影響。結(jié)果：扶正抗毒膠囊高、中、低劑量連續(xù)灌胃給藥6個(gè)月未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)。給藥組高劑量大鼠體重增長(zhǎng)有所減慢；少量血清生化和血液學(xué)指標(biāo)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義，提示臨床試驗(yàn)時(shí)應(yīng)關(guān)注患者的相關(guān)功能及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢查。結(jié)論：試驗(yàn)結(jié)果表明扶正抗毒膠囊高、中、低劑量連續(xù)灌胃給藥6個(gè)月對(duì)大鼠無(wú)明顯毒性作用。

關(guān)鍵詞：扶正抗毒膠囊；長(zhǎng)期毒性；試驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)：R965.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-2349（2013）04-0050-02

1 試驗(yàn)材料

1.1 受試藥物 扶正抗毒膠囊，具有益氣養(yǎng)陰，滋腎健脾、清熱解毒的作用，用于輔助治療HIV感染潛伏期，證屬氣陰兩虛，脾腎不足，邪毒內(nèi)蘊(yùn)所致的胸悶、氣短、疲乏無(wú)力、盜汗、自汗等。云南省中醫(yī)中藥研究所自制，批號(hào)：20071101，規(guī)格：0.5 g/粒，臨床用法用量：1次6粒，1日4次。藥物配制：取扶正抗毒膠囊內(nèi)容物280 g，加蒸餾水配制成濃度為0.5 g/mL的藥液。以該濃度為高劑量給藥濃度，中、低劑量藥物分別以高劑量藥物按1：2：4稀釋即得，給藥時(shí)搖勻。

1.2 動(dòng)物 SD大鼠200只，雌雄各半，體重60～80 g，由昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（滇）2005-0008。

1.3 實(shí)驗(yàn)環(huán)境 云南省中醫(yī)中藥研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)屏障系統(tǒng)（清潔級(jí)），實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（滇）2005-0007。溫度：18～25℃ 濕度：40～60%，飼料：輻照鼠用滅菌飼料，由江蘇蘇州雙獅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料科技有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：蘇E飼生字（2002）006。

1.4 主要儀器 ALCYON 300 全自動(dòng)生化分析儀，美國(guó)雅培公司生產(chǎn)。MIK-6108K型全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀，日本Nihon Kohden產(chǎn)品。CL4型半自動(dòng)止凝血測(cè)定儀，德國(guó)BE公司產(chǎn)品。BP310S 電子天平，北京賽多利斯天平有限公司生產(chǎn)。

2 試驗(yàn)方法

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥方法 大鼠隨機(jī)分為4組，每組50只，雌雄各半，分別為空白對(duì)照組（給予等容積的蒸餾水）、扶正抗毒膠囊高（10 g/kg體重）、中（5 g/kg體重）、低劑量組（2.5 g/kg體重）。灌胃給藥體積為20ml/kg，每天1次，每周6天，連續(xù)6個(gè)月。

2.2 觀測(cè)方法 給藥90 d后，對(duì)照組、扶正抗毒膠囊高、中、低劑量組各殺檢12只（雌、雄各6只）動(dòng)物，進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)。剩余動(dòng)物繼續(xù)給藥至180 d后每組再各殺檢20只（雌、雄各10只）動(dòng)物，進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)。剩余大鼠停止給藥，常規(guī)飼養(yǎng)，觀察1個(gè)月后，全部殺檢，進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)，以此觀察動(dòng)物毒性反應(yīng)的可逆程度或可能出現(xiàn)的延遲性毒性反應(yīng)。

2.3 觀察指標(biāo) 給藥期間及停藥恢復(fù)期每日觀察大鼠一般外觀形態(tài)、行為活動(dòng)、飲水進(jìn)食、糞便、體重、飼料攝入量；血液學(xué)檢查17項(xiàng)：血漿凝血酶原時(shí)間（PT），血清生物化學(xué)檢查15項(xiàng)；尸體解剖和臟器指數(shù)及病理組織學(xué)檢查。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料符合正態(tài)分布、方差齊者用t′檢驗(yàn)，方差不齊者用t′ 檢驗(yàn)，若計(jì)量資料不符合正態(tài)分布，則用秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；等級(jí)資料用秩和檢驗(yàn)。

3 試驗(yàn)結(jié)果

3.1 一般狀態(tài) 大鼠連續(xù)給予扶正抗毒膠囊6個(gè)月及停藥4周，各組大鼠的一般外觀形態(tài)、行為活動(dòng)、飲水進(jìn)食情況未見(jiàn)異常。給藥6個(gè)月內(nèi)，各試驗(yàn)組大鼠體重穩(wěn)定增長(zhǎng)，雄性高劑量組體重增長(zhǎng)較慢，與對(duì)照組大鼠相比較，差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。

3.2 血清生物化學(xué)檢查 扶正抗毒膠囊給藥3個(gè)月，高劑量組的TBIL、K、NA、CL、GLU，中劑量組的TBIL、K、GLU，低劑量組的K、NA、CL、GLU與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；給藥6個(gè)月（表1），高劑量組的TP、ALB、CK、CL、CR、TG，低劑量組的ALB、CK、CL、TG與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；停藥4周，高劑量組的ALT、NA、GLU，中劑量組的TP、AST、K、CL、BUN、TG，低劑量組的TP、ALT、GLU與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；其余指標(biāo)與對(duì)照組比較差異無(wú)顯著性意義。

3.3 血液學(xué)檢查 扶正抗毒膠囊給藥3個(gè)月，高劑量組的MCV，中劑量組的MCH、MCHC PDW，低劑量組的MCH、PDW與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；給藥6個(gè)月（表2），高劑量組的WBC、HB、MCV、MCH、PLT、PDW，中劑量組的WBC、HB、HCT、RC、PT、INR，低劑量組的HB、HCT、PT、INR與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；停藥1個(gè)月，高劑量組的HB、HCT、MCHC、PLT、MO、RC、PT，中劑量組的HB、MCHC、RC，低劑量組的HB、MCV、MCHC、RC、PT、INR與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；其余指標(biāo)與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。

3.4 主要臟器檢查 扶正抗毒膠囊給藥3個(gè)月，雄性高劑量組的腎上腺、肝臟、腎臟，中劑量組的肝臟、肺臟、腎臟，低劑量組的肺臟臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義，雌性高劑量組的肝臟，中劑量組的心臟，低劑量組的胸腺、肝臟臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。給藥6個(gè)月，雄性高劑量組的睪丸、肝臟、脾臟、腎臟，中劑量組的脾臟，低劑量組的肝臟臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義，雌性高劑量組的心臟、肝臟、脾臟、腎臟、腦，中劑量組的肝臟，低劑量組的心臟、腎臟臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。停藥1個(gè)月，雄性高劑量組的肝臟、脾臟、腎臟，中劑量組的肝臟，低劑量組的肝臟、腎臟臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義，雌性高劑量組的胸腺、腦，中劑量組的肝臟，低劑量的胸腺臟器系數(shù)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。

4 討論與結(jié)論

根據(jù)扶正抗毒膠囊的臨床擬用量、療程，確定高劑量為10 g/kg（體重），為人臨床擬用劑量的58.3倍；中劑量為5 g/kg（體重），為人臨床擬用劑量的29.2倍；低劑量為2.5 g/kg（體重），為人臨床擬用劑量的14.6倍。扶正抗毒膠囊連續(xù)灌胃給藥3個(gè)月、6個(gè)月給藥組高劑量動(dòng)物體重增長(zhǎng)略緩；給藥3個(gè)月、給藥6個(gè)月、停藥一個(gè)月后這3個(gè)時(shí)期，給藥組的少量血液學(xué)、血清生化指標(biāo)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義。分析原因，雖然給藥組的少量血液學(xué)、血清生化指標(biāo)與對(duì)照組比較差異有顯著性意義，但病理組織學(xué)檢查并未見(jiàn)相關(guān)臟器病理改變，未為確保用藥安全，在臨床試驗(yàn)時(shí)應(yīng)關(guān)注受試者的相關(guān)功能及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢查。

綜上所述，扶正抗毒膠囊在所用劑量和6個(gè)月用藥時(shí)間內(nèi)灌胃給藥，對(duì)大鼠無(wú)明顯毒性作用。

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