侯曉蘋 王滬榮 宋長軍 陜西渭南職業(yè)技術(shù)學(xué)院(渭南714000)

△西北大學(xué)(西安710069)

中藥復(fù)方是中醫(yī)審因辨證確定治法之后，選取適宜藥物，酌定用量，按組成原則妥善配伍而成的一組方劑。中藥復(fù)方隨癥加減，變化無窮，體現(xiàn)中醫(yī)辨證論治的特色，是中醫(yī)用藥優(yōu)勢所在。但也因其組分復(fù)雜、藥理作用多樣，干擾因素眾多，因而現(xiàn)代化研究難度頗大。多年來，揭示中藥復(fù)方蘊含的“七情合和”科學(xué)規(guī)律及其效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)，一直是復(fù)方配伍研究的核心內(nèi)容。在此，就近些年中藥復(fù)方配伍研究中的創(chuàng)新思維、方法及成果作以綜述，以供參考。

1 復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的多元化整體思維模式

1.1 有效成分群分析 羅國安等［1］提出將復(fù)方藥物作為一個整體，從中分離出不同有效部位(如皂苷類、黃酮類、生物堿類等)，并采用多種色譜方法定性鑒別出各有效部位，得到特征圖譜;再進行藥效學(xué)及指標(biāo)成分定量分析研究，從而闡明復(fù)方起效物質(zhì)及配伍規(guī)律。

1.2 有效成分組學(xué) 杜冠華等［2］提出可先快速分離得到中藥復(fù)方中各種組分，再采用高通量篩選技術(shù)評價分析各種組分的生物活性，從中篩選出全部有效物質(zhì)。并建立了檢測α-葡萄糖苷酶活性的比色測定法及其體外高通量篩選模型，對72個清熱解表中藥樣品進行了高通量篩選。發(fā)現(xiàn)鴨跖草、山慈菇和桑葉等提取物中含有相關(guān)活性物質(zhì)［3］。高通量活性藥物篩選技術(shù)快速、高效，符合中藥復(fù)方多成分、多靶點治療的特點，有助于復(fù)方現(xiàn)代研究與中醫(yī)配伍理論的結(jié)合。

1.3 分子中藥組學(xué) 馬增春等［4］認(rèn)為，復(fù)方中的化學(xué)成分相互組合會影響到機體內(nèi)部信號分子重排，使處于紊亂的信號網(wǎng)絡(luò)趨于平衡，從而達(dá)到療“證”和治病的作用;并設(shè)想提出“證候-作用通路-信號分子-分子網(wǎng)絡(luò)”的證候本質(zhì)圖譜，從復(fù)方、有效部位、有效成分、成分組合等水平考察圖譜的變化及影響。此方法從分子水平研究復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機理，使傳統(tǒng)中藥從宏觀認(rèn)識向微觀世界接近。李鷹飛等［5］應(yīng)用此法對四物湯進行研究發(fā)現(xiàn):川芎嗪、阿魏酸、多糖及芍藥苷是四物湯補血的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，他們通過影響造血相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)而促成補血機制。

1.4 劉建勛［6］認(rèn)為復(fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)是“證”、“病”相結(jié)合的有效成分，建議建立動物-器官-細(xì)胞模型，做以深入研究，以此闡明復(fù)方起效的物質(zhì)基礎(chǔ)。

1.5 方劑組織藥理學(xué)及代謝物組學(xué)假說 唐文富等［7-8］提出可使用藥理學(xué)方法來研究中藥或方劑的有效組分對病變靶組織的影響及其作用機制。運用色譜、光譜等方法采集各組方在不同疾病病變組織內(nèi)的成分譜、濃度變化、作用位點或受體、有效組分和組織之間的相互作用及量效關(guān)系，借以闡明各方劑的作用物質(zhì)基礎(chǔ)及過程。

2 復(fù)方配伍規(guī)律研究中的多學(xué)科方法的運用 主要探討配伍關(guān)系與體內(nèi)過程的關(guān)聯(lián)性。

2.1 中藥藥效學(xué)基本方法 探討復(fù)方效應(yīng)物質(zhì)與起效機制。

2.1.1 藥對研究:藥對是復(fù)方的最基本單元，常由兩種臨床常用且相對固定的中藥組合而成，符合”七情合和”配伍原則，研究藥對的配伍規(guī)律可幫助闡明復(fù)方配伍組方的科學(xué)性。梁日欣等［9］以高脂血癥大鼠為模型，以抗氧化、降脂、以及對血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響作用為指標(biāo)，對川芎-赤芍藥對進行研究，結(jié)果顯示:兩藥合用或單用均能顯著降低致病鼠血清中膽固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯水平，表明兩藥在降脂方面并不協(xié)同。但兩藥合用后能降低血清脂質(zhì)過氧化物-丙二醛水平，增加NO釋放。表明在抗氧化及保護血管內(nèi)皮細(xì)胞功能方面，兩藥產(chǎn)生協(xié)同作用。

2.1.2 拆方分析:將復(fù)方拆成各子方及子方組，研究其功效及配伍規(guī)律。拆方研究可以精簡方劑、尋找最佳藥物組合、確定主要藥物或活性物質(zhì)來源。也是全方作用機制的一個窗口，有助于闡明復(fù)方的作用機制及配伍規(guī)律。熊倩等［10］對麻黃湯不同配伍對大鼠發(fā)汗作用的影響作了定量評價，采用正交模擬與非線性混合模型，在復(fù)方背景下分析各組分的重要程度和相互作用。結(jié)果表明:各組分對大鼠發(fā)汗作用的藥效貢獻(xiàn)排序為桂枝、麻黃、杏仁和甘草，藥效最佳組合為麻黃+桂枝，最弱組合為杏仁+甘草。結(jié)論:對麻黃湯發(fā)汗作用貢獻(xiàn)最大的為麻黃、桂枝，且發(fā)揮最佳發(fā)汗作用須兩藥合用。

2.2 藥動學(xué)方法 研究復(fù)方中成分的體內(nèi)代謝動力學(xué)過程。定時測定生物樣本中的藥物濃度，擬定濃度-時間數(shù)據(jù)模型，得到藥動學(xué)參數(shù)，對藥物體內(nèi)吸收、分布、代謝及消除進行評價。

2.3 藥動學(xué)(PK)融合藥效學(xué)(PD)方法(PK-PD結(jié)合模型)通過定時測定血液、尿液等中的藥物及其代謝物或相互作用后綜合效應(yīng)物的濃度，擬定濃度-時間-效應(yīng)數(shù)據(jù)模型，得到PK-PD參數(shù)，探討方中各主要活性成分在體內(nèi)的動態(tài)變化及藥效消長，對活性藥物體內(nèi)過程進行評價。此法可進行同步平行觀測多個藥物效應(yīng)，有助于對復(fù)方的體內(nèi)過程進行客觀分析及正確評價。甘洪全等［12］采用高效液相法對健康男性志愿者口服冠心Ⅱ號湯劑后血清中的阿魏酸濃度進行檢測，并觀察其無創(chuàng)傷性冠脈血流動力學(xué)，得到符合一室開放模型的藥-時曲線數(shù)據(jù)。陳淵成等［13］提出間接的藥動-藥效模型參數(shù)計算程序，能準(zhǔn)確估算PK-PD參數(shù)。周京滋等［14］研究了四逆湯、附子的抗炎、鎮(zhèn)痛藥效動力學(xué)，結(jié)果表明不同的效應(yīng)則藥動學(xué)參數(shù)不同。因此可知復(fù)方在體內(nèi)存在兩個或者多個藥動學(xué)特征。

2.4 中藥血清藥理學(xué)及血清藥物化學(xué)法 血清藥理學(xué)采用含藥血清代替煎劑或粗提物進行體外實驗，研究藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。莫紅纓等［15］研究含雙黃連或其拆方的大鼠血清對抗呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用。結(jié)果顯示雙黃連全方具有明顯抗RSV的作用，并優(yōu)于各拆方;復(fù)方及拆方的體外和血清藥效學(xué)結(jié)果具有一定的相關(guān)性。馬峻等［16］以抑制血小板釋放5-HT作用(14C-5HT釋放法)為藥效指標(biāo)進行頭風(fēng)飲的藥動學(xué)研究，由計算得到的藥動學(xué)參數(shù)，得出頭風(fēng)飲屬于一級動力學(xué)清除的房室模型。此法中同批分離得到的含藥血清可以同步觀測多項藥理效應(yīng)，有助于全面考察中藥復(fù)方的藥物作用。血清藥物化學(xué)主要檢查并觀測血清中外源性生物活性物質(zhì)及其作用和代謝規(guī)律。王喜軍等［17］采用超高效液相色譜聯(lián)合紫外光譜及飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，對茵陳蒿湯及其不同配伍的樣品進行大鼠體內(nèi)血清藥物化學(xué)分析，結(jié)果鑒定出大鼠血中出現(xiàn)移形成分21個，其中8個只在全方配伍的情況下才出現(xiàn)，而在單味或任意組合藥對中均未出現(xiàn)，并且這8個成分大都具較強的保肝利膽活性。

2.5 計算機性味量化研究 張冉、蔣永光［18］等提出復(fù)方配伍的實質(zhì)即方-方、方-藥、藥-藥、藥-量，及方-藥、藥-證之間的關(guān)聯(lián)與對應(yīng)，分析這些關(guān)系變化特征，即可揭示復(fù)方的配伍規(guī)律。并采用現(xiàn)代數(shù)據(jù)處理技術(shù)(數(shù)據(jù)挖掘、知識發(fā)現(xiàn))，針對復(fù)方蘊含的方、藥、證等信息，進行相應(yīng)的關(guān)聯(lián)、對應(yīng)等量化分析，以揭示復(fù)方的配伍規(guī)律。

2.6 中藥化學(xué)成分免疫分析法 屈會化等［20］提出藥物配伍與其體內(nèi)代謝過程密切相關(guān)，可制備出中藥活性小分子單克隆抗體，利用免疫分析方法實現(xiàn)同時檢測復(fù)方中多成分在多器官或組織樣品中的含量或存在，尤其是微量或痕量成分，借此來闡明中藥的體內(nèi)代謝及相互作用，闡明復(fù)方配伍的科學(xué)內(nèi)涵。免疫分析法特異性強、靈敏度高，方便快捷，是復(fù)方配伍機理研究的新思路。并已建立了人參皂苷、黃芩苷、甘草酸［21］等的人工抗原的合成、單克隆抗體的制備及生物樣品的免疫檢測方法。

3 其它新技術(shù)3.1 生物芯片、蛋白組學(xué)技術(shù) 顯示中藥作用的所有靶基因，并把中藥的性味主治和其對特定疾病相關(guān)蛋白的表達(dá)與調(diào)控相關(guān)聯(lián)，從分子水平上詮釋傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論及其作用機制。

3.2 代謝組學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù) 分析確定生物體系統(tǒng)生化譜圖和功能調(diào)控規(guī)律，對某一生物或細(xì)胞所有低相對分子質(zhì)量代謝產(chǎn)物定性、定量分析，可應(yīng)用于復(fù)方有效成分的篩選、以及作用機理等而發(fā)揮重要作用。

展望 中藥的復(fù)方配伍研究龐大復(fù)雜，涉及中藥、藥理、分子生物等多學(xué)科的融合交叉，而目前研究仍以臨床療效觀察為主，實驗藥理學(xué)也多未展開分子、細(xì)胞水平上的深入系統(tǒng)研究。相信隨著相關(guān)學(xué)科更多高新技術(shù)的應(yīng)用，復(fù)方研究會日漸深入，其科學(xué)內(nèi)涵將日益明了，有望將復(fù)方的研究與應(yīng)用推向新的高度，從而推動中醫(yī)藥現(xiàn)代化產(chǎn)業(yè)進程，更好地服務(wù)于人類健康。

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