佟 鑫 高 慧 裴啟洋 賈天柱
五味子是木蘭科植物五味子[Schisandra chinensis (Turcz.)Baill.]的干燥成熟果實,是我國長期使用的補益類藥物,有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心的功效。用于久嗽虛喘、夢遺滑精、遺尿尿頻、久瀉不止、自汗、盜汗、津傷口渴、短氣脈虛、內(nèi)熱消渴、心悸失眠等癥[1]。歷版《中國藥典》收載五味子炮制品均為醋五味子,關(guān)于五味子炮制前后藥效學(xué)比較,多見保肝、免疫、止咳等方面研究[2~4]。針對五味子治療“內(nèi)熱消渴”,本文對五味子炮制前后降血糖作用進行比較研究,為生熟五味子臨床合理用藥提供實驗依據(jù)。
1.材料:(1)動物:雄性SD 大鼠,SPF 級,體重180 ~220g,由遼寧長生生物技術(shù)有限公司提供,實驗動物合格證號:SCXK(遼)2010 -0001。(2)藥品與試劑:五味子,購自遼寧丹東大梨樹五味子GAP 基地,由筆者醫(yī)院王冰教授鑒定為五味子[Schisandra chinensis (Turcz.)Baill.]。醋五味子:取凈五味子加米醋拌勻,悶潤1.5h,蒸制5h,50℃干燥至恒重。五味子∶米醋=100∶20。阿卡波糖(拜耳醫(yī)藥保健有限公司,批號:BJ09769)。STZ:Sigma 公司生產(chǎn),批號:05758。血糖試紙:拜安康有限公司生產(chǎn),批號:4991 -2008。(3)儀器:拜安康血糖儀(拜耳醫(yī)藥保健有限公司,型號:1816)。
2.方法:(1)生五味子、醋五味子水煎液制備:取生五味子、醋五味子粗粉,加10 倍量水,煎煮3 次,每次1h,合并煎液,濃縮,制成生五味子、醋五味子水煎液(濃度均為280mg/ml)。(2)脂肪乳的制備:將20g 豬油加熱至融化,加入5g 膽固醇,待膽固醇全溶后加入20ml 吐溫-80、10ml 甘油,加水至100ml,加入1g 谷氨酸鈉,5g 蔗糖,5g 果糖。每天灌胃,連續(xù)1個月,使大鼠體重達到350g 左右。(3)造模、分組與給藥:大鼠腹腔注射STZ(35mg/kg),72h 后用血糖儀測血糖值,血糖值>18mmol/L 為造模成功,選擇造模成功的大鼠隨機分組:模型對照組、阿卡波糖組(0.45mg/kg)、生五味子組、醋五味子組,另取未造模大鼠作為空白對照組,每組10 只??瞻讓φ战M、模型對照組灌胃同體積生理鹽水,其他各組灌胃相應(yīng)藥液,給藥體積均為10ml/kg。(4)供試大鼠血糖檢測:分組后開始灌胃治療性給藥,連續(xù)14 天。于給藥后第7 天、第14 天天斷尾尖采血,用血糖儀與血糖試紙測大鼠血糖值,觀察大鼠血糖變化情況。
3.統(tǒng)計學(xué)方法:測定數(shù)據(jù)用SPSS 10.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析,結(jié)果以均數(shù)±標準差(±s)表示,用單因素方差分析數(shù)據(jù),以P <0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
實驗大鼠經(jīng)腹腔給藥STZ 后,各鼠均表現(xiàn)出多飲、多食、多尿及體重減輕的典型糖尿病癥狀,且72h后血糖值較正常血糖值范圍均明顯升高(>18mmol/L),表明2 型糖尿病大鼠造模成功。給藥7 天后,測定各組大鼠血糖值,生五味子組大鼠血糖值顯著降低,與模型組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義,接近阿卡波糖陽性對照組,而醋五味子組未表現(xiàn)出降血糖作用。給藥14 天后,生五味子組、醋五味子組大鼠血糖值與給藥7 天時相比,出現(xiàn)了相反的結(jié)果:醋五味子組大鼠血糖值明顯降低,接近正常血糖值水平,但生五味子組大鼠血糖值卻出現(xiàn)了升高的現(xiàn)象,且升高顯著。結(jié)果見表1。
表1 生、醋五味子對STZ 致2 型糖尿病大鼠血糖的影響(±s,mmol/L)
表1 生、醋五味子對STZ 致2 型糖尿病大鼠血糖的影響(±s,mmol/L)
與空白對照組比較,* P <0.05;與阿卡波糖組比較,△P <0.05
組別 n 造模后 給藥7 天 給藥14天空白對照組 10 4.29 ±0.70* 3.26 ±0.53*△ 3.14 ±0.46*模型對照組 10 20.60 ±1.07 20.38 ±2.62△ 20.00 ±2.11△阿卡波糖組 10 20.64 ±0.95 8.14 ±2.40* 3.04 ±0.34*△生五味子組 10 19.69 ±2.44 6.83 ±1.53* 17.61 ±0.83*△醋五味子組 10 21.45 ±1.88 21.85 ±2.70△ 7.98 ±3.41*△
傳統(tǒng)理論認為五味子“入補藥熟用,入嗽藥生用”,即五味子“生熟異用”[5]。本研究選擇五味子功效中治療“津傷口渴、內(nèi)熱消渴”為研究內(nèi)容,進行五味子及其藥典收載炮制品種——醋五味子的對比研究,意在為五味子臨床合理應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
實驗研究表明,生五味子、醋五味子對STZ 致2型糖尿病大鼠均表現(xiàn)出降血糖作用,與傳統(tǒng)功效“內(nèi)熱消渴”相吻合。生品、炮制品間降血糖作用表現(xiàn)出明顯差異,即生五味子降血糖作用起效快且顯著,表現(xiàn)在給藥7 天時大鼠血糖值降低顯著,但在給藥14天后,大鼠血糖值反而上升;醋五味子,降血糖作用起效慢,表現(xiàn)在給藥14 天時大鼠血糖值降低顯著。
關(guān)于五味子炮制前后降血糖作用的研究未見報道,本研究對此進行初探并對實驗結(jié)果進行了客觀如實的報道,雖就目前研究結(jié)果而言,還不能對臨床應(yīng)用有明顯的幫助,但可為進一步的研究奠定很好的基礎(chǔ)。由于本實驗按照參考文獻[6]方法,僅考察了給藥7天、14 天時大鼠的血糖值變化情況,但鑒于五味子及其炮制品較明顯的降血糖作用,在今后的研究中,將繼續(xù)對五味子及其炮制品降血糖作用進行深入研究,擬將其納入復(fù)方中,更好地探明五味子的炮制原理。
1 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[S]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:61 -62
2 葛會奇.五味子炮制工藝規(guī)范化及原理研究[D]. 沈陽:遼寧中醫(yī)藥大學(xué),2007
3 陸兔林,毛春芹,呂高虹,等. 五味子不同炮制品補益作用的實驗研究[J],中國藥學(xué)雜志,2009,44(15):1147 -1149
4 姚慶,陸兔林,胡芳,等.五味子不同炮制品對小鼠CYP450 的誘導(dǎo)作用[J].華西藥學(xué)雜志,2011,26(3):249 -251
5 張浩.仁術(shù)便覽[M].???海南國際新聞出版社,1995:320
6 徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學(xué)[M].3 版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002