賴(lài)小芳，唐興國(guó)，何玲玲，王伯誠(chéng)

（浙江省臺(tái)州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江臨海 317000）

浙薯13脫毒快繁及移栽技術(shù)

賴(lài)小芳，唐興國(guó)，何玲玲，王伯誠(chéng)

（浙江省臺(tái)州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江臨海 317000）

將浙薯13種薯高溫催芽后，取莖尖在MS+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1培養(yǎng)基上分化出芽，經(jīng)相同培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)和1/2MS+NAA 0.02 mg·L-1+0.3%AC培養(yǎng)基的生根培養(yǎng)，可快速繁育出大量試管苗。試管苗可直接移到整理好的苗床里，也可先移到格盤(pán)里假植一段時(shí)間，待完全成活后再移栽到苗床里，2種移栽方法成活率都達(dá)95%以上。

浙薯13；脫毒；組培快繁；移栽技術(shù)

浙薯13是浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作核研究所選育的高產(chǎn)高淀粉加工型甘薯新品種，具有食用、淀粉加工和薯脯加工三大用途，屬?lài)?guó)內(nèi)首創(chuàng)［1］。臺(tái)州市于1999年開(kāi)始引入試種，現(xiàn)有種植面積約4 030 hm2，占全市甘薯總面積的30.1%，居各品種種植面積的第1位。但是經(jīng)多年連續(xù)無(wú)性繁殖后，由于多種病原物的反復(fù)侵染并在植株體內(nèi)積累，導(dǎo)致其產(chǎn)量下降，品質(zhì)變劣，明顯出現(xiàn)種質(zhì)退化現(xiàn)象，嚴(yán)重影響產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益的提高。為此，作者采用種薯高溫催芽與莖尖分生組織培養(yǎng)相結(jié)合的方法達(dá)到脫毒及快速繁殖的目的。

1 材料與方法

1.1 材料

參試材料為浙薯13健康種薯。

設(shè)備儀器有高壓滅菌鍋，光溫培養(yǎng)箱，超凈工作臺(tái)，栽培幼苗的塑料格盤(pán)。

藥劑有50%多菌靈可濕性粉劑，HgC12，MS及1/2MS培養(yǎng)基，6-BA，NAA，蔗糖，瓊脂粉，醋酸（AC），凈純水，金色3號(hào)育苗基質(zhì)，珍珠巖。

1.2 方法

浙薯13健康種薯，用50%多菌靈800倍液浸種消毒10 m in后，放進(jìn)經(jīng)高壓滅菌鍋消毒過(guò)的沙子里，事先控制好沙子的濕度，用尼龍薄膜蓋好后將沙盆放進(jìn)光溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)溫度為39.1℃，光照強(qiáng)度為2 500～3 000 lx，培養(yǎng)16 d后，薯塊發(fā)芽，可進(jìn)行外植體接種。取下經(jīng)過(guò)高溫脫毒的薯塊上的小芽，用純凈水洗去表面的沙土，吸干水分，置于超凈工作臺(tái)上備用。用0.1%的HgC12浸泡8 min，無(wú)菌水沖洗4次。將莖尖置于解剖鏡下，輕輕剝?nèi)ト~片，切取長(zhǎng)0.3～0.5 mm的莖尖分生組織，接種到MS+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1培養(yǎng)基上培養(yǎng)莖尖成苗。小苗經(jīng)過(guò)檢測(cè)，確定為無(wú)毒苗后，進(jìn)入快繁試驗(yàn)階段。各試驗(yàn)的培養(yǎng)室溫度為（23±2）℃，光照強(qiáng)度為2 000 lx，光照時(shí)間為10 h·d-1。

1.2.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比試驗(yàn)

在MS+NAA 0.02 mg·L-1培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，分別添加6-BA 0，0.05，0.1，0.5，1.0，1.5，3.0 mg·L-1［2］，共7個(gè)處理。添加蔗糖30 g· L-1、瓊脂粉5 g·L-1，pH值5.8。當(dāng)芽苗長(zhǎng)到5～6 cm高時(shí)，以每莖節(jié)為1段進(jìn)行剪切，接到各試驗(yàn)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，每個(gè)處理接種10瓶，每瓶接種3株，重復(fù)3次。30 d后測(cè)量株高、葉片數(shù)、根數(shù)與根長(zhǎng)等。

1.2.2 蔗糖濃度試驗(yàn)

在增殖培養(yǎng)基中添加蔗糖濃度為15，30，45，60，75，90 g·L-1，共6個(gè)處理，接種25 d后觀察其生長(zhǎng)情況。

1.2.3 生根培養(yǎng)基試驗(yàn)

在1/2MS培養(yǎng)基上分別添加NAA濃度為0.02，0.05，0.1，0.5，1.0 mg·L-1，且每個(gè)處理添加0.3%AC，以不添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為對(duì)照，共6個(gè)處理。25 d后測(cè)量株高、單株葉片數(shù)、單株根數(shù)和根長(zhǎng)。

1.2.4 試管苗定植試驗(yàn)

將經(jīng)過(guò)煉苗的脫毒苗移到事先準(zhǔn)備好的防蟲(chóng)網(wǎng)里育苗。設(shè)計(jì)2種移栽方法，一種是將脫毒苗直接移到整理好的苗床里，另一種是先移到塑料格盤(pán)里假植40 d，待完全成活后再移栽到苗床。格盤(pán)苗移栽基質(zhì)為金色3號(hào)育苗基質(zhì)與珍珠巖按體積1∶1的混合基質(zhì)［3］。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比的影響

從表1可以看出，隨著6-BA濃度的增高，培養(yǎng)苗生長(zhǎng)逐漸緩慢，在1.0 g·L-1濃度時(shí)，葉片開(kāi)始發(fā)黃，根部出現(xiàn)愈傷組織；當(dāng)濃度增到1.5 g· L-1時(shí)，原有葉片枯黃，根部愈傷組織增大；當(dāng)濃度增到3.0 g·L-1時(shí)，葉片枯萎，整個(gè)植株只長(zhǎng)愈傷組織，有的甚至死亡。0.05 g·L-1濃度的處理比較適宜繼代培養(yǎng)，該處理的試管苗植株健壯，葉色濃綠，生長(zhǎng)快，培養(yǎng)30 d時(shí)平均展開(kāi)葉片數(shù)多，莖粗壯。以后以每莖節(jié)為1段進(jìn)行剪切，放入相同的增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，不斷重復(fù)此過(guò)程，增殖系數(shù)可達(dá)到6.5。

2.2 蔗糖濃度的影響

表2結(jié)果表明，在添加蔗糖15～75 g·L-1內(nèi)，蔗糖濃度越高，薯苗生長(zhǎng)越好，添加75 g·L-1的處理薯苗表現(xiàn)植株健壯，生長(zhǎng)快，增殖系數(shù)高，添加90 g·L-1的處理比添加75 g·L-1的生長(zhǎng)略差。說(shuō)明浙薯13試管苗適合在較高濃度的蔗糖環(huán)境里生長(zhǎng)。

表1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA對(duì)浙薯13試管苗快繁的影響

表2 蔗糖濃度對(duì)浙薯13試管苗快繁的影響

2.3 生根培養(yǎng)基的選擇

試驗(yàn)結(jié)果表明，以1/2MS+NAA 0.02 g·L-1+0.3%AC培養(yǎng)基表現(xiàn)最佳，瓶?jī)?nèi)植株生長(zhǎng)快、長(zhǎng)勢(shì)旺、莖段生根早、發(fā)根多。

2.4 試管苗定植的成活率

將煉好的脫毒苗移到事先準(zhǔn)備好的防蟲(chóng)網(wǎng)里育苗。不管是直接移栽到整理好的苗床里，還是移栽到混合基質(zhì)，待完全成活后再移栽到苗床，2種移栽方法成活率都高達(dá)95%以上。

3 小結(jié)

經(jīng)過(guò)高溫催芽脫毒的浙薯13莖尖在MS+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1培養(yǎng)基上分化出芽，經(jīng)相同培養(yǎng)基繼代增殖培養(yǎng)和1/2MS+NAA 0.02 g·L-1+0.3%AC培養(yǎng)基上生根培養(yǎng)，可快速繁育出大量試管苗。

浙薯13試管苗在添加蔗糖15～75 g·L-1內(nèi)，蔗糖濃度越高，薯苗生長(zhǎng)越好，添加75 g·L-1蔗糖的處理生長(zhǎng)最好，說(shuō)明浙薯13試管苗適合在較高濃度的蔗糖環(huán)境里生長(zhǎng)。

試管苗可直接移到整理好的苗床里，也可先移到格盤(pán)里假植一段時(shí)間，待完全成活后再移栽到苗床里，2種移栽方法成活率都達(dá)95%以上。

［1］ 劉偉明，彥柏霖，趙益福，等.甘薯浙薯13特征特性觀察試驗(yàn)［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（2）：194.

［2］ 譚文澄.觀賞植物組織培養(yǎng)技術(shù)［M］.北京：中國(guó)林業(yè)出版社，1997：143.

［3］ 賴(lài)小芳，項(xiàng)玉英，王伯誠(chéng)，等.草莓紅頰的組培快繁與移栽技術(shù)［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（1）：23.

（責(zé)任編輯：張才德）

S 531

B

0528-9017（2014）06-0816-02

文獻(xiàn)著錄格式：賴(lài)小芳，唐興國(guó)，何玲玲，等.浙薯13脫毒快繁及移栽技術(shù)［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（6）：816-818.

2014-04-07

臺(tái)州市農(nóng)業(yè)科技重點(diǎn)項(xiàng)目（111KY17）

賴(lài)曉芳（1963-），浙江臨海人，高級(jí)農(nóng)藝師，本科，從事生物技術(shù)研究工作。E-mai1.1xf19633@sina.com。