王京霞 蔣劍平 陳 琳 許家鸞 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥劑科 杭州 310006

小兒清熱栓是在我院兒科“清熱開塞露”的基礎(chǔ)上研制而成，為理想的小兒清熱灌腸劑，但使用中易出現(xiàn)滲漏現(xiàn)象，造成藥液浪費(fèi)及劑量不準(zhǔn)確等不足。我們在前期研究基礎(chǔ)上，將灌腸劑改為純中藥栓劑，采用內(nèi)毒素致家兔發(fā)熱經(jīng)典動物模型觀察小兒清熱栓對兔的退熱作用，為該新制劑的進(jìn)一步開發(fā)及應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動 物 健康雄性新西蘭白兔，體質(zhì)量2.0～2.5kg，兔齡 80～100 天，基礎(chǔ)直腸體溫 38.5～39.5℃，由浙江省上虞市星火兔業(yè)養(yǎng)殖場提供 [生產(chǎn)許可證：SCXK（浙）2008-0036]。

1.2 藥 物 大腸桿菌內(nèi)毒素（endotoxin，ET，中國食品藥品檢定研究院，批號150601-201069，120EU/ml）；小兒清熱栓（1.7g/粒，含生藥7.5g/粒；批號20100318）；對乙酰氨基酚栓劑（paracetamol suppositories，廣州敬修堂藥業(yè)有限公司，批號T10041）；PEG600 空白對照栓（1.7g/粒，批號 100410）。小兒清熱栓、PEG600空白對照栓均由浙江省中醫(yī)院制劑中心提供。0.9%NaCl注射液（杭州民生藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號11003011）。

1.3 儀 器 ZRY-2D智能熱原儀（重慶友朋科技有限公司）；FA-1104電子分析天平（上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司）；JJ200/d=0.01g電子天平（常熟市雙杰測試儀器廠）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 分組、造模及給藥 篩選后對符合實(shí)驗(yàn)要求的70只健康新西蘭白兔隨機(jī)分七組，每組10只。模型組（ET）予ET0.5μg/（mL·kg）耳緣靜脈注射；正常組（NS）：予NS0.5mL/kg耳緣靜脈注射；清熱栓組（QRS）予小兒清熱栓1粒直腸給藥；對乙酰氨基酚栓組（PS）予對乙酰氨基酚栓1粒直腸給藥；ET+清熱栓組（ET+QRS）予小兒清熱栓1粒直腸給藥，0.5h后經(jīng)耳緣靜脈注射ET，劑量同ET組；ET+對乙酰氨基酚栓組（ET+PS）：對乙酰氨基酚栓1粒直腸給藥，0.5h后經(jīng)耳緣靜脈注射ET，劑量同ET組；ET+PEG600賦形劑組（ET+PEG）：PEG600空白對照栓1粒直腸給藥，0.5h后經(jīng)耳緣靜脈注射ET劑量同ET組。

2.2 體溫測量[1-2]實(shí)驗(yàn)前將兔置于實(shí)驗(yàn)環(huán)境中模擬實(shí)驗(yàn)操作以適應(yīng)實(shí)驗(yàn)條件2天，每天3～4h，第3天開始實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室溫度22～25℃，相對濕度40%～60%。數(shù)字測溫計(jì)記錄直腸溫度，所有探頭均經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)校正。測溫時(shí)將家兔置于特制兔架上，探頭涂以石蠟油，插入肛門內(nèi)7～10 cm并用小夾固定于兔尾根部，待體溫穩(wěn)定后每10min記錄直腸溫度1次，取3次平均值作為基礎(chǔ)體溫，實(shí)驗(yàn)中每10min記錄溫度1次，連續(xù)測定6h。

2.3 觀察指標(biāo) 平均體溫變化曲線；最大體溫上升高度（ΔT/℃）；體溫反應(yīng)指數(shù)（thermal response index，TRI）：參照Milton[3]等的方法計(jì)算，橫坐標(biāo)1cm代表1h，縱坐標(biāo)2cm代表1℃，曲線下面積除以2即得。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s） 表示，用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件數(shù)據(jù)對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行F檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。陽性藥對乙酰氨基酚栓相比，對降低發(fā)熱家兔體溫曲線的高度無明顯差異（P＞0.05），兩者ΔT和TRI相比也無明顯差異（P＞0.05），見表 1、圖1。

表1 小兒清熱栓對ET性發(fā)熱兔體溫的影響（x±s）

圖1 小兒清熱栓對兔ET性發(fā)熱效應(yīng)的影響

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

ET組注射ET后體溫明顯升高，并出現(xiàn)雙峰，平均體溫變化曲線明顯高于ET+PS組和ET+QRS組，ET組ΔT和TRI6均高于ET+PS組和ET+QRS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。ET+PS組ΔT和TRI6與ET+QRS組相比無顯著差異（P＞0.05）；小兒清熱栓和

4 討 論

發(fā)熱為兒科臨床常見病癥之一,朱丹溪曰：“凡小兒有病皆熱”[4]。中醫(yī)治療發(fā)熱有獨(dú)到優(yōu)勢，但中藥多味苦，服用后常致嘔吐，往往難以準(zhǔn)劑量給藥，加之口服藥生物利用度低、起效慢。而栓劑給藥可避免肝臟首過作用[5]，加快和延長藥物的釋放和吸收，提高藥物生物利用度，是目前小兒理想的藥物劑型之一。

毒素是重要的致熱物質(zhì)，當(dāng)它進(jìn)入機(jī)體后，引起體溫調(diào)節(jié)中樞環(huán)核苷酸系統(tǒng)改變，前列腺素合成增加，體溫調(diào)定點(diǎn)上移，散熱減少，引起發(fā)熱。清熱解毒劑對內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱有明顯的解熱作用[6]，本組結(jié)果顯示，采用靜脈注射細(xì)菌內(nèi)毒素誘發(fā)家兔發(fā)熱模型，模型穩(wěn)定，重復(fù)性好，發(fā)熱反應(yīng)均一，可量化，小兒清熱栓退熱效果良好。

［1］程國尊.小兒發(fā)熱及體溫測量的研究進(jìn)展［J］.實(shí)用兒科臨床雜志，1995，10（2）：114-115.

［2］劉智勤，蔣玉鳳，岳曉莉，等.腦熱清對內(nèi)毒素性發(fā)熱家兔下丘腦、腦脊液cAMP及腹中隔區(qū)AVP含量的影響［J］.中國病理生理雜志，2003，19（11）：1504-1507.

［3］ Milton AS，Sabine Wendlan.Effect on body temperature of prostaglandins of the AE and Feries on injection into the third ventricle unanaesthetized cats and rabbits［J］.J physiol，1971，218：325-336.

［4］向群華.中醫(yī)治療小兒發(fā)熱的臨床體會［J］.現(xiàn)代診斷與治療，2012，23（10）：1652-1653.

［5］劉淑華，劉大有，周鴻立，等.栓劑的研究進(jìn)展［J］.長春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，21（3）：63-64.

［6］彭百承，李萍，甄丹丹.清熱解毒劑對內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱的影響［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16（15）：166-167.