周佳麗，祝慧鳳，萬(wàn) 東，李曼霞，何 坪，徐曉玉

大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型已成為研究腦卒中的理想模型，通過(guò)此模型所產(chǎn)生的病理學(xué)及癥狀學(xué)改變接近臨床腦卒中患者[1]。該模型主要有兩種形式：永久性近側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞(pMCAO)模型和永久性遠(yuǎn)側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞聯(lián)合兩側(cè)頸總動(dòng)脈90 min閉塞(dMCAO/tMCAO)模型。在大鼠腦卒中研究中，pMCAO模型使用頻率較高，采用的方法即所謂的“Tamura”法和改良的“Tamura”法[2-3]。該模型可在大鼠背外側(cè)大腦皮質(zhì)及其下層的紋狀體產(chǎn)生相當(dāng)?shù)墓Ｋ烂娣e，此皮質(zhì)區(qū)域與對(duì)側(cè)前肢和后肢功能有關(guān)，可控制對(duì)側(cè)肢體感覺(jué)運(yùn)動(dòng)行為，而且動(dòng)物存活時(shí)間較長(zhǎng)，越有利于腦卒中的恢復(fù)研究。盡管有部分研究者對(duì)dMCAO/tMCAO這種混合式的缺血變異做過(guò)研究，但總的來(lái)說(shuō)對(duì)此模型的研究都不是很深入[4-7]，其產(chǎn)生的梗死灶限于額部和頂骨部的新大腦皮質(zhì)。

大鼠MCAO模型的相關(guān)病理生理學(xué)已有較為詳細(xì)的研究和描述[8-9]，其最大的局限在于缺乏一系列持久的、穩(wěn)定的、適當(dāng)?shù)脑u(píng)估方法來(lái)檢測(cè)動(dòng)物大腦局灶性缺血后行為障礙的改善及其對(duì)應(yīng)神經(jīng)功能的恢復(fù)，這就對(duì)腦卒中恢復(fù)藥的藥效研究造成了一定困難。雖然病理檢測(cè)與腦梗死體積的測(cè)量也可以成為腦卒中恢復(fù)藥藥效評(píng)價(jià)的重要手段，但動(dòng)物行為學(xué)的改變與檢測(cè)在藥效研究中是絕對(duì)不容忽視的。檢測(cè)腦卒中恢復(fù)藥的最佳動(dòng)物模型應(yīng)包括一定程度的但不是完全性的恢復(fù)，這可能更接近人腦卒中的實(shí)際狀況。有研究表明，在嚙齒類動(dòng)物模型中腦卒中后的第1周就有一定程度的神經(jīng)自我修復(fù)，一部分正常和接近正常的腦組織同時(shí)也會(huì)表現(xiàn)出一定的異常功能[10-11]，神經(jīng)修復(fù)程度與鼠齡也密切相關(guān)，這就顯示單純依靠病理檢測(cè)或腦梗死體積的測(cè)量來(lái)評(píng)估藥效有一定缺陷。腦卒中模型大鼠的對(duì)側(cè)前肢和后肢功能會(huì)出現(xiàn)明顯的障礙，并且這種功能障礙在1個(gè)月左右后出現(xiàn)緩慢、穩(wěn)定、不完全的恢復(fù)，因此在組織學(xué)檢測(cè)之外采用恰當(dāng)?shù)男袨閷W(xué)檢測(cè)是必要的。

行為學(xué)評(píng)估分為感覺(jué)運(yùn)動(dòng)行為評(píng)估和認(rèn)知行為評(píng)估：感覺(jué)運(yùn)動(dòng)行為評(píng)估主要偏向于對(duì)大鼠視覺(jué)、觸覺(jué)、胡須和本體感受刺激的反應(yīng)以及肢體運(yùn)動(dòng)功能方面的評(píng)價(jià)；認(rèn)知行為評(píng)估主要偏向于大鼠學(xué)習(xí)記憶能力方面的評(píng)價(jià)，如被動(dòng)回避(passive avoidance)[12]、旋臂迷宮(radial arm maze)[13]、Morris 水迷宮(morris water maze)[14]等?，F(xiàn)將國(guó)外學(xué)者制訂的一些感覺(jué)運(yùn)動(dòng)行為評(píng)估方法綜述如下。

1 單一性神經(jīng)行為檢測(cè)

1.1 神經(jīng)癥狀評(píng)分類

1.1.1 姿勢(shì)反射檢測(cè) 抓住大鼠尾巴，高于桌面10 cm，使其保持較為穩(wěn)定狀態(tài)。正常大鼠兩個(gè)前爪伸向桌面，而MCAO右側(cè)結(jié)扎的大鼠，左前爪屈曲。記分標(biāo)準(zhǔn)如下：1分，前肢屈曲，無(wú)其他異常；2分，向癱瘓側(cè)推鼠，阻力減??；3分，鼠自由活動(dòng)時(shí)，向患側(cè)打圈[15]。

1.1.2 Berderson評(píng)分法[2]輕抓尾巴，提起大鼠高于桌面10 cm，正常大鼠前爪伸直。0分：無(wú)神經(jīng)功能缺損；1分：腦部病變對(duì)側(cè)腕關(guān)節(jié)、肘關(guān)節(jié)屈曲，肩內(nèi)收屈曲；2分：上述體征+向麻痹側(cè)推阻力下降；3分：活動(dòng)時(shí)向麻痹側(cè)打圈(呈追尾狀)。

1.1.3 Longa神經(jīng)病學(xué)評(píng)分法[16]0分：沒(méi)有神經(jīng)功能缺損；1分：左側(cè)前爪不能完全伸展；2分：行走時(shí)，大鼠向左側(cè)轉(zhuǎn)圈；3分：行走時(shí)，大鼠身體向左側(cè)(癱瘓側(cè))傾倒；4分：不能自發(fā)行走，有意識(shí)喪失。

1.2 肢體對(duì)稱平衡類

1.2.1 升高肢體擺動(dòng)測(cè)試(elevated body swing test，EBST) EBST通常用于不對(duì)稱的運(yùn)動(dòng)行為的測(cè)試。將大鼠尾部提起，使其升高到離試驗(yàn)臺(tái)2.5 cm的位置。大鼠第1次肢體擺動(dòng)的方向只要被確定為是上身的擺動(dòng)并且不管朝哪一邊，擺動(dòng)角度大于10°，均被記錄下，測(cè)試完畢1次放置大鼠于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，接著又重新提高進(jìn)行測(cè)試，每只大鼠給予5 min時(shí)間。記錄向左或向右轉(zhuǎn)動(dòng)的次數(shù)以及相關(guān)百分比反映了大鼠上身肢體擺動(dòng)的偏好。實(shí)驗(yàn)中正常大鼠無(wú)典型的朝向偏好，然而單側(cè)腦卒中大鼠則明顯表現(xiàn)出向大腦病變對(duì)側(cè)偏轉(zhuǎn)的強(qiáng)烈趨向。計(jì)算每周測(cè)試的平均分作為分析記錄。模型大鼠表現(xiàn)出強(qiáng)烈的偏轉(zhuǎn)傾向，即偏向患側(cè)對(duì)側(cè)，1周測(cè)試的平均分作為最后記錄[17]。

1.2.2 平衡木評(píng)分法 平衡木反映的是前庭功能及本體感覺(jué)的變化，具備一定技巧性。造模前，需要進(jìn)行為期1周的平衡木練習(xí)，讓大鼠快速地通過(guò)升高的平衡木，進(jìn)入較暗的飼養(yǎng)箱，并且做好終點(diǎn)線(finish line)的標(biāo)志。平衡木為長(zhǎng)80.0 cm、寬2.5 cm、高2.5 cm的方木棒，行走面相對(duì)光滑。升高平衡木到距離地面1 m處，下方固定，用泡沫做鋪墊，防止大鼠行走時(shí)跌下。每次測(cè)試時(shí)大鼠連續(xù)3次通過(guò)平衡木，記錄通過(guò)平衡木的潛伏期以及通過(guò)時(shí)大鼠前肢或后肢踩空(foot faults)的次數(shù)。除此之外，若用評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)則分為6個(gè)等級(jí)：0分，能跳上平衡木，在上面行走不會(huì)跌倒；1分，能跳上平衡木，在上面行走跌倒機(jī)會(huì)少于50%；2分：能跳上平衡木，在上面行走跌倒機(jī)會(huì)大于或等于50%；3分，在健側(cè)后肢的幫助下能跳上平衡木，但受累癱瘓側(cè)后肢不能幫助向前移動(dòng)；4分，在平衡木上不能行走，但可以坐在上面；5分，將大鼠放在平衡木上會(huì)掉下來(lái)。正常大鼠一般能在平衡木上平穩(wěn)地通過(guò)，而模型大鼠通常前肢或后肢踩空，甚至從平衡木上滑落下來(lái)。3次測(cè)試結(jié)果的平均分作為最后成績(jī)[18]。測(cè)試時(shí)間為術(shù)后治療前7 d或15 d時(shí)以及治療后4周或9周時(shí)。

1.2.3 肢體對(duì)稱測(cè)試 將大鼠放于一定規(guī)則的鐵絲網(wǎng)中，網(wǎng)眼大小為2.3 cm×2.3 cm。當(dāng)大鼠在網(wǎng)中行走時(shí)，計(jì)數(shù)2 min內(nèi)其前爪漏到網(wǎng)眼中的次數(shù)。計(jì)數(shù)公式：(腦病變對(duì)側(cè)前爪的錯(cuò)步數(shù)-腦病變同側(cè)前爪的錯(cuò)步數(shù))/總步數(shù)；分值為正表明腦病變對(duì)側(cè)功能缺損；分值為負(fù)表明腦病變同側(cè)功能缺損[19]。

1.3 肢體運(yùn)動(dòng)能力類 肌力檢測(cè)：將一直徑為0.15 cm、長(zhǎng)46 cm的鐵絲繩置于距地面70 cm處，其下放3.5 cm泡沫箱。將鼠前爪放在繩上，放開(kāi)，記錄大鼠在繩上的時(shí)間。0分：掛于繩上0～2 s；1分：3～4 s；2分：5 s；3分：5 s后大鼠將后腿放在繩上[20]。

2 復(fù)合性神經(jīng)行為檢測(cè)

2.1 感覺(jué)運(yùn)動(dòng)整合類 感覺(jué)運(yùn)動(dòng)整合是指透過(guò)視、聽(tīng)、嗅、味、觸、重力感等感覺(jué)器官接受外界環(huán)境的訊息(刺激)，經(jīng)由感覺(jué)神經(jīng)傳達(dá)到大腦、脊髓等中樞神經(jīng)。經(jīng)由大腦整理、組織后，透過(guò)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)做出對(duì)外界訊息的一種反映。而經(jīng)由各種訊息的刺激，大腦加以整理、儲(chǔ)存、技藝、學(xué)習(xí)，完成整個(gè)神經(jīng)系統(tǒng)的連接與健全，奠定大腦組織架構(gòu)的完成，這個(gè)過(guò)程就叫感覺(jué)整合。訓(xùn)練和測(cè)試方式通常有圓筒測(cè)試(cylinder test)、安置測(cè)試(placing test)等，反映感覺(jué)功能、本體感功能、空間知覺(jué)功能等。

2.1.1 圓筒測(cè)試 本實(shí)驗(yàn)是Schallert等[21]設(shè)計(jì)研制的，將大鼠放于一個(gè)透明的聚甲基丙烯酸甲酯有機(jī)玻璃圓筒內(nèi)，圓筒直徑為18 cm、高30 cm，同時(shí)用攝像機(jī)記錄大鼠在其中的活動(dòng)情況，時(shí)間為3～5 min，分析大鼠使用前肢的偏喜情況及不對(duì)稱或偏位狀態(tài)。該圓筒對(duì)大鼠來(lái)說(shuō)有足夠的活動(dòng)空間，同時(shí)又促使其對(duì)側(cè)壁進(jìn)行探視，并使其無(wú)法爬到圓筒的頂部。在圓筒的背后直立一面鏡子，便于當(dāng)大鼠背對(duì)攝像機(jī)時(shí)實(shí)驗(yàn)員記錄其前肢活動(dòng)的狀況。在觀察過(guò)程中，大鼠使用一側(cè)前肢或雙側(cè)前肢豎立觸壁(vertical exploration of the walls)及觸底(landing)的數(shù)量均被記錄。當(dāng)大鼠在圓筒中探視時(shí)，第1次將某一前肢放置在側(cè)壁上時(shí)，該行為被記錄為“independent wall movement”1次，接下來(lái)如果大鼠又將另一側(cè)前肢放置在側(cè)壁上，而先前的那側(cè)前肢又沒(méi)有放下或移開(kāi)，該行為被記錄為“simultaneous limb-use movement”1次。依次按照此類方法記錄前肢情況。在大鼠偶然對(duì)側(cè)壁探視完后，第1次將某一前肢放置圓筒底部時(shí)，該行為被記錄為“l(fā)anding”1次，如果兩前肢同時(shí)接觸底部，該行為被記錄為“simultaneous limb-use”1次。不確定和判斷困難的動(dòng)作不納入記錄范圍。

最后將記錄的次數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析：(1)使用非受損前肢的活動(dòng)次數(shù)與活動(dòng)次數(shù)的總數(shù)作比較；(2)使用受損前肢的活動(dòng)次數(shù)與活動(dòng)次數(shù)的總數(shù)作比較。使用非受損前肢的百分比數(shù)減去使用受損前肢的百分比數(shù)得出全部前肢偏喜程度。前肢觸壁及觸底的情況再分別獨(dú)立分析。1周測(cè)試1次，每次讓大鼠探視2次，2次的得分計(jì)算平均分作為最后統(tǒng)計(jì)結(jié)果。測(cè)試時(shí)間為術(shù)后7、14、21、28 d。

2.1.2 安置測(cè)試 該實(shí)驗(yàn)是由De Ryck等[22]設(shè)計(jì)的，該實(shí)驗(yàn)中能反映與視覺(jué)、胡須觸覺(jué)、本體觸覺(jué)以及本體感受刺激相對(duì)應(yīng)的獨(dú)立的前肢安置狀態(tài)。同時(shí)與肢體觸覺(jué)和本體感受刺激相對(duì)應(yīng)的后肢安置狀態(tài)也同樣在該測(cè)試中得到反映。檢查前肢安置狀態(tài)時(shí)，將大鼠的軀干升高一定高度，保持前爪自由懸空，然后慢慢移向桌面邊緣，讓其觸須與桌面邊緣做短暫接觸(一種是視覺(jué)誘導(dǎo)的安置，另一種是觸須感應(yīng)誘導(dǎo)的安置)，同時(shí)將前爪與桌面邊緣做輕微的接觸(這是由肢體觸覺(jué)誘導(dǎo)的安置)，接著保持這一狀態(tài)，在前肢上不斷施加壓力(這是由本體感受誘導(dǎo)的安置)。用同樣的方法測(cè)試后肢安置狀態(tài)(由肢體觸覺(jué)和本體感受誘導(dǎo)的安置)。在前后肢的每只爪上重復(fù)測(cè)試6次，不管哪一只爪，直到出現(xiàn)3次正確的安置即可。每次測(cè)試記錄完全安置的3次，1周計(jì)算得分，平均值作為統(tǒng)計(jì)分析記錄。

2.2 細(xì)微運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)類 細(xì)微運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)指先對(duì)實(shí)物或圖解的細(xì)微部分具備正確的知覺(jué)感受能力和比較辨別能力，然后能正確而迅速地使眼和觸覺(jué)或嗅覺(jué)與肢體運(yùn)動(dòng)相協(xié)調(diào)，并迅速完成操作的能力。

2.2.1 單個(gè)小丸作業(yè)(single pellet task) 測(cè)量模具的制作采用透明的聚甲基丙烯酸甲酯有機(jī)玻璃箱，尺寸為45 cm×14 cm×35 cm。在玻璃箱正前面的中央有一1 cm寬的縫隙條，從離地面2 cm處升高到離地面15 cm處。在容器外側(cè)即裂縫前端，裝上一離地面3 cm高、2 cm寬的橫條架，然后在1 cm寬的縫隙條兩側(cè)各向外延伸1 cm處分別作一條劃痕，小丸最開(kāi)始置于這兩條劃痕處的橫條架上，一旦大鼠在抓取時(shí)表現(xiàn)出了某一前肢偏喜后，小丸就放于偏喜前肢的對(duì)側(cè)。每次放置小丸時(shí)，有較短時(shí)間的間隔，這將刺激大鼠每次抓取后返回容器中探視，之后重新調(diào)整姿勢(shì)準(zhǔn)備下次的抓取。每天訓(xùn)練1次，每次給予10 min的抓取時(shí)間，連續(xù)抓取20粒小丸作為完全成功的記錄，抓取成功率的計(jì)算方法為：成功率=(每次抓取的數(shù)量/20)×100，最后結(jié)果做統(tǒng)計(jì)比較[23-24]。

2.2.2 托盤作業(yè)(tray task) 測(cè)試模具為一長(zhǎng)26 cm、寬19 cm、高28 cm的鐵籠。容器的正前面由寬2 mm的豎欄桿支撐并且兩欄桿之間有9 mm寬的縫隙。頂部由透明的聚甲基丙烯酸甲酯有機(jī)玻璃構(gòu)成，便于觀察。在正前面欄桿的前面裝有一寬4.0 cm、深0.5 cm的托盤，在鐵籠的后部有供水處。每次裝30 mg食物，大鼠能自由從欄桿空隙中伸肢抓取食物并獲得食物，每天堅(jiān)持1 h的訓(xùn)練，連續(xù)7 d。測(cè)試時(shí)每只大鼠給予10 min的時(shí)間，評(píng)估方式：如果前肢伸過(guò)欄桿空隙，但是未抓到食物或食物滑落，被計(jì)為“reach”；如果獲得食物并且吃掉計(jì)為“hit”，用下列公式計(jì)算：Percent success=(number of hits/number of reaches)×100，最后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在訓(xùn)練和測(cè)試時(shí)，保證大鼠處于空腹?fàn)顟B(tài)，且連續(xù)下來(lái)體質(zhì)量不能減輕到原體質(zhì)量的85%[23，25]。測(cè)試時(shí)間為術(shù)后1、3、7、15 d，或治療后4周甚至9周。

2.2.3 樓梯抓取技能測(cè)試(staircase skilled-reaching test) 在階梯測(cè)試和訓(xùn)練期間，大鼠的食物要限制在12 g/d，每天記錄體質(zhì)量，體質(zhì)量不能下降到原始體質(zhì)量的80%。在造模前2周開(kāi)始訓(xùn)練，每次訓(xùn)練時(shí)間為2～15 min，讓大鼠抓取階梯上的小丸。測(cè)量模具由7步臺(tái)階組成，每步臺(tái)階上放有3粒小丸。staircase裝置固定于大鼠的任意一邊，要求大鼠必須爬上臺(tái)階的中心平臺(tái)去獲取食物。以大鼠每邊獲取小丸的數(shù)量用來(lái)作為前肢抓取能力的測(cè)量。在手術(shù)造模后，治療的前1周進(jìn)行測(cè)試，連續(xù)5 d，每天測(cè)試2次，每次記錄每只大鼠的抓取量，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析比較[26-27]。

綜上所述，一系列有關(guān)神經(jīng)功能修復(fù)的行為學(xué)評(píng)定體系正在逐步成熟。這些測(cè)試以不同的程度和形式追蹤實(shí)驗(yàn)性大鼠腦卒中后各種類型的行為改變，對(duì)治療因素的效果評(píng)估具有相對(duì)足夠的敏感性。將行為測(cè)試與組織病理觀測(cè)、腦梗死體積測(cè)定這兩者緊密地、分區(qū)域地聯(lián)系起來(lái)，使形態(tài)學(xué)的論證依據(jù)變得飽滿，讓治療因素的優(yōu)勢(shì)具有充分的說(shuō)服力，也利于實(shí)驗(yàn)者的分析比較。這些行為測(cè)試不是獨(dú)立的，若能有效、合理地將之進(jìn)行聯(lián)合搭配，這將對(duì)腦卒中模型動(dòng)物的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)行為評(píng)估開(kāi)辟更為寬闊的前景。

目前仍存在一些問(wèn)題值得探索。一方面在選擇上：(1)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦卒中的研究在急性期與慢性期的時(shí)間分隔上未能有較深入的闡述；國(guó)內(nèi)部分相關(guān)實(shí)驗(yàn)大多基于大鼠腦卒中急性期即相對(duì)較短期限的研究，常忽視了慢性期這一療效評(píng)估的重要時(shí)期。這也造成了實(shí)驗(yàn)與臨床脫軌的尷尬局面，即人體給藥時(shí)間和劑量難以從大鼠模型上進(jìn)行外延與擴(kuò)展；(2)由于對(duì)前述的急性期與慢性期的問(wèn)題未進(jìn)行深入研究，使得部分實(shí)驗(yàn)研究在較長(zhǎng)時(shí)間治療后仍然采用較為單一的簡(jiǎn)單神經(jīng)反射評(píng)分進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分，因存在自我修復(fù)及正常部分代償?shù)膯?wèn)題，即在7 d左右，腦卒中大鼠的某些神經(jīng)癥狀就已經(jīng)自我恢復(fù)正常了，所以用前述方法極為不科學(xué)，并且結(jié)果常產(chǎn)生一定的誤導(dǎo)作用。什么時(shí)期采用何種評(píng)價(jià)方式是亟須解決的問(wèn)題。另一方面，在操作上，上述一系列感覺(jué)運(yùn)動(dòng)評(píng)估方式皆具有一定的主觀性和對(duì)實(shí)驗(yàn)者的依賴性，其結(jié)果的重復(fù)性相對(duì)較為困難，對(duì)動(dòng)物的飲食、活潑度、實(shí)驗(yàn)員的主觀能動(dòng)性均有一定要求。因此，如何更客觀、更量化、更有可操作性及重復(fù)性，也有待解決。

總之，合理選擇與客觀操作，獨(dú)立、重復(fù)、盲法及隨機(jī)的原則都是在實(shí)驗(yàn)中需堅(jiān)持的。隨著現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，行為學(xué)檢測(cè)模具及相關(guān)機(jī)制的研究將被進(jìn)一步深入與創(chuàng)新，行為學(xué)發(fā)展的藍(lán)圖也更加令人期待。

1 Hunter AJ，Mackay KB，Rogers DC.To what extent have functional studies of ischemia in animals been useful in the assessment of potential neuroprotective agents?[J].Trends Pharmacol Sci，1998，19(2)：59-66.

2 Bederson JB，Pitts LH，Tsuji M，et al.Rat middle cerebral artery occlusion：evaluation of the model and development of a neurologic examination[J].Stroke，1986，17(3)：472-476.

3 Yamamoto M，Tamura A，Kirino T，et al.Behavioral changes after focal cerebral ischemia by left middle cerebral artery occlusion in rats[J].Brain Res，1988，452(1/2)：323.

4 Stroemer RP，Kent TA，Hulsebosch CE.Enhanced neocortical neural sprouting，synaptogenesis，and behavioral recovery with D-amphetamine therapy after neocortical infarction in rats[J].Stroke，1998，29(11)：2381-2393.

5 Brint S，Jacewicz M，Kiessling M，et al.Focal brain ischemia in the rat：methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries[J].J Cereb Blood Flow Metab，1988，8(4)：474-485.

6 Takahashi K，Pieper AA，Croul SE，et al.Post-treatment with an inhibitor of poly(ADP-ribose) polymerase attenuates cerebral damage in focal ischemia[J].Brain Res，1999，829(9)：46-54.

7 Markgraf CG，Green EJ，Watson B，et al.Recovery of sensorimotor function after distal middle cerebral artery photothrombotic occlusion in rats[J].Stroke，1994，25(1)：153-159.

8 Nishino H，Czurko A，F(xiàn)ukuda A，et al.Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat[J].Brain Res，1994，35(1)：51-56.

9 Witte OW，Bidmon HJ，Schiene K，et al.Functional differentiation of multiple perilesional zones after focal cerebral ischemia[J].J Cereb Blood Flow Metab，2000，20(8)：1149-1165.

10 Jaspers RM，Block F，Heim C，et al.Spatial learning is affected by transient occlusion of common carotid arteries(2VO)：comparison of behavioural and histopathological changes after ′2VO′ and ′four-vessel-occlusion′ in rats[J].Neurosci Lett，1990，117(1/2)：149-153.

11 Yamaguchi T，Suzuki M，Yamamoto M.YM796，a novel muscarinic agonist，improves the impairment of learning behavior in a rat model of chronic focal cerebral ischemia[J].Brain Res，1995，669(1)：107-114.

12 Bures J，Buresova O，Huston J.Techniques and basic experiments for the study of brain and behavior[M].Elsevier Science Publishers，1983：311-312.

13 Brown MF，F(xiàn)arley RF，Lorek EJ.Remembrance of places you passed：social spatial working memory in rats[J].J Exp Psychol Anim Behav Process，2007，33(3)：213-224.

14 Morris R.Development of a water-maze procedure for studying spatial memory in the rat[J].J Neurosci Methods，1984，11(1)：47-60.

15 Feeney DM，Gonzalez AL，Law WA.Amphetamine，haloperidol and experience interact to effect rate of recovery after motor cortex injury[J].Science，1982，218(4562)：855-857.

16 Longa EZ，Weinstein PR，Carlson S，et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniotomy in rats[J].Stroke，1989，20(1)：84-91.

17 Borlongan CV，Sanberg PR.Elevated body swing test：a new behavioral parameter for rats with 6-hydroxydopamine-induced hemiparkinsonism[J].J Neurosci，1995，15(7 Pt 2)：5372-5378.

18 Altumbabic M，Peeling J，Bigio MRD，et al.Intracerebral hemorrhage in the rat：effects of hematoma aspiration[J].Stroke，1998，29(9)：1917-1923.

19 Sondra T，Bland BA，Schallert T，et al.Early exclusive use of the affected forelimb after moderate transient focal ischemia in rats：function and anatomic outcome[J].Stroke，2000，31(5)：1144-1152.

20 Dean RL 3rd，Scozzafava J，Goas JA，et al.Age related differences in behavior across the life span of the C57BL/6J mouse[J].Exp Aging Res，1981，7(4)：427-451.

21 Schallert T，Hernandez TD，Barth TM.Recovery of function after brain damage：severe and chronic disruption by diazepam[J].Brain Res，1986，379(1)：104-111.

22 De Ryck M，van Reempts J，Borgers M，et al.Photochemical stroke model：flunarizine prevents sensorimotor deficits after neocortical infarcts in rats[J].Stroke，1989，20(10)：1383-1390.

23 Gharbawie OA，Gonzalez CL，Whishaw IQ.Skilled reaching impairments from the lateral frontal cortex component of middle cerebral artery stroke：a qualitative and quantitative comparison to focal motor cortex lesions in rats[J].Behav Brain Res，2005，156(1)：125-137.

24 Biernaskie J，Szymanska A，Windle V，et al.Bi-hemispheric contribution to functional motor recovery of the affected forelimb following focal ischemic brain injury in rats[J].Eur J Neurosci，2005，21(4)：989-999.

25 Gonzalez CL，Gharbawie OA,Williams PT,et al.Evidence for bilateral control of skilled movements：ipsilateral skilled forelimb reaching deficits and functional recovery in rats follow motor cortex and lateral frontal cortex lesions[J].European Journal of Neuroscience，2004，20(12)：3442-3452.

26 Biernaskie J，Corbett D.Enriched rehabilitative training promotes improved forelimb motor function and enhanced dendritic growth after focal ischemic injury[J].The Journal of Neuroscience，2001，21(14)：5272-5280.

27 Montoya CP，Campbell-Hope LJ，Pemberton KD，et al.The "staircase test"：a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats[J].J Neurosci Methods，1991，36(2/3)：219-228.