趙楠，韓鳳娟，王桂媛，李玉花

1.東北林業(yè)大學 生命科學學院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學 附屬第一醫(yī)院基地項目辦公室，黑龍江 哈爾濱 150040

鴉膽子［Brucea javanica（L.）Merr.］系苦木科植物，味苦，性寒，有小毒，19 世紀末被廣泛用于治療阿米巴痢疾。1973 年，Kupchan[1]首次報道從鴉膽子中分離出多種對動物瘤株有效的成分鴉膽亭（brucantin），以后相繼從該科30 多種植物中分離出一系列抗癌活性成分。近年來因為其抗癌活性，鴉膽子屬及其化學成分越來越受到人們的關(guān)注。在鴉膽子中相繼分離出苦木素類、生物堿類、三萜類化合物和黃酮類[2-5]化合物，核心成分是具有多種生物活性的苦木素類，其活性包括抗癌[4]、抗瘧疾[6]、抗巴貝斯蟲病[7]、抗細菌[8-9]、抗病毒[10]及高血糖活性[11]等。

鴉膽子油乳是由從干燥的成熟果實中提取的脂肪油經(jīng)乳化作用制成的水包油型乳劑，其主要活性成分油酸及亞油酸具有很強的抗癌活性，與腫瘤細胞膜有特異的親和力[12]。近年來，鴉膽子油乳在臨床上作為腫瘤的聯(lián)合放、化療藥物，已廣泛應(yīng)用于肺癌[13-14]、食道癌、直腸癌、肝癌、前列腺癌[15]等的治療中，在腫瘤治療領(lǐng)域已顯示出廣泛的應(yīng)用前景。我們對近10 年來鴉膽子油乳的抗腫瘤機制及臨床應(yīng)用進行簡要綜述。

1 鴉膽子油乳的抗腫瘤機制

1.1 鴉膽子油乳抗腫瘤的分子基礎(chǔ)

鴉膽子油乳中85%的成分為三油酸甘油酯及飽和或不飽和脂肪酸（油酸、軟脂酸、硬脂酸、亞油酸等），其中油酸、亞油酸與腫瘤細胞膜有特異的親和力，具有很強的抗癌活性。三油酸甘油酯雖然不具有抗癌活性，但可以水解為油酸。細小的油乳顆粒能與腫瘤細胞特異性結(jié)合，長時間黏附于腫瘤細胞周圍，使鴉膽子油乳的抗腫瘤成分與腫瘤細胞得到充分接觸，增加抗腫瘤成分滲入細胞的機會[11]。由于這種靶向性作用，使鴉膽子油乳與腫瘤細胞緊密結(jié)合，破壞細胞膜和線粒體等膜性系統(tǒng)，使腫瘤細胞變性、壞死，抑制細胞的拓撲異構(gòu)酶活性，從而抑制腫瘤細胞的DNA 合成。油酸、亞油酸亦能強烈抑制癌細胞對氧的攝取，降低體內(nèi)氧自由基活動水平和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，阻止其有毒代謝產(chǎn)物對細胞的損害。同時，脂肪酸具有的表面活性對癌細胞有毒性作用，當脂肪酸含量很高時，可導致細胞膜破裂[17]。

1.2 鴉膽子油乳對腫瘤細胞周期的影響

研究發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳是細胞周期非特異性抗癌藥，對G0、G1、S、G2、M 期腫瘤細胞有殺傷和抑制作用，能明顯抑制腫瘤細胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)的合成，干擾肽腱的形成[18-19]。細胞周期調(diào)控異常是腫瘤發(fā)生的一個重要原因，而腫瘤細胞增殖的顯著特點是細胞周期運行失控造成無限增殖和分化受阻。近年來眾多研究表明，鴉膽子油乳通過改變腫瘤細胞周期的分布，抑制腫瘤細胞DNA 的合成，以達到抗腫瘤作用。

鴉膽子可以將細胞周期阻滯在G0～G1 期來抑制細胞生長[20-21]。劉悅等[22]發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳對人膀胱癌細胞系BIU-87有明顯的殺傷作用，并呈現(xiàn)劑量和時間的依賴性。根據(jù)不同濃度鴉膽子油乳對3HTdR 滲入抑制率的影響結(jié)果，發(fā)現(xiàn)鴉膽子油乳作用的細胞DNA 合成速度明顯減慢，降低了癌細胞旺盛的核酸合成代謝，且3H-TdR滲入抑制率隨藥物濃度的增加而升高，進一步證實了鴉膽子油乳對BIU-87癌細胞的生長抑制作用主要是抑制其DNA 合成，且研究還發(fā)現(xiàn)鴉膽子油乳能阻止G0/G1 期細胞向S 期進展，阻斷癌細胞的增殖進程，也提示鴉膽子油乳可能是一種S 期特異性抗癌藥物。尹香菊等[21]的研究表明，鴉膽子油乳可以引起宮頸癌HeLa細胞周期分布的改變，隨著藥物濃度的增加，S和G2～M 期細胞數(shù)量明顯增加，G0～G1期細胞數(shù)量顯著減少，表明鴉膽子油乳阻滯S期細胞進入G2～M期，降低腫瘤細胞分裂能力，抑制其增殖。孫波等[23]研究證明，鴉膽子油乳在體外能明顯抑制胃癌細胞SGG-7901 的增殖，流式細胞分析表明對SGG-7901 細胞無明顯的誘導凋亡作用。實驗表明，鴉膽子油乳將胃癌細胞阻滯在DNA 合成階段即S 期，并且這種S 期阻滯作用與藥物作用的時間和濃度相關(guān)。李笑弓等[24]通過流式細胞分析鴉膽子油靜脈乳劑作用前后腎癌細胞的細胞周期變化，發(fā)現(xiàn)鴉膽子油乳可阻滯人腎顆粒細胞癌細胞系GRC-1 及裸鼠移植性人腎透明細胞癌RLC-310 細胞由G0/G1 期向S 期進展，抑制DNA合成。

1.3 鴉膽子油乳對細胞凋亡的影響

細胞的凋亡異常與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展有關(guān)，而腫瘤治療的中心環(huán)節(jié)是干擾腫瘤細胞的細胞周期，從而使癌細胞增殖速率減慢或誘導其凋亡。由于腫瘤細胞對藥物誘導的凋亡作用較正常細胞敏感，誘導腫瘤細胞凋亡是鴉膽子油乳作為化療藥物的作用機制之一。

已發(fā)現(xiàn)有30 多種基因?qū)毎蛲銎鸫龠M或抑制作用，如腫瘤抑制基因p53、抗腫瘤凋亡Bcl-2家族基因等。p53 是細胞周期重要的負調(diào)控因子，在維持基因組穩(wěn)定、調(diào)控細胞凋亡中起重要作用[25-28]。野生型p53蛋白能抑制DNA 受損的細胞于G1期，從而抑制DNA 合成，誘導DNA 修復(fù)，修補不成功則誘導其凋亡[29]。

王芳[30]等發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳可誘導人早幼粒白血病細胞系HL-60 細胞凋亡，用1∶40、1∶20 的鴉膽子油乳處理HL-60 細胞6 h 后，細胞出現(xiàn)明顯的凋亡特征。馬力[31]等發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳體外對肝癌細胞SMMC-7721 有顯著的抑制增生作用，能誘導凋亡、阻滯細胞周期于G0/G1 期，抑制p53和Bcl-2 的表達是其重要機制，其中p53途徑起主導作用。

1.4 鴉膽子油乳對細胞形態(tài)的影響

大量研究表明，鴉膽子油乳可以阻斷癌細胞的增殖，對癌細胞質(zhì)膜系統(tǒng)、線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器均具有破壞作用，并可見凋亡小體。

楊智博等經(jīng)電鏡觀察鴉膽子油乳劑對惡性腫瘤細胞超微結(jié)構(gòu)的影響，發(fā)現(xiàn)在小劑量藥物的作用下，大部分癌細胞內(nèi)出現(xiàn)核周間隙增寬，線粒體膨化，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張、脫粒；隨著藥物劑量的增大，癌細胞內(nèi)線粒體呈現(xiàn)出強膨化狀態(tài)，部分嵴消失，核內(nèi)空泡化。劉悅等[22]經(jīng)電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，5 mL/L 的鴉膽子油乳作用人膀胱癌細胞系BIU-87 細胞48 h 后，細胞核內(nèi)染色質(zhì)向核膜聚集并呈凝塊狀，核處于溶解狀態(tài)，細胞中線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被破壞。孫忠慧等[32]研究發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳作用后人卵巢癌CAOV3 細胞變圓，表面微絨毛和突起明顯減少，變短，呈棒球狀，偽足消失，胞漿濃縮，細胞內(nèi)出現(xiàn)大小不等的空泡，線粒體腫脹、空泡化，可見凋亡小體。

1.5 鴉膽子油乳對多藥耐藥的影響

耐藥是引起腫瘤化療失敗及腫瘤復(fù)發(fā)的主要原因。耐藥又分為原藥耐藥（PDR）和多藥耐藥（MDR）。MDR 是指隨著化療的進行，癌細胞不僅對化療藥物不敏感，而且對非同類型的化療藥物也產(chǎn)生抗藥性。MDR主要與多藥耐藥相關(guān)蛋白如P糖蛋白（P-gp）、多藥耐藥蛋白（mrp）、多藥耐藥基因（mdr）等的高表達有關(guān)，也與谷胱甘肽S 轉(zhuǎn)移酶、拓撲異構(gòu)酶Ⅱ和谷胱甘肽氧化酶有關(guān)[33]。

鴉膽子油乳對多藥耐藥有一定的逆轉(zhuǎn)作用，并能明顯抑制拓撲異構(gòu)酶Ⅱ的活性[34]。鴉膽子油乳可穿過細胞膜進入細胞，被P-gp 識別并與其結(jié)合，競爭其他化療藥物與P-gp 的結(jié)合位點，抑制藥物泵出，從而達到逆轉(zhuǎn)耐藥的目的[35]。陳丹[36]等發(fā)現(xiàn)，濃度為0.02 g/L 的鴉膽子油乳可顯著降低耐藥細胞的順鉑耐藥指數(shù)，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為5.49 倍。湯濤[34]等發(fā)現(xiàn)，濃度為0.025 g/L 的鴉膽子油乳對人口腔鱗癌耐藥細胞株MCF-7/ADM、人乳腺癌耐藥細胞株K562/A02和人白血病耐藥細胞株KB/VCR 有一定的耐藥逆轉(zhuǎn)作用，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)分別為3.6、8.2與13.7倍。

2 鴉膽子油乳防治腫瘤的臨床應(yīng)用

鴉膽子油乳作為從苦木科植物中提取的新型抗癌藥物，為細胞周期非特異性抗癌藥，對G0、G1、S、G2、M期腫瘤細胞有殺傷和抑制作用，能明顯抑制腫瘤細胞DNA 的合成，配合化療及放療均有增效減毒作用；而鴉膽子油乳的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用，可以增強化療藥物對腫瘤的作用；另外，鴉膽子油乳除可以直接殺傷癌細胞外，還具有增強人免疫功能和骨髓造血功能的作用。

近年來鴉膽子油乳在臨床上作為腫瘤的聯(lián)合放、化療藥物，已廣泛用于肺癌、肝癌、胃癌、食管癌、膀胱癌、前列腺癌、卵巢癌等的治療。李烜等[37]采用鴉膽子油乳聯(lián)合化療治療晚期肺癌，其臨床癥狀、生活質(zhì)量改善均優(yōu)于對照組（P＜0.05）。董西林等[38]采用鴉膽子油乳注射液配合NP 方案化療治療非小細胞肺癌，治療組在臨床控制率、生活質(zhì)量及細胞免疫功能顯著高于對照組，說明鴉膽子油乳具有保護免疫功能、減輕化療的骨髓抑制作用的效力。李心忠等[39]發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳肝動脈灌注聯(lián)合碘油栓塞治療原發(fā)性肝癌，與肝動脈灌注化療聯(lián)合碘油栓塞治療肝癌的有效率和疾病控制率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），且可明顯地改善患者生活質(zhì)量，毒副反應(yīng)輕。王斌等[40]認為，中藥復(fù)方肝積方聯(lián)合鴉膽子油乳介入治療中晚期原發(fā)性肝癌，可以提高患者生活質(zhì)量，提高0.5和1年生存率。

3 結(jié)語

綜上所述，鴉膽子油乳由于其自身特有的分子基礎(chǔ)，可以通過改變腫瘤細胞周期分布、誘導腫瘤細胞凋亡、破壞腫瘤細胞結(jié)構(gòu)、逆轉(zhuǎn)多藥耐藥等抑制腫瘤細胞的增殖，從而達到抗腫瘤的目的。鴉膽子油乳在防治腫瘤方面，具有提高機體免疫力和保護骨髓造血干細胞的特點，且毒副作用小，療效確切，是目前臨床上廣泛應(yīng)用的抗腫瘤中藥，與常用的化療藥物相比，在提高晚期癌癥患者生活質(zhì)量、延長生存期方面具有一定的優(yōu)勢。但是，由于常用的鴉膽子油乳靜脈乳劑屬于多向動力學不穩(wěn)定的分散體系，溫度過高或過低均能引起乳析或破裂，說明鴉膽子油在新劑型的開發(fā)方面還有待于進一步研究。

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