張學(xué)鋒 汪建中
1 大連市第三人民醫(yī)院口腔科,遼寧 大連 116000;2 江西省人民醫(yī)院口腔科,江西 南昌 330006
·基礎(chǔ)研究 Basic Research·
偏側(cè)咀嚼對(duì)大鼠咬肌PGE2影響的研究
張學(xué)鋒1汪建中2▲
1 大連市第三人民醫(yī)院口腔科,遼寧 大連 116000;2 江西省人民醫(yī)院口腔科,江西 南昌 330006
目的研究偏側(cè)咀嚼對(duì)咬肌PGE2水平的影響。方法將48只SD大鼠,隨機(jī)分為4個(gè)實(shí)驗(yàn)組和相應(yīng)的對(duì)照組,每組各6只。實(shí)驗(yàn)組大鼠拔除左側(cè)上下頜磨牙,并分別處死于拔牙后3天、2周、4周和12周。各組大鼠雙側(cè)咬肌PGE2含量采用放射免疫技術(shù)檢測(cè)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)和非拔牙側(cè)咬肌PGE2含量與對(duì)照組對(duì)應(yīng)側(cè)比較有明顯增加(P<0.01),其中以4周組增高最明顯。除3天組外,拔牙側(cè)咬肌PGE2含量明顯高于非拔牙側(cè)(P<0.01)。結(jié)論P(yáng)GE2參與咬肌損傷過(guò)程,且在偏側(cè)咀嚼不同時(shí)間里,對(duì)雙側(cè)咬肌損傷程度不同。
咬肌;偏側(cè)咀嚼;PGE2;放射免疫測(cè)定
偏側(cè)咀嚼是一種常見(jiàn)的口腔不良習(xí)慣,可造成咀嚼肌結(jié)構(gòu)和功能的紊亂,甚至肌肉組織的不可逆損傷。PGE2不僅源于肌肉的損傷,而且又可造成肌肉的繼發(fā)性炎癥和疼痛。本研究采用放射免疫分析法測(cè)定咬肌PGE2的含量,探討咬肌對(duì)偏側(cè)咀嚼不同時(shí)期的反應(yīng)特點(diǎn)。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
選用48只SD大鼠,普通級(jí),雌雄各半,8周齡,體重200~280 g,由南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)部提供。參照隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為8組,每組6只,各實(shí)驗(yàn)組大鼠拔除左側(cè)上下頜磨牙,實(shí)驗(yàn)組與相應(yīng)對(duì)照組同期用脊髓拉斷法處死。處死時(shí)間分別是拔牙后3天、2周、4周和12周,從而建立偏側(cè)咀嚼動(dòng)物模型。
1.2 標(biāo)本的提取及制備
從大鼠雙側(cè)淺咬肌的中部各取一塊約大米粒大小肌肉組織,生理鹽水沖洗干凈,吸干,稱(chēng)重,勻漿,加入1 ml生理鹽水,震蕩混勻15秒。置于37℃恒溫箱,保溫15分鐘,4℃離心30分鐘(3 000 r/min),吸取上清液置于EP管中,密封放于-20℃冰箱保存,待用放射免疫法檢測(cè)。
1.3 PGE2含量的放射免疫檢測(cè)
標(biāo)本常溫下解凍,震蕩混勻,室溫靜置15分鐘后,4℃離心30分鐘(3 000 r/min),結(jié)果可直接從GC-1200 γ-放射免疫計(jì)數(shù)器讀出(單位:pg/ml)。根據(jù)樣本重量計(jì)算出樣本中PGE2的含量(單位:pg/mg)。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
用SPSS19.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。每組內(nèi)左右側(cè)對(duì)比采用配對(duì)t檢驗(yàn),各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組同側(cè)對(duì)比采用兩樣本t檢驗(yàn),各實(shí)驗(yàn)組同側(cè)不同時(shí)間比較采用單因素方差分析,組間比較用LSD法。
除拔牙后3天組外,其他組拔牙側(cè)與非拔牙側(cè)PGE2含量比較有顯著性差異(P<0.01),表現(xiàn)為拔牙側(cè)較非拔牙側(cè)更高(見(jiàn)表1)。實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)和非拔牙側(cè)咬肌PGE2含量與對(duì)照組對(duì)應(yīng)側(cè)相比較,均有顯著性差異(P<0.01),且各實(shí)驗(yàn)組兩兩比較也有顯著性差異(P <0.01)。
顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病是口腔頜面部常見(jiàn)的疾病之一,病因尚不明確,研究表明偏側(cè)咀嚼與其發(fā)病有一定相關(guān)性。長(zhǎng)期偏側(cè)咀嚼會(huì)對(duì)口頜系統(tǒng),主要是顳下頜關(guān)節(jié)和咀嚼肌的組織結(jié)構(gòu)造成不同程度的影響[1-2]。
本實(shí)驗(yàn)建立偏側(cè)咀嚼動(dòng)物模型,選擇PGE2作為檢測(cè)指標(biāo)。PGE2生物活性很強(qiáng),炎癥的全過(guò)程中都存在著PGE2的合成與釋放。實(shí)驗(yàn)組兩側(cè)咬肌PGE2含量在拔牙后3天,較對(duì)照組有所增高,分析原因可能是拔牙創(chuàng)傷導(dǎo)致PGE2的代謝平衡被打破,合成多于分解,進(jìn)而引發(fā)疼痛[3]。
咬肌雙側(cè)PGE2含量在拔牙后3天~12周的實(shí)驗(yàn)周期內(nèi),前期明顯增加,后期逐漸降低,在4周時(shí)達(dá)到峰值。前期增加可能是咬肌損傷嚴(yán)重,功能失調(diào)所致,說(shuō)明PGE2的含量與組織損傷的程度及炎癥的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸有關(guān)。后期降低與咬肌適應(yīng)性反應(yīng)增強(qiáng)有關(guān),即偏側(cè)咀嚼后,咀嚼肌功能改變使其產(chǎn)生形態(tài)學(xué)和生理學(xué)的適應(yīng)性變化[4]。
表1 實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)與非拔牙側(cè)咬肌PGE2含量比較(±s) 單位:pg/mg
表1 實(shí)驗(yàn)組拔牙側(cè)與非拔牙側(cè)咬肌PGE2含量比較(±s) 單位:pg/mg
注:n=12 P<0.01:顯著性差異,P>0.05:無(wú)顯著性差異
組別 非拔牙側(cè) 拔牙側(cè) P值對(duì)照組 4 1 . 6 0 ± 1 . 3 7 4 1 . 6 8 ± 1 . 4 6 0 . 9 1 0 3天組 5 6 . 8 3 ± 1 . 1 2 5 6 . 8 4 ± 1 . 5 5 0 . 9 5 8 2周組 4 5 . 9 6 ± 0 . 7 9 4 9 . 0 1 ± 1 . 1 3 0 . 0 0 2 4周組 8 4 . 0 9 ± 1 . 0 0 9 2 . 1 8 ± 1 . 1 1 0 . 0 0 0 1 2周組 7 8 . 9 3 ± 1 . 3 8 8 5 . 0 9 ± 1 . 3 5 0 . 0 0 0
除拔牙后3天組外,其他各組拔牙側(cè)咬肌PGE2含量均較非拔牙側(cè)高,說(shuō)明拔牙側(cè)咬肌損傷程度更為嚴(yán)重,與大部分學(xué)者結(jié)論一致,認(rèn)為對(duì)拔牙側(cè)的影響更大[5-7]。這也可以一定程度上解釋臨床上顳下頜關(guān)節(jié)紊亂、咀嚼肌疼痛癥狀多發(fā)于非咀嚼側(cè)。另外,咬肌PGE2含量隨偏側(cè)咀嚼時(shí)間發(fā)生變化,先增后減,同時(shí)與咬肌的損傷程度存在相關(guān)性。偏側(cè)咀嚼后咀嚼肌肌力減少,長(zhǎng)期偏側(cè)咀嚼可對(duì)咀嚼肌產(chǎn)生不可逆的損傷,為了避免損傷加重,應(yīng)及早糾正偏側(cè)咀嚼,及時(shí)修復(fù)缺失牙齒。因此,早發(fā)現(xiàn)、早糾正偏側(cè)咀嚼習(xí)慣,對(duì)于防治顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病有著積極的意義,應(yīng)引起口腔醫(yī)師及患者的足夠重視。
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Study on the Influence of Unilateral Chewing on PGE2in Rat Masseter Muscle
ZHANG Xuefeng1WANG Jianzhong2▲, 1 Department of Stomatology, the Third People’s Hospital of Dalian, Dalian Liaoning 116000, China, 2 Department of Stomatology, the Jiangxi Provincial People’s Hospital, Nanchang Jiangxi 330006, China
ObjectiveTo study the effect of unilateral chewing on the content of PGE2in masseter muscle.MethodsThe 48 Sprague-Dawley rats were randomly divided into eight groups, including 4 experimental groups and 4 control groups, 6 rats in each group. The rats in the experimental groups were killed after extracting the left maxillary and mandibular posterior teeth three days, two weeks, four weeks and twelve weeks. The content of PGE2in bilateral of masseter muscles was detected by radioimmunoassay.ResultsThe content of PGE2in bilateral of masseter muscles in every experimental group is obviously higher than that in control group (P<0.01), especially in postextracting four weeks. Compared to the extracting side masseter muscle, the content of PGE2in the extracting side is higher except postextracting three days(P<0.01).Conclusions The PGE2might participate in mechanism of masseter muscles disorders. The degree of injury is different between extracting side and nonextracting side under the condition of unilateral chewing in the different time.
Masseter muscle, Unilateral chewing, Prostaglandin E2, Radioimmunoassay
R782.6
B
1674-9308(2014)08-0036-03
10.3969/J.ISSN. 1674-9308.2014.08.020
▲通訊作者:汪建中,E-mail: wang1104@126.com