張 鵬，趙 鑫，范國(guó)榮， (.安徽中醫(yī)學(xué)院，安徽 合肥 30000；.第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院藥物分析教研室，上海市藥物(中藥)代謝產(chǎn)物研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 00433)

乳癖消是由鹿角、蒲公英、昆布、天花粉、雞血藤、三七、赤芍、海藻、漏蘆、木香、玄參、牡丹皮、夏枯草、連翹和紅花等十五味中藥組成，具有軟堅(jiān)散結(jié)，活血消痛，清熱解毒的功效[1]。主要用于痰熱互結(jié)所致的乳癖、乳癰、乳房結(jié)節(jié)(數(shù)目不等、大小形態(tài)不一、質(zhì)地柔軟)，或產(chǎn)后乳房結(jié)塊(紅熱疼痛)、乳腺增生、乳腺炎等患者。原方多采用湯劑服用，患者依從性差。本文對(duì)近年用乳癖消開(kāi)發(fā)出的現(xiàn)代劑型及其質(zhì)量控制技術(shù)進(jìn)行綜述，為乳癖消進(jìn)一步開(kāi)發(fā)研究提供參考。

1 乳癖消片劑

片劑系指提取物、提取物加飲片細(xì)粉，或飲片細(xì)粉與適宜輔料混勻壓制的制劑，抑或用其他適宜方法制成的圓片狀或異形片狀的固體制劑[2]。乳癖消片劑是目前市場(chǎng)上銷(xiāo)售的主要?jiǎng)┬停浏熜Х€(wěn)定，服用方便，經(jīng)濟(jì)效益好。文獻(xiàn)報(bào)道乳癖消片質(zhì)量研究多采用高效液相色譜法，薄層掃描法，碘量法等方法對(duì)乳癖消片劑中的丹皮酚、芍藥苷、人參皂苷Rg1和碘等進(jìn)行測(cè)定，以檢測(cè)乳癖消片的組成及質(zhì)量。

許亞玲等[3]采用高效液相色譜法，對(duì)全國(guó)31省、市、自治區(qū)的96批不同劑型的乳癖消樣品進(jìn)行分析，以Waters C18柱為分析柱，乙腈-1%乙酸為流動(dòng)相(33:67)，流速0.8 ml/min，274 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。結(jié)果表明，丹皮酚在0.008 528～0.076 752 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為102.2 %，RSD=1.63%。各批次間丹皮酚含量較低且差異較大，丹皮酚在膠囊劑中含量較高，在薄膜衣片中的含量大于糖衣片中的含量。表明不同劑型因?yàn)樯a(chǎn)工藝不同，對(duì)有效成分的含量影響較大。在測(cè)定丹皮酚的同時(shí)，還對(duì)96批乳癖消樣品中是否非法摻入甾體激素類(lèi)藥物進(jìn)行了檢測(cè)，以Diomaond C18柱為分析柱，乙腈-水為流動(dòng)相(24:76)，醋酸潑尼松，醋酸可的松，醋酸地塞米松為對(duì)照品，在254 nm波長(zhǎng)下進(jìn)行測(cè)定。96批樣品中未發(fā)現(xiàn)甾體激素類(lèi)藥物。該方法采用PDA檢測(cè)器進(jìn)行定性鑒別，專(zhuān)屬性強(qiáng)，操作方便，對(duì)檢測(cè)中藥劑型中是否摻雜了化學(xué)類(lèi)藥物提供了參考[4]。

孫金元[5]采用高效液相色譜法，以 Zorbax eclipse XDB C18柱為分析柱，甲醇-水為流動(dòng)相(42:58)，甲醇為提取溶劑，對(duì)3批乳癖消樣品中的丹皮酚進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得平均加樣回收率為96.4 %，RSD=1.8 %。測(cè)得三批樣品中丹皮酚的含量均大于0.14 mg/g，符合中國(guó)藥典的相關(guān)規(guī)定，但并未進(jìn)一步指出影響含量差異的因素。姜云云等[6]采用高效液相色譜法測(cè)定乳癖消片中的芍藥苷的含量，以Diamonsil C18柱為分析柱，乙腈-水為流動(dòng)相(20:80)，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，N2000工作站進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果表明芍藥苷在4.0～16 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均加樣回收率為99.75 %，RSD=1.07%。不同批次樣品中每片芍藥苷的平均含量大于0.38 mg，芍藥苷出峰時(shí)間小于10 min，方法簡(jiǎn)便、可靠。徐國(guó)兵等[7]采用RP-HPLC測(cè)定三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量，以Kromasil C18柱為分析柱，乙腈-0.05 %磷酸溶液為流動(dòng)相(20:80)，檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm。5批樣品中每片三七皂苷R1平均含量均大于0.24 mg，每片人參皂苷Rg1平均含量均大于1.38 mg。與常規(guī)薄層掃描法相比，該方法樣品處理簡(jiǎn)單，樣品出峰時(shí)間短，重復(fù)性好，更適合用于乳癖消片的質(zhì)量控制指標(biāo)。

劉汶[8]采用高效液相色譜法對(duì)乳癖消片中的芍藥苷含量測(cè)定則以CapcellPak柱為分析柱，乙腈-水為流動(dòng)相(18:82)，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，樣品采用50 %甲醇超聲30 min，過(guò)濾后直接進(jìn)樣分析。甲醇提取后樣品中干擾峰較少，流動(dòng)相比例調(diào)整后與中國(guó)藥典中提供的鹽溶液相比更加簡(jiǎn)便，對(duì)色譜柱損害小，延長(zhǎng)了使用壽命。李洪書(shū)等[9]采用高效液相色譜法，以AgilentEclipse XDB-C18柱為分析柱，乙腈-0.05 %磷酸溶液為流動(dòng)相(20:80)，在203 nm波長(zhǎng)下測(cè)定乳癖消片中三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量。樣品前處理簡(jiǎn)單，僅以水為提取溶劑，微波回流提取后離心取上清液，經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后直接進(jìn)樣分析。該方法具有節(jié)省溶劑、成本低、效率高、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。

傅海珍等[10]采用薄層掃描法測(cè)定3批乳癖消片中人參皂苷Rg1的含量。樣品經(jīng)萃取，顯色后在525 nm、700 nm波長(zhǎng)下進(jìn)行反射鋸齒掃描。測(cè)得每片人參皂苷Rg1的平均含量大于0.79 mg，但是發(fā)現(xiàn)不同廠家的樣品中人參皂苷Rg1含量差異較大，考慮藥材質(zhì)量是影響有效成分的主要因素之一。張振秋等[11]采用薄層掃描法，測(cè)定了6批乳癖消片中人參皂苷Rg1的含量。6批乳癖消中人參皂苷Rg1平均含量均大于5.53 mg/g。曹愛(ài)民等[12]采用薄層掃描法對(duì)3批乳癖消片中人參皂苷Rg1含量進(jìn)行測(cè)定。樣品處理較復(fù)雜，索式提取后進(jìn)行萃取，顯色，在525 nm、700 nm波長(zhǎng)下測(cè)定。樣品中每片人參皂苷的平均含量大于0.56 mg。雖然萃取法去除了干擾組分，使得顯色斑點(diǎn)圓整，測(cè)得結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，但是與高效液相色譜法相比，其耗時(shí)長(zhǎng)，溶劑消耗大，對(duì)環(huán)境友好程度低。隨著高效液相色譜法的普及，薄層掃描法將被高效液相色譜法所取代，薄層掃描法更多的將用于化學(xué)成分的定性鑒別。

陳寧寧等[13]采用碘量法測(cè)定乳癖消片中活性成分碘，測(cè)定方法中以組方中用量大的海藻和昆布的總碘為定量分析對(duì)象，樣品經(jīng)灰化，顯色后，用0.01 mol/L硫代硫酸鈉液滴定，淀粉為指示劑。測(cè)得5批乳癖消片中每片總碘量在0.197 6 ～0.384 1 mg。該方法切入點(diǎn)獨(dú)特，海藻、昆布用量大且為治療乳房疾病的常用藥物，此法為控制乳癖消中的質(zhì)量提供了新的參考指標(biāo)。

2 乳癖消顆粒劑

顆粒劑系指以提取物與適宜的輔料或飲片細(xì)粉制成具有一定粒度的顆粒狀制劑?？煞譃榭扇茴w粒、混懸顆粒、泡騰顆粒[14]。乳癖消顆粒劑的質(zhì)量控制多采用高效液相色譜法，以芍藥苷、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、連翹苷、哈巴俄苷、人參皂苷Rb1、去氫木香內(nèi)酯等為含量測(cè)定對(duì)象，反映乳癖消顆粒劑的質(zhì)量。

姜文紅等[15]采用高效液相色譜法測(cè)定乳癖消顆粒中的人參皂苷Rg1，以Diamonsil C18柱為分析柱，乙腈(A)-水(B)進(jìn)行線性梯度洗脫(0～35 min，A：19%～100%，B：81%～0%)，結(jié)合DAD檢測(cè)器掃描分析，確定在203 nm波長(zhǎng)下進(jìn)行測(cè)定。樣品經(jīng)甲醇超聲提取后進(jìn)樣分析，測(cè)得5批樣品中人參皂苷Rg1的平均含量大于1.88 g/袋。甲醇提取后樣品雜質(zhì)峰少，操作簡(jiǎn)單，分析時(shí)間短，但是所采用的分析柱需耐純水相。

曹旦華等[16]采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定乳癖消顆粒中芍藥苷、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、連翹苷、哈巴俄苷、人參皂苷Rb1、去氫木香內(nèi)酯的含量，以Alltima C18柱為分析柱，乙腈(A)-水(B)為流動(dòng)相，梯度洗脫(0～105 min，A：10%～95%，B：90%～5%)，203 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。樣品經(jīng)甲醇超聲提取后萃取，最后經(jīng)甲醇復(fù)溶后進(jìn)樣分析。混標(biāo)溶液中7種標(biāo)準(zhǔn)品的線性關(guān)系良好，R值均大于0.999，平均回收率均大于97.95 %，精密度、分離度、穩(wěn)定性良好。但樣品單針?lè)治鰰r(shí)間大于100 min，在實(shí)際測(cè)定中其條件還可以進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，縮短分析時(shí)間，提高效率。

蒲艷春等[17]采用高效液相色譜法測(cè)定了乳癖消顆粒中的三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量。以CAPCELL PAK C18柱為分析柱，乙腈(A)-水(B)為流動(dòng)相，梯度洗脫(0～60 min，A：19%～36%，B：81%～64%)，檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm。3種標(biāo)準(zhǔn)品的回收率均大于96%，RSD均小于2%。在分析皂苷的樣品處理中采用甲醇進(jìn)行提取，已成為常見(jiàn)的提取方法，其提取的樣品中雜質(zhì)峰少，但顆粒劑中的輔料是否會(huì)對(duì)測(cè)定產(chǎn)生影響，是否存在人為添加的可能仍需進(jìn)一步考察。

3 乳癖消膠囊劑

膠囊劑系指將飲片用適宜方法加工后，加入適宜輔料充于空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中的制劑。可分為硬膠囊、軟膠囊(膠丸)和腸溶膠囊等[18]。乳癖消膠囊劑多為硬膠囊和軟膠囊，其中軟膠囊產(chǎn)品還未上市。

乳癖消膠囊的質(zhì)量控制多采用高效液相色譜法和薄層掃描法，主要檢測(cè)膠囊中的芍藥苷和人參皂苷Rg1的含量。

謝艷麗等[19]采用高效液相色譜法測(cè)定了不同批次乳癖消膠囊中的芍藥苷的含量。采用Hypersil BDS C18柱為分析柱，乙腈-0.1 %磷酸溶液為流動(dòng)相(13:87)，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm。樣品經(jīng)稀乙醇超聲提取，過(guò)濾后直接進(jìn)樣分析，平均回收率為98.7 %，RSD=0.7 %，測(cè)得3批樣品中芍藥苷的平均含量大于1.62 mg/g?？蔀槿轳毕z囊的質(zhì)量控制提供參考。樣品經(jīng)乙醇簡(jiǎn)單提取后直接進(jìn)樣，雖然操作簡(jiǎn)化，但是雜質(zhì)峰的比例也可能增加，分析中可能會(huì)對(duì)目標(biāo)色譜峰產(chǎn)生干擾。許亞玲等[4]則采用高效液相色譜法測(cè)定不同批次批乳癖消膠囊中的類(lèi)固醇激素類(lèi)藥物，結(jié)果表明，所測(cè)各批次中均不含類(lèi)固醇激素類(lèi)藥物。該方法為鑒別膠囊劑中是否存在違規(guī)添加化學(xué)藥物以增強(qiáng)療效提供了參考。

張小茜等[20]采用雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定乳癖消膠囊中人參皂苷Rg1的含量，樣品經(jīng)甲醇提取后，用正丁醇萃取，顯色后在535 nm、660 nm波長(zhǎng)下，采用反射法鋸齒掃描，測(cè)得不同批次樣品中每粒人參皂苷Rg1的平均含量大于2.18 mg。薄層掃描法樣品前處理尤為關(guān)鍵，可減少雜質(zhì)斑點(diǎn)，排除背景干擾，其重現(xiàn)性、準(zhǔn)確性較好。

4 乳癖消貼膏

貼膏劑系指以提取物、飲片或化學(xué)藥物與適宜的基質(zhì)和基材制成的供皮膚貼敷、可產(chǎn)生局部或全身性作用的一類(lèi)片狀外用制劑，包括橡膠膏劑、凝膠膏劑(原巴布膏劑)和貼劑[21]。乳癖消貼劑的質(zhì)量控制以高效液相色譜法和氣相色譜法較為常用，檢測(cè)對(duì)象為芍藥苷和丹皮酚。

那順白乙拉等[22]采用高效液相色譜法測(cè)定乳癖消貼膏中的丹皮酚的含量，采用Shim-Pack VP-ODS C18柱為分析柱，甲醇-水為流動(dòng)相(48:52)，檢測(cè)波長(zhǎng)為274 nm。平均回收率為96.26%，RSD=1.39%。乳癖消貼膏中每片丹皮酚的平均含量大于0.683 mg，參考相關(guān)資料，丹皮酚含量偏低，可能與藥材投料和生產(chǎn)工藝有關(guān)，導(dǎo)致丹皮酚的流失?；魧幉╗23]以乳癖消浸膏為模型藥物，采用高效液相色譜法對(duì)貼片中的標(biāo)示成分芍藥苷進(jìn)行測(cè)定，以O(shè)DS-2 Hypersil C18柱為分析柱，乙腈-水為流動(dòng)相(16:84，HAc 0.5%)，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm。測(cè)得平均含量為0.435%，RSD=1.09%。同時(shí)采用GC法對(duì)貼劑中的殘留有機(jī)溶劑進(jìn)行檢測(cè)，以弱極性的FFAP柱為分析柱，F(xiàn)ID檢測(cè)器進(jìn)行分析，氣相色譜法測(cè)得乙酸乙酯、異丙醇、乙醇3種殘留溶劑，未檢測(cè)到正庚烷、苯，且乳癖消貼片中殘留溶劑總量為2.1×10-4(質(zhì)量分?jǐn)?shù))[24]。該方法操作簡(jiǎn)單，可為乳癖消貼劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考依據(jù)。

另有文獻(xiàn)報(bào)道，乳癖消巴布劑[25]和乳癖消橡膠膏在市場(chǎng)上有售，多報(bào)道其在臨床上的療效，有關(guān)其質(zhì)量控制研究目前未見(jiàn)報(bào)道。

5 結(jié)論

乳癖消作為經(jīng)典驗(yàn)方，已經(jīng)被收錄于2010版藥典，但其現(xiàn)代劑型開(kāi)發(fā)較少，目前市場(chǎng)上使用的一些劑型并未收錄于藥典，僅在民間或?qū)嶒?yàn)室小范圍內(nèi)使用與研究，有關(guān)其質(zhì)量控制尚未建立相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)，仍需要進(jìn)一步研究。乳癖消組方復(fù)雜，新劑型的研發(fā)和臨床使用都需要以質(zhì)量穩(wěn)定、安全、有效為基本原則，同時(shí)在目前已經(jīng)研究的基礎(chǔ)上開(kāi)辟新的質(zhì)量控制指標(biāo)，完善乳癖消的研究資料，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。

【參考文獻(xiàn)】

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：840-841．

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄7．

[3] 許亞玲，羅 曼，周 蘭，等．HPLC法測(cè)定乳癖消片(膠囊)中丹皮酚的含量[J]．中國(guó)藥房，2011，22(8)：755-757．

[4] 許亞玲，申 璀，羅 曼，等．HPLC法同時(shí)檢測(cè)乳癖消片(膠囊)中是否非法摻入甾體激素類(lèi)藥[J]．中國(guó)藥房，2011，22(36)：3 440-3 442．

[5] 孫金元．HPLC法測(cè)定乳癖消片中丹皮酚的含量[J]．中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，25(5)：1 062-1 063．

[6] 姜云云，潘亞菊，范國(guó)榮．HPLC法測(cè)定乳癖消片中芍藥苷含量[J]．藥學(xué)實(shí)踐雜志，2007，25(5)：330-333．

[7] 徐國(guó)兵，王崢濤，潘 涅，等．RP-HPLC測(cè)定乳癖消片中三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量[J]．中國(guó)中藥雜志，2006，31(13)：1 067-1 069．

[8] 劉 汶．高效液相色譜法測(cè)定乳癖消片中芍藥苷含量[J]．中國(guó)藥業(yè)，2007，16(11)：21．

[9] 李洪書(shū)，鄧春暉，陳 斌．微波技術(shù)在乳癖消片液相色譜分析中的應(yīng)用[J]．藥物分析雜志，2010，30(1)：138-141．

[10] 傅海珍，楊 寧．薄層掃描法測(cè)定乳癖消片中人參皂苷Rg1的含量[J]．鎮(zhèn)江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，11(6)：749-751．

[11] 張振秋，翟鐵宏，劉桂梅．乳癖消中人參皂甙Rg1的含量測(cè)定[J]．遼寧中醫(yī)雜志，1997，24(11)：523．

[12] 曹愛(ài)民，孟憲生，沙 明．雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定乳癖消片中人參皂苷Rg1含量[J]．遼寧化工，2004，33(5)：303-304．

[13] 陳寧寧，魏敏吉，解健博．乳癖消片中碘含量測(cè)定方法研究[J]．沈陽(yáng)藥學(xué)院學(xué)報(bào)，1993，10(4)：291-292．

[14] 國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄6．

[15] 姜文紅，張清波．HPLC測(cè)定乳癖消顆粒中人參皂苷Rg1的含量[J]．中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，2006，7(4)：37-39．

[16] 曹旦華，張 劍，朱丹妮．HPLC同時(shí)測(cè)定乳癖消顆粒中7種成分的含量[J]．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(6)：74-76．

[17] 蒲艷春，徐艷麗，崔靜茹．HPLC同時(shí)測(cè)定乳癖消顆粒中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量[J]．中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2010，11(27)：1028-1030．

[18] 國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄10．

[19] 謝艷麗．高效液相色譜法測(cè)定乳癖消膠囊中芍藥苷的含量[J]．中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，6(6)：35-36．

[20] 張小茜，周富榮．雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定乳癖消膠囊中人參皂甙Rg1的含量[J]．中國(guó)中藥雜志，2009，6(6)：282-283．

[21] 國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄8．

[22] 那順白乙拉，陳紅梅，楊 輝．HPLC法測(cè)定乳癖消帖膏中丹皮酚的含量[J]．中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2008，3(3)：61-62．

[23] 霍寧波．乳癖消貼片基質(zhì)構(gòu)成及芍藥苷釋放性能的考察[J]．廣東化工，2010，37(205)：125-127．

[24] 霍寧波．乳癖消貼片中標(biāo)示成分及殘留溶劑的含量測(cè)定[J]．當(dāng)代化工，2010，39(1)：102-104．

[25] 王秋菊，呂 娟，張予陽(yáng)，等．乳癖消巴布膏的刺激性、過(guò)敏性及經(jīng)皮毒性研究[J]．藥學(xué)實(shí)踐雜志，2008，26(1)：31-34．