杜 冰 任 華 祁 靈 江文正 錢 旻 (華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，上海 200241)

免疫學(xué)技術(shù)的應(yīng)用最早可以追溯到我國(guó)北宋時(shí)期，人們嘗試采用人痘苗接種的方式預(yù)防天花。隨著生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，免疫學(xué)技術(shù)早已脫離了經(jīng)驗(yàn)時(shí)期轉(zhuǎn)入到現(xiàn)代免疫學(xué)時(shí)期，與疾病的診斷、預(yù)防和治療密切相關(guān)，成為生命科學(xué)研究中最為重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)涉及到生物學(xué)研究的各個(gè)方面，與實(shí)際應(yīng)用聯(lián)系緊密。免疫學(xué)作為生命科學(xué)發(fā)展的前沿學(xué)科，以其研究的深度和應(yīng)用的廣度成為溝通生物學(xué)基礎(chǔ)和臨床研究的重要橋梁［1］。

免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)的主要目的就是通過實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)節(jié)，提高學(xué)生對(duì)于理論知識(shí)的感性認(rèn)識(shí)，加深對(duì)教學(xué)內(nèi)容的理解，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)過程中培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度，尤其是利用免疫學(xué)技術(shù)分析和解決實(shí)際問題的能力，使他們真正能夠?qū)W以致用。免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量將直接影響學(xué)生對(duì)免疫學(xué)基本理論的理解以及進(jìn)一步將所學(xué)的知識(shí)服務(wù)于行業(yè)、應(yīng)用于實(shí)際的能力。然而由于實(shí)驗(yàn)課程時(shí)間的限制以及實(shí)驗(yàn)成本的考慮，需要我們對(duì)開設(shè)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方式進(jìn)行系統(tǒng)的精選和優(yōu)化［2］。為此我們教研室在原有實(shí)驗(yàn)課程的基礎(chǔ)之上對(duì)免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系做了較大幅度的改革，使之與生化技術(shù)實(shí)驗(yàn)有機(jī)整合，通過模塊化、系統(tǒng)化的實(shí)驗(yàn)安排，使同學(xué)們既掌握了免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)，又對(duì)其在蛋白質(zhì)分析領(lǐng)域的應(yīng)用有了更加深入的認(rèn)識(shí)，以適應(yīng)教學(xué)改革新形勢(shì)的需要。

1 精簡(jiǎn)基礎(chǔ)驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，提高實(shí)驗(yàn)安排的緊湊性

在我院原有的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課程中，考慮到實(shí)驗(yàn)技術(shù)的全面性和系統(tǒng)性，開設(shè)了較多的基礎(chǔ)驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)。但經(jīng)過長(zhǎng)期的教學(xué)實(shí)踐我們發(fā)現(xiàn)，有些實(shí)驗(yàn)課程具有操作流程長(zhǎng)、技術(shù)難度大、可重復(fù)性差等缺點(diǎn)，既占用了寶貴的實(shí)驗(yàn)時(shí)間，又沒有取得理想的教學(xué)效果，十分有必要對(duì)其進(jìn)行精簡(jiǎn)和優(yōu)化。如傳統(tǒng)的抗血清制備技術(shù)操作流程長(zhǎng)，技術(shù)相對(duì)單一，整個(gè)免疫過程覆蓋了免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)課程的絕大部分時(shí)間，所獲得的抗體也無法進(jìn)行有效的檢測(cè)和評(píng)價(jià)，往往是費(fèi)時(shí)、費(fèi)力還難以取得較好的效果。此外，玫瑰花環(huán)實(shí)驗(yàn)、溶血空斑實(shí)驗(yàn)以及巨噬細(xì)胞吞噬功能評(píng)價(jià)等實(shí)驗(yàn)由于本身靈敏度和特異性的問題，對(duì)操作人員技術(shù)要求較高，對(duì)于實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)不足的學(xué)生來說往往難以取得較好的實(shí)驗(yàn)效果，重復(fù)性較差，學(xué)生反響不佳。

更為重要的是這些實(shí)驗(yàn)在實(shí)際應(yīng)用過程中已經(jīng)逐步被流式細(xì)胞術(shù)等更靈敏，更穩(wěn)定的技術(shù)所取代。因此，我們對(duì)一些操作時(shí)間長(zhǎng)，效果差、應(yīng)用不夠廣泛的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了大膽的精簡(jiǎn)，提高了實(shí)驗(yàn)的成功率，縮短了免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)所占時(shí)間。同時(shí)結(jié)合目前免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)，增加了免疫沉淀、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、競(jìng)爭(zhēng)ELISA、免疫印跡等應(yīng)用非常廣泛的現(xiàn)代免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)在整個(gè)課程中的比重，在有限的教學(xué)時(shí)間中使學(xué)生掌握更多、更先進(jìn)、更實(shí)用的免疫學(xué)技術(shù)，使他們真正可以學(xué)以致用，從根本上提高免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)效果。

2 有機(jī)整合綜合性模塊實(shí)驗(yàn)，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的系統(tǒng)性

綜合性模塊實(shí)驗(yàn)是一類需要綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)來完成的實(shí)驗(yàn)，與傳統(tǒng)的單一實(shí)驗(yàn)相比具有更強(qiáng)的實(shí)用性和系統(tǒng)性。為提高學(xué)生的科研水平和解決實(shí)際問題的能力，越來越多的院校嘗試開展較為系統(tǒng)的模塊實(shí)驗(yàn)以提高學(xué)生的綜合研究水平。而免疫學(xué)技術(shù)本身所具有的特點(diǎn)就決定了其與蛋白質(zhì)檢測(cè)、鑒定密切相關(guān)，十分適合與傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)分離、純化技術(shù)進(jìn)行有機(jī)整合開設(shè)綜合性模塊實(shí)驗(yàn)。為此，針對(duì)我院生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的具體情況，我們對(duì)配套的免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行了整合和優(yōu)化，綜合運(yùn)用經(jīng)典免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)和現(xiàn)代免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)為分離純化后的蛋白提供定性、定量以及定位檢測(cè)，使同學(xué)們真正能夠做到學(xué)以致用。

在采用生化方法對(duì)蛋白進(jìn)行初步分離純化后，我們采用免疫沉淀的方法，通過特異性抗體致敏后的SPA菌將所獲得的蛋白進(jìn)一步純化，利用簡(jiǎn)單的材料使同學(xué)們初步了解并掌握常見的免疫沉淀技術(shù)。然后通過經(jīng)典的雙向免疫擴(kuò)散、SPA協(xié)同凝集實(shí)驗(yàn)對(duì)分離得到的蛋白質(zhì)抗原進(jìn)行初步的定性檢測(cè)。在此基礎(chǔ)之上，我們通過免疫印跡實(shí)驗(yàn)對(duì)待測(cè)蛋白進(jìn)行更加系統(tǒng)的分析，通過與經(jīng)典免疫學(xué)技術(shù)比較使學(xué)生們對(duì)免疫印跡技術(shù)的優(yōu)勢(shì)有了更加直觀的認(rèn)識(shí)。然后通過我們優(yōu)化后的競(jìng)爭(zhēng)ELISA實(shí)驗(yàn)，使同學(xué)們能夠?qū)Λ@得的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量檢測(cè)，初步掌握可溶性抗原定量檢測(cè)的方法。最后通過免疫熒光技術(shù)，對(duì)抗原在細(xì)胞中的分布情況進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)借助流式細(xì)胞術(shù)對(duì)細(xì)胞的物理特征和熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析，增加同學(xué)們對(duì)流式細(xì)胞儀的優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)的感性認(rèn)識(shí)。通過一系列免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的開展，使同學(xué)們較全面地了解免疫學(xué)技術(shù)在蛋白質(zhì)定性、定量、定位檢測(cè)中的應(yīng)用，通過比較也使他們對(duì)現(xiàn)代免疫學(xué)技術(shù)的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)有了更系統(tǒng)的認(rèn)識(shí)，大大提高了免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)效果。

3 建立多元學(xué)習(xí)評(píng)價(jià)體系，充分調(diào)動(dòng)教師教學(xué)和學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性

合理有效的評(píng)價(jià)是促進(jìn)學(xué)生發(fā)展的有效手段。在免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)課程中建立有效的學(xué)習(xí)評(píng)價(jià)體系，可以促進(jìn)學(xué)生更好地掌握免疫學(xué)技術(shù)，有利于創(chuàng)新型人才的培養(yǎng)。而我們?cè)械拿庖邔W(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)模式相對(duì)單一，難以滿足新時(shí)期復(fù)合型人才培養(yǎng)的要求，為此我們與本院教育教法專業(yè)合作，嘗試構(gòu)建一個(gè)評(píng)價(jià)主體多元化、評(píng)價(jià)內(nèi)容全面化、評(píng)價(jià)方法多樣化、評(píng)價(jià)過程完整化的免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)多元學(xué)習(xí)評(píng)價(jià)體系。

針對(duì)每個(gè)不同免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，設(shè)計(jì)詳細(xì)的自評(píng)表，通過數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析歸納出實(shí)驗(yàn)的難點(diǎn)，并以此為線索重新優(yōu)化免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容，提高學(xué)生的學(xué)習(xí)質(zhì)量。同時(shí)我們也將學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)和建議歸納、整理出來用于優(yōu)化教學(xué)之用。

在評(píng)價(jià)方案實(shí)施過程中，進(jìn)一步鞏固了知識(shí)內(nèi)容、技術(shù)操作，實(shí)現(xiàn)了“以評(píng)促學(xué)”;學(xué)生學(xué)習(xí)信息的及時(shí)反饋以及師生的探討交流將學(xué)生的知識(shí)漏洞、教學(xué)盲點(diǎn)等暴露，促進(jìn)了教師對(duì)教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)方式的思考，一定程度上實(shí)現(xiàn)了“以評(píng)促教”;從而也促進(jìn)了學(xué)生學(xué)習(xí)方式和教師教學(xué)方式的改革，為其他實(shí)驗(yàn)課程的評(píng)價(jià)改革和評(píng)價(jià)自動(dòng)化提供經(jīng)驗(yàn)，實(shí)現(xiàn)了“以評(píng)促改”。

4 結(jié)語(yǔ)

經(jīng)過近年來免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容得到了優(yōu)化，教學(xué)質(zhì)量得到了提高，在沒有增加甚至減少了實(shí)驗(yàn)課時(shí)的情況下使實(shí)驗(yàn)的布局更加合理，內(nèi)容更加貼近實(shí)際，既減輕了學(xué)生的負(fù)擔(dān)、提高了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，也使學(xué)生的創(chuàng)新能力、實(shí)踐能力以及對(duì)科研的興趣得到了顯著提高。免疫學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革是一個(gè)長(zhǎng)期探索的過程，需要教師和學(xué)生們共同努力，教師要學(xué)會(huì)從學(xué)生的角度考慮問題，時(shí)時(shí)關(guān)注學(xué)生對(duì)教學(xué)過程的反饋，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性和積極性，全面提高學(xué)生的綜合素質(zhì)，以滿足現(xiàn)代高科技人才的培養(yǎng)要求。

［1］ 曹雪濤.免疫學(xué)研究的發(fā)展趨勢(shì)及我國(guó)免疫學(xué)研究的現(xiàn)狀與展望［J］.中國(guó)免疫學(xué)雜志，2009，25(1):10-23.

［2］ 吳艷芬，曹雪濤.關(guān)于免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)改革的幾點(diǎn)思考［J］.中國(guó)免疫學(xué)雜志，2011，27(5):468-470.

［3］ 袁廣卿，周俊宜，駱曉楓.免疫學(xué)與生物化學(xué)融合性實(shí)驗(yàn)教學(xué)的探索［J］.熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2009，9(9):1092-1093.