史迅,崔正軍,肖京,王常印,朱磊,鄒仕波,韓兆峰,郭鵬飛
(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院燒傷與修復(fù)重建外科河南鄭州450052)
·基礎(chǔ)研究·
復(fù)方中藥軟膏在豬斷層皮創(chuàng)面愈合中的作用研究
史迅,崔正軍,肖京,王常印,朱磊,鄒仕波,韓兆峰,郭鵬飛
(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院燒傷與修復(fù)重建外科河南鄭州450052)
目的:研究復(fù)方中藥軟膏在豬斷層皮創(chuàng)面愈合中的作用。方法:制備豬斷層皮創(chuàng)面模型,創(chuàng)面深度至真皮深層,深度達真皮厚度約3/4。實驗分為復(fù)方中藥軟膏組(A組)、斯麗凱納米銀抗菌凝膠組(B組),空白對照組(C組),創(chuàng)面分別用復(fù)方中藥軟膏、斯麗凱納米銀抗菌凝膠、生理鹽水紗布覆蓋,創(chuàng)面定量涂抹上述藥物。每天一次觀察三組創(chuàng)面的愈合時間及不同時間點愈合情況。傷后每隔5天取上述三組創(chuàng)面組織,測定豬皮膚轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)含量、過氧化氫酶(SOD)、丙二醛(MDA),并取創(chuàng)面組織行HE染色,觀察表皮及真皮變化。結(jié)果:①動物實驗顯示,A組、B組、C組,愈合時間依次為(13.17±1.75)天、(18.42±1.93)天、(24.67±2.64)天,<0.05;②各組創(chuàng)面TGF-β含量的比較,在傷后第5天,A組(196.36±1.53)pg/ml、B組(160.52±1.43)pg/ml、C組(150.65±3.60)pg/ml,A組高于B組和C組,<0.05;傷后第9天比較,A組(183.39±1.73)pg/ml、B組(157.19±3.58)pg/ml、C組166.68±6.50,A組高于B組和C組,<0.05;其它時間點A組低于B組和C組;③各組創(chuàng)面中SOD含量的比較,傷后第5、第9、第14,A組高于B組和C組,<0.05;傷前一天和傷后第29天,>0.05;④各組創(chuàng)面中MDA含量的比較,在傷后第5至第24天,A組低于B組和C組,<0.05;傷前一天和傷后第29天,>0.05。結(jié)論:制備豬斷層皮缺損創(chuàng)面模型可靠穩(wěn)定復(fù)方中藥軟膏在豬斷層皮創(chuàng)面愈合過程中,可縮短創(chuàng)面愈合時間,提高創(chuàng)面愈合速率,升高創(chuàng)面組織中TGF-β含量,促進創(chuàng)面愈合復(fù)方中藥軟膏可提高創(chuàng)面組織中SOD含量,加強藥物抗氧化能力;降低創(chuàng)面組織中MDA含量,減輕細胞毒性損傷。可減輕皮膚損傷造成的局部或全身炎癥反應(yīng),發(fā)揮抗炎作用.復(fù)方中藥軟膏減少創(chuàng)面組織中滲出液,體現(xiàn)抗?jié)B出功能。
杜洛克豬;創(chuàng)面修復(fù);轉(zhuǎn)化生長因子β;過氧化氫酶;丙二醛
創(chuàng)面愈合是指外傷或其他疾病過程中,造成組織缺損后局部組織通過增生或再生方式進行修補的一系列復(fù)雜的病理生理過程[1]。斷層皮創(chuàng)面愈合模型是利用取皮刀或取皮鼓切取一定厚度的皮膚,形成創(chuàng)面供修復(fù)研究之用,與治療燒傷創(chuàng)面取皮的供皮區(qū)一致,其特點是創(chuàng)面大小與深度可以人為控制[2]。外用中藥對創(chuàng)面愈合的作用是多方面、多環(huán)節(jié)的,是一個復(fù)雜的過程。本文對復(fù)方中藥軟膏能否促進豬皮膚創(chuàng)傷創(chuàng)面的愈合進行了初步研究。
1.1.實驗用動物及試劑:實驗用4月齡美國杜洛克小型白豬,體重為30~35kg,8頭豬均健康,雌雄不限,由河南科技大學(xué)實驗動物中心提供。復(fù)方中藥軟膏由大黃50~200g,地榆50~200g,黃連50~200g,丹皮30~120g,五倍子50~200g,三七15~60g,赤石脂50~200g,爐甘石50~200g,乳香10~40g,沒藥10~40g,蜂蠟50~200g,冰片10~40g,麻油1000~4000g等組成,此配方由河南科技大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)與工程學(xué)院提供。斯麗凱納米銀抗菌凝膠(深圳市源興納米醫(yī)藥科技有限公司,生產(chǎn)批號:111104008)。SOD及MDA試劑盒由(南京建成生物工程研究所),豬轉(zhuǎn)化生長因子β測試盒(上??婆d商貿(mào)公司提供,源自美國R&D公司),氯胺酮注射液(福建古田藥業(yè)有限公司,規(guī)格0.1g,產(chǎn)品批號:110302)。
1.2 實驗用器材:WFJ7200型可見光分光光度計(上海尤尼柯儀器有限公司)。酶標儀(型號ELX800,美國伯騰儀器有限公司),數(shù)碼照相機(尼康S8200),取皮鼓(上海手術(shù)器械六廠),數(shù)顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司),旋渦振蕩器QL-901(海門市其林貝爾儀器制造有限公司),離心機Anke TGL-16C(上海安亭科學(xué)儀器廠),電子天平FA1004(上海良平儀器儀表有限公司),電熱恒溫培養(yǎng)箱(DHP-9082型,上海恒科學(xué)儀器有限公司)
2.1 創(chuàng)傷模型的制作:實驗前1天背部脊柱兩側(cè)備皮,實驗當天用氯胺酮注射液肌肉注射全身麻醉,劑量為10mg/kg,麻醉后用取皮鼓調(diào)整刻度后,在豬背部兩側(cè)切取實驗所設(shè)計大小及深度的皮膚,用游標卡尺再次測量所切掉皮膚深度平均為1.2mm,達部分真皮層。每個創(chuàng)面大小為6cm×10cm,每個創(chuàng)面間距為8cm(見圖1、2)。
2.2 致傷面積百分比和致傷深度:豬創(chuàng)傷面積/豬TBSA=S1/S。S1=360㎝2,S=KW2/3為動物總體表面積計算公式單位為㎝2,K為系數(shù)9.0,W為體重單位g。計算出創(chuàng)傷面積比S1/S=3.74%~4.14%。預(yù)實驗切取4月齡左右豬正常皮膚做病理切片,并在顯微鏡下測定表皮厚度在50~75μm,真皮厚度在1150~1350μm,表皮與真皮總厚度在1250~1480μm?,F(xiàn)調(diào)節(jié)取皮鼓刻度,使致傷深度達真皮厚度3/4,約1200μm。
2.3 實驗動物分組:每頭豬6個創(chuàng)面,2個創(chuàng)面為一組,隨機分三組,即復(fù)方中藥軟膏組(A組)、斯麗凱組(B組)及空白對照組(C組)。共8頭豬48個創(chuàng)面。創(chuàng)面制作完成后采用固定吊養(yǎng)。(見圖3、4)
2.4 創(chuàng)面用藥:創(chuàng)面模型制作后,每組創(chuàng)面各進行定量給藥,用藥量電子天平稱量后約為1.0g,均勻涂抹創(chuàng)面,每天換藥一次,空白對照組每天碘伏擦洗,并用無菌紗布覆蓋創(chuàng)面。
2.5 創(chuàng)面取材:每隔4天在每只豬固定創(chuàng)面用環(huán)鉆取1cm×1cm組織,取材后進行組織粉碎,然后測試組織中轉(zhuǎn)化生長因子β含量,SOD及MDA含量。創(chuàng)傷后每隔7天用環(huán)鉆取材,用10%甲醛進行固定。取材后區(qū)域不計入愈合率。
2.6 創(chuàng)面檢測指標
2.6.1 創(chuàng)面大體觀察:傷后每天對創(chuàng)面一般情況觀察,在創(chuàng)面完全上皮化時計算創(chuàng)面愈合時間。創(chuàng)面完全上皮化所需要的時間,而上皮化依靠的肉眼觀察確定[3]。
2.6.2 創(chuàng)面組織學(xué)觀察:切取組織用10%甲醛保存固定做HE染色,觀察表皮與真皮情況。
2.6.3 檢測各組創(chuàng)面皮膚組織中TGF-β含量、SOD含量、MDA含量:應(yīng)用化學(xué)比色法測定上述三種含量。TGF-β含量按測試盒說明書檢測,過程如下:標準品的稀釋→加樣→溫育→配液→洗滌→加酶→溫育→洗滌→顯色→終止→測定。SOD含量按南京建成測試盒說明書檢測,過程如下:樣本前處理→操作表操作→計算公式計算數(shù)值等。MDA含量按南京建成測試盒說明書檢測,過程如下:樣本前處理→操作表操作→組織中MDA含量計算公式計算數(shù)值等。
表1 各組創(chuàng)面愈合時間(±),天
表1 各組創(chuàng)面愈合時間(±),天
*表示中藥組與空白對照組比較<0.05,具有統(tǒng)計學(xué)意義;**表示中藥組比與斯麗凱組比較<0.05,具有統(tǒng)計學(xué)意義。
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表2 各組創(chuàng)面中TGF-β含量比較(pg/ml,±)
表2 各組創(chuàng)面中TGF-β含量比較(pg/ml,±)
*表示中藥組與空白組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義?!鞅硎局兴幗M與斯麗凱組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。**表示斯麗凱組與空白組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。
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3.1 一般狀況:整個實驗過程,實驗動物營養(yǎng)狀態(tài)良好,飲食睡眠均正常,未出現(xiàn)動物死亡現(xiàn)象。其中一頭豬出現(xiàn)輕度脫肛現(xiàn)象,經(jīng)處理后未再脫肛(圖1~4)。
3.2 斷層皮厚度測量:創(chuàng)面斷層皮厚度統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示為(1201.55±10.95)μm,斷層皮厚度測量見(圖24)。3.3豬皮膚創(chuàng)面鏡下HE染色觀察:復(fù)方中藥軟膏組(A組)、斯麗凱組(B組)、空白對照組(C),第5、第9、第14、第19、第24、第29天創(chuàng)面組織鏡下觀察(200×)。鏡下可見復(fù)方中藥組表皮結(jié)構(gòu)形成較斯麗凱及空白組快,膠原纖維排列緊密,結(jié)果見圖5~23。
3.4 各組創(chuàng)面愈合時間以及各組創(chuàng)面中TGF-β、SOD、MDA含量比較:見表1~4。從各組創(chuàng)面愈合時間顯示,中藥組所用時間為(13.17±1.75)天,空白組時間為(24.67±2.64)天見(表2),三組之間兩兩比較均為<0.05,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
表3 各組創(chuàng)面皮膚組織中SOD含量比較(U/mgprot,±)
表3 各組創(chuàng)面皮膚組織中SOD含量比較(U/mgprot,±)
*表示中藥組與空白組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義;**表示斯麗凱組與空白組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義;△表示中藥組與斯麗凱組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。
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表4 各組創(chuàng)面皮膚組織中MDA含量比較(nmol/mgprot,±)
表4 各組創(chuàng)面皮膚組織中MDA含量比較(nmol/mgprot,±)
*表示中藥組與空白組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義;**表示斯麗凱組與空白組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義;△表示中藥組與斯麗凱組比較<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。
本實驗研究復(fù)方中藥軟膏在豬皮膚缺損創(chuàng)面愈合的影響。觀察創(chuàng)面愈合時間及創(chuàng)面皮膚組織學(xué)HE染色,豬皮膚中轉(zhuǎn)化生長因子β含量的變化,藥物對愈合皮膚中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影響。
實驗過程中嚴格控制室溫,確保環(huán)境適宜,便于動物生長,防止動物中暑。每天打掃室內(nèi)衛(wèi)生,防止實驗創(chuàng)面感染,影響愈合。每日給實驗豬測量體溫,體溫過高應(yīng)用復(fù)方氨基比林。實驗豬采用固定吊養(yǎng),限制活動,避免擦傷創(chuàng)面影響愈合。同時便于觀察創(chuàng)面、照相、換藥、取材、測量體溫等。創(chuàng)面之間相隔間距約8㎝,防止藥物之間相互作用,否則容易造成數(shù)據(jù)混亂,測量不準確。
動物實驗分組解釋,中藥組、斯麗凱組及空白組分在同一個動物個體,用來觀察愈合時間,檢測創(chuàng)面組織中SOD、MDA、TGF-β等,目的將實驗誤差降到最小。
實驗?zāi)P椭苽?,用取皮鼓切取皮片后,再用游標卡尺測量皮片厚度,可精確取皮厚度,保證實驗?zāi)P涂煽俊?chuàng)傷模型創(chuàng)面深度選擇在平均1.2mm,預(yù)實驗切取4月齡左右正常皮膚做病理切片,并在顯微鏡下測定表皮厚度為50~75μm,真皮厚度為1150~1350μm,表皮與真皮總厚度1250~1480μm。用滾軸植皮刀在每頭豬背部兩側(cè)取皮制備8個6㎝ ×6㎝中厚斷層皮膚損傷創(chuàng)面,然后用游標卡尺和光學(xué)顯微鏡檢測切取片厚度,即創(chuàng)面的深度[4]。Meyer等測量發(fā)現(xiàn),豬皮膚表皮厚度為70~140μm,人類皮膚表皮厚度為50~120μm,兩種皮膚中表皮厚度很相似[5],但是豬在不同月齡及不同品種,皮膚表皮厚度差別不一樣。兩種皮膚非常相似,因此所選擇深度可達部分真皮層。
復(fù)方中藥軟膏由大黃、黃連、地榆、蜂蠟、冰片、赤石脂、爐甘石、丹皮、五倍子、三七、乳香、沒藥、麻油等組分組成。上述配方中大黃、地榆、五倍子、三七具有清熱解毒、涼血止血、收斂、生肌止痛的功效,具吸濕抗?jié)B出、減輕疼痛、防止傷口感染的作用。黃連有清熱、解毒、燥濕的功效,有較強的抗菌作用,能夠較為明顯地抑制綠膿桿菌和葡萄球菌的生長,加強抗感染作用。丹皮、乳香、沒藥具有活血,化疲止痛的作用。赤石脂、爐甘石、冰片清熱解毒,止痛,防腐止癢,收斂,可吸收創(chuàng)面的分泌物,保持創(chuàng)面的干燥,又有預(yù)防感染,促進傷口愈合的作用。蜂蠟、麻油可以減輕疼痛,保護傷口。上述原料藥相互組合、共同作用,對燒傷或瘡瘍具有很好的療效[6]。大體觀察各組創(chuàng)面過程中,中藥組創(chuàng)面滲出比斯麗凱組和空白組少,而空白組滲出最多。可能是藥物中赤石脂、爐甘石、冰片發(fā)揮較好作用。
實驗中斯麗凱納米銀凝膠,有效成分是納米銀。銀離子的殺菌機制不同于化學(xué)合成的抗菌劑,是通過重金屬離子對細菌蛋白質(zhì)的變性發(fā)生作用,因此具有廣譜殺菌及不易耐藥的特點,納米銀能使創(chuàng)面上皮再生的速度加快,從而促進創(chuàng)面愈合。實驗中發(fā)現(xiàn)斯麗凱組創(chuàng)面第一天有大量滲出液,以后觀察點未見大量滲出性液和膿性分泌物,創(chuàng)面周圍未見紅腫,創(chuàng)面始終保持干燥,促進上皮化速度明顯,促進表皮生長速度比空白組快,可見斯麗凱在治療創(chuàng)面具有較好的療效作用。
組織學(xué)觀察皮膚愈合過程中,中藥組表皮再生速率快于其它兩組,表皮中結(jié)構(gòu)層次分明??梢姳砥そY(jié)構(gòu)中角質(zhì)層、透明層、顆粒層、棘細胞層、基底層等。上皮細胞再生機理,首先是創(chuàng)面邊緣健存的基底細胞開始增生,并向中心部位移行。基底細胞的增殖刺激創(chuàng)面基底部毛細血管和結(jié)締組織的反應(yīng)性增生。當創(chuàng)面被新生的上皮細胞覆蓋后,創(chuàng)面外觀呈粉紅色?;准毎脑錾碳と庋拷M織的生長,同時巨噬細胞釋放的生長因子如PDGF,TGF-β和TGF-α等,加速肉芽組織的形成。隨著肉芽組織的不斷形成,缺失的創(chuàng)面組織被填充,上皮細胞便從創(chuàng)面邊緣向中心移動,最終使創(chuàng)面完全被再生的上皮細胞覆蓋。
TGF-β是一種多功能細胞因子,在創(chuàng)面修復(fù)中起著至關(guān)重要的作用,主要介導(dǎo)了細胞的遷徙、增殖、分化與凋亡,膠原、細胞外基質(zhì)的合成與降解,調(diào)節(jié)細胞與組織對損傷的反應(yīng)[8]。
在創(chuàng)傷愈合過程中,測得復(fù)方中藥軟膏組,TGF-β含量在傷后14天內(nèi)明顯高于其它兩組,14天以后斯麗凱組中TGF-β含量稍高于空白對照組。TGF-β促進創(chuàng)面愈合,主要是通過促進成纖維細胞趨化,產(chǎn)生膠原纖維和細胞外基質(zhì),還可減少膠原酶的合成,增加金屬蛋白酶抑制劑的產(chǎn)生,從而減少傷口中的酶解作用,促進傷口愈合。個人認為,實驗中豬皮膚組織中TGF-β升高因素,是由外用藥物干預(yù)直接促進升高,導(dǎo)致中藥組愈合速度高于其它兩組。
圖1創(chuàng)面6㎝×10㎝及間距8㎝;圖2創(chuàng)傷模型制作效果圖;圖3豬懸掛固定;圖4創(chuàng)面分A、B、C組;圖5正常皮膚(200×):表皮結(jié)構(gòu)清晰,真皮中膠原纖維粗大,排列有序較疏松;圖6第5天A組(200×):表皮結(jié)構(gòu)未完全形成,真皮組織有炎癥細胞浸潤;圖7第5天B組(200×):表皮結(jié)構(gòu)未完全形成,真皮組織有炎癥細胞浸潤;圖8第5天C組(200×):未見表皮結(jié)構(gòu),真皮組織纖維結(jié)構(gòu)不清晰,可見部分脂肪細胞;圖9第9天A組(200×):表皮結(jié)構(gòu)初步形成,真皮纖維組織排列緊密絮亂;圖10第9天B組(200×):未見表皮結(jié)構(gòu),肉芽組織結(jié)構(gòu)清晰可見,其中成纖維細胞、毛細血管及炎細胞明顯增多;圖11第9天C組(200×):未見表皮結(jié)構(gòu)形成,肉芽組織結(jié)構(gòu)清晰可見,其中成纖維細胞、毛細血管及炎細胞明顯增多;圖12第14天A組(200×):表皮結(jié)構(gòu)初步形成,真皮纖維組織排列緊密,乳頭層可見。
MDA是體內(nèi)自由基作用于生物膜多價不飽和脂肪酸,發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)生成的終產(chǎn)物,具有細胞毒性。測定MDA的量可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度,間接反映出細胞損傷的程度。已普遍用作檢測機體組織中自由基水平的指標。SOD是人體防御內(nèi)外環(huán)境中活性氧損傷的重要酶,與過氧化氫酶或谷胱甘肽過氧化氫酶共同組成體內(nèi)有效清除活性氧的重要體系。創(chuàng)面局部藥物,傷后檢測藥物對皮膚組織中SOD及MDA含量影響,目前國內(nèi)外較少研究。外用藥物對創(chuàng)傷創(chuàng)面的愈合效果,藥物的抗氧化能力主要是靠組織創(chuàng)面中SOD含量的高低來衡量。在蘆薈汁對燙傷大鼠皮膚的愈合及SOD、MDA及GSH-PX的影響中,發(fā)現(xiàn)蘆薈汁組中SOD含量越高及MDA含量越低,創(chuàng)面愈合越快,證實了蘆薈的抗氧化功能,通過清除自由基,保護細胞免受損害,從而有利于提高機體的解毒功能[9]。本實驗也證實復(fù)方中藥軟膏組組織中SOD含量高于其它兩組,MDA含量則低于其它兩組,說明藥物的抗氧化能力越強,創(chuàng)面愈合越快。復(fù)方中藥軟膏組創(chuàng)面完全上皮化時間快于其它兩組。由此可見MDA含量的多少反映了局部脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的強弱,而SOD含量的增高是對清除吞噬細胞生成超氧陰離子,減輕炎癥反應(yīng)對組織的損害是有益處的[10],這可能是高濃度SOD和低濃度MDA是加速創(chuàng)面愈合的原因之一。
由此可見,復(fù)方中藥軟膏在治療創(chuàng)傷創(chuàng)面研究中有較高的臨床應(yīng)用價值,包括促進創(chuàng)面快速愈合,以及較強的抗菌、抗氧化、抗?jié)B出作用。
圖13第14天B組(200×):未見表皮結(jié)構(gòu)形成,真皮纖維組織排列緊密;圖14第14天C組(200×):未見表皮結(jié)構(gòu)形成,真皮纖維組織排列緊密錯亂及有炎細胞浸潤;圖15第19天A組(200×):表皮結(jié)構(gòu)清晰,真皮纖維束排列緊密;圖16第19天B組(200×):表皮結(jié)構(gòu)欠清晰,真皮纖維束排列緊密;圖17第19天C組(200×):表皮未見形成,真皮纖維束排列緊密錯亂;圖18第24天A組(200×):表皮結(jié)構(gòu)清晰,真皮纖維束排列緊密,可見腺體分布;圖19第24天B組(200×):表皮結(jié)構(gòu)清晰,真皮纖維束緊密排列且方向不一,毛細血管分布減少;圖20第24天C組(200×):表皮結(jié)構(gòu)清晰,真皮纖維束緊密排列,可見部分粗大膠原纖維束排列方向和表皮不一致;圖21第29天A組(200×):表皮結(jié)構(gòu)清晰,真皮纖維束緊密排列,走行方向不一;圖22第29天B組(200×):表皮結(jié)構(gòu)清晰,真皮乳頭層纖維束緊密排列,網(wǎng)狀層纖維束粗大排列疏松。走行方向不一;圖23第29天C組(200×):表皮結(jié)構(gòu)異常增厚;圖24斷層皮皮膚厚度約1200μm(200×)。
[1]盛志勇,郭振榮.燒傷學(xué)臨床新視野[M].北京:清華大學(xué)出版社,2005:227.
[2]付小兵,孫同柱,盛志勇.幾種用于創(chuàng)傷修復(fù)研究的動物模型[J].中華實驗外科雜志,1999,5(16):479-480.
[3]黃康,陳玉林.創(chuàng)面愈合評價指標進展[J].中國修復(fù)重建外科雜志,2001,15(2):126-129.
[4]吳志谷,付小兵.rhEGF對豬斷層皮膚創(chuàng)面表皮和真皮修復(fù)的影響[J].北京軍區(qū)醫(yī)藥,2000,12(6):401-403.
[5]Meyer W,Schwarz R,Neurand K.The skin of domestic mammals as a model for the human skin,w ith special reference to the domestic pig[J].Current Problems in Dermatology,1978,7:39-52.
[6]雷萬軍,李軍,宗小郁,等.用于治療燒傷或瘡瘍的中藥軟膏及其制備方法[P].中華人民共和國國家知識產(chǎn)權(quán)局,2011年12月7日,專利號ZL200910227272.4.
[7]Gunasekaran T,Nigusse T,Dhanaraju MD.Silver nanoparticles as real topical bullets for Wound healing[J].J Am College CertifiedWound Specialists,2011,3(4):82-96.
[8]王琪,付晉鳳.轉(zhuǎn)化生長因子β在創(chuàng)面修復(fù)中的研究進展[J].中華損傷與修復(fù)雜志,2011,6(5):821-825.
[9]葉俊毅,朱佳榮.蘆薈汁對燙傷大鼠皮膚的愈合及SOD、MDA及GSH-PX的影響[J].中國醫(yī)師雜志,2010,12(4): 459-461.
[10]徐仁寶.體內(nèi)抗炎機制及其意義[J].生理科學(xué)進展,1994, (4):305-308.
The exp e rim en ta l stud ies on the e ffec t abou t Com p ound Chinese m ed ic ine o in tm en t on po rc ine sp lit-thickness skin w ound's hea ling
SHIXun,CUIZheng-jun,XIAO Jing,WANG Chang-yin,ZHU Lei,ZOU Shi-bo,HAN Zhao-feng, GUO Peng-fei
(Departmentof Burn and Repair reconstruction surgery,the First Affiliated Hosp italof Zhengzhou University,Zhengzhou 450052,Henan,China)
Ob jec tive To study the effec t of com pound traditional Chinese medicine ointm ent in porcine sp lit-thickness skin wound healing.M ethods Prepared the porcine sp lit-thickness skin wound model,and the dep th of the wound is to the deep derm is,a dep th of about 3/4 of the dermal thickness.The experiments were separated into compound trad itional Chinese med icine ointment group(g roup A),Silikainanometer silver antibacterial gel group(group B),b lank control group(group C),treated respec tively w ith compound Chinese m ed icine ointm ent,Silikai nanometer silver antibac terial gel,normal saline gauze,and quantitative g reased.Everyday observe the wound healing tim e and the healing deg ree on different time of the three groups.Every 5 days after injury obtained the wound tissue of three g roups,and tested the porcine skin transform ing grow th factor beta(TGF-β)content,catalase(SOD),malondialdehyde(MDA).The samp les were stained by HE,observed the change of epidermal and derm al.Resu lts①In the animal experiments,the healing tim e of A g roup, B g roup and C group,were respec tively 13.17±1.75d,18.42±1.93d,24.67±2.64d,<0.05.②In comparison of TGF-βcontent on 5-day after injury,group A was 196.36±1.53pg/m l,160.52± 1.43pg/m l in B group,and 150.65±3.60pg/m l in C g roup.A group was higher than B g roup and C group,<0.05.On 9-day after injury,A group was 183.39±1.73pg/m l,157.19±3.58pg/m l in B group,166.68±6.50 pg/m l in C g roup.A g roup was higher than B g roup and C group,<0.05.On other tim e points A g roup was lower than B group and C group.③In com parison of SOD content in each group on 5-days,9-day,14-day after injury,A group was higher than B group and C g roup,< 0.05.But on 1day before injury and 29-day after injury,>0.05.④In com parison of MDA content in each g roup on 5-day to 24-day after injury,the A group was lower than that of B group and C g roup,<0.05.But on 1day before injury and 29-day after injury,>0.05.Conclusions Preparation of porcine sp lit-thickness skin wound model is reliab le and stab le.Compound traditional Chinese medicine ointm ent in porcine sp lit-thickness skin wound healing p rocess,can shorten the wound healing time,raise the rate ofwound healing,and increased the content of TGF-βin wound tissues, p romote wound healing.Compound traditional Chinese medicine ointm ent can imp rove the SOD content in the wound tissue,enhance antioxidant capacity of d rug;reduce the content of MDA in the wound tissue,reduce the cell toxicity.Local or system ic inflammatory response caused by reducing skin damage,anti-inflamm atory ac tion.4 Compound traditional Chinese med icine ointm ent reduce exudate in wound tissues,embody the exudation function.
Duroc pig;wound repair;TGF-β;catalase;MDA
R622
A
1008-6455(2014)22-1890-06
2014-09-16
2014-10-30編輯/張惠娟
河南省社會發(fā)展攻關(guān)項目(122101310200)
崔正軍,醫(yī)學(xué)博士,主任醫(yī)師、教授、博士研究生導(dǎo)師,燒傷與修復(fù)重建外科主任