姬艷蘇馮利民

（1.武警后勤學院附屬醫(yī)院，天津 300162；2.天津中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院，天津 300150）

三七總皂苷對心肌缺血大鼠血清IL-6和AngⅡ的影響

姬艷蘇1馮利民2

（1.武警后勤學院附屬醫(yī)院，天津 300162；2.天津中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院，天津 300150）

目的：研究三七總皂苷（Panax Notoginsenosides，PNS）對心肌缺血大鼠血清白細胞介素6（Interleukin6，IL-6）和血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）含量的影響。方法：采用結扎大鼠冠狀動脈左前降支造成心肌缺血模型，將心肌缺血大鼠隨機分成模型組和PNS組，并設假手術組作為空白對照。PNS組給予PNS 120mg/kg，分別給藥3、7、14、28d后，檢測各組大鼠血清IL-6和AngⅡ含量。結果：在心肌缺血后3、7、14、28d，造模大鼠IL-6和AngⅡ含量均有不同程度的升高，在缺血早期IL-6迅速升高而在后期稍有下降，AngⅡ的含量隨時間延長逐漸升高。PNS組給藥3d后IL-6較模型組即顯著下降，且持續(xù)到給藥28d；而給藥28d時AngⅡ才顯著低于模型組。結論：在急性心肌缺血期以炎癥反應為主而在心肌缺血后期則以心肌纖維化為主。PNS可能在心肌缺血的每個階段均起到保護心肌的作用，即在心肌缺血早期起到抗炎作用，而在心肌缺血后期尤其是連續(xù)給藥14d后起到抗心肌纖維化作用。

心肌缺血 三七總皂苷 白細胞介素6 血管緊張素Ⅱ 實驗研究

心肌缺血，是指心臟的血液灌注減少，心肌能量代謝不正常，不能支持心臟正常工作的一種病理狀態(tài)。本研究以結扎大鼠冠狀動脈左前降支造成心肌供血不足，復制心肌缺血模型，以IL-6和AngⅡ作為評價指標，觀察三七總皂苷（PNS）對大鼠心肌缺血的影響。

1 實驗材料

1.1 實驗動物雄性W istar大鼠400只，體重250～300g，由北京維通利華實驗動物中心提供，動物許可證編號：SCXK（京）2002-0003，分籠飼養(yǎng)，每籠5只，食水自由攝取。

1.2主要實驗儀器MP-150多導生理記錄儀（BIOPAC systems Inc.，美國）；DU-530紫外分光光度計（DNA/ ProteinAnalyzer，BECKMAN，美國）；GC-911-γ-放射免疫計數(shù)器（中國科技大學實業(yè)總公司）；Allegra-64R Centrifuge低溫高速離心機（BECKMAN，美國）。

1.3 實驗藥物及試劑三七總皂苷（PNS），由浙江大學藥學院提供，批號：060427。IL-6檢測試劑盒，武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司。

2 實驗方法

2.1 心肌缺血模型制作方法大鼠用水合氯醛（300mg/kg）腹腔注射麻醉，將心電圖電極針埋于右上肢和左下肢皮下，記錄Ⅱ導聯(lián)心電圖，參照文獻[1]的方法復制大鼠心肌缺血模型。于肺動脈圓錐與左心耳間，離左冠狀動脈前降支起始部3～4mm處繞前降支穿線，將心臟送回胸腔內(nèi)，止血鉗夾閉胸壁肌肉。穩(wěn)定5min后，結扎冠脈，觀察心電圖變化并記錄。心電圖顯示ST段明顯抬高的大鼠視為造模成功。假手術組的手術過程與上述相同，只穿線不結扎冠狀動脈。

2.2 分組與給藥大鼠隨機分為模型組和PNS給藥3、7、14和28d組，以假手術組作為正常對照，每組12只。PNS以0.5%羧甲基纖維素鈉（CMC）水溶液配制，按照前期實驗的結果制定PNS組給藥劑量為120mg/kg[2]，分別給藥3、7、14和28d。模型組和假手術組灌服等體積0.5%CMC水溶液，每日給藥1次。

2.3 指標檢測末次給藥后，腹腔注射麻醉，腹主動脈取血，離心制備血清。按IL-6檢測試劑盒檢測血清IL-6含量，采用放免法測定血清AngⅡ的含量。

3 實驗結果

3.1 PNS對心肌缺血大鼠血清IL-6的影響與假手術組比較，心肌缺血3、7、14和28d后，模型組大鼠血清的IL-6含量顯著升高（P＜0.05）。PNS給藥3、7、14和28d后，與相應時間點的模型組相比，大鼠血清IL-6含量均降低，其中3、7和28d組的差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，P＜0.01）。見表1。

表1 各組大鼠不同時間點血清IL-6含量比較（±s）pg/kg

表1 各組大鼠不同時間點血清IL-6含量比較（±s）pg/kg

注：與同時期假手術組比較，#P＜0.05；與同時期模型組比較，*P<0.05，**P＜0.01。

組別動物數(shù)（只）給藥時間28d 14d假手術組12 120±22 119±34模型組12 161±40#162±36#PNS組12 147±30 116±51*3d 7d 159±38 149±30 213±68#204±56#127±45**156±52*

3.2 PNS對心肌缺血大鼠血清AngⅡ的影響結扎冠脈造成心肌缺血3、7、14和28d后，與假手術組相比，模型組大鼠血清AngⅡ含量顯著升高（P＜0.05）。PNS給藥3、7、14和28d后，與相應時間點的模型組相比，大鼠血清AngⅡ的含量均降低，給藥28d后明顯下降（P＜0.01）。見表2。

表2 各組大鼠不同時間點血清AngⅡ含量比較（±s）pg/mL

表2 各組大鼠不同時間點血清AngⅡ含量比較（±s）pg/mL

注：與同時期假手術組比較，#P＜0.05；與同時期模型組比較，**P＜0.01。

假模P

4 討論

PNS是從藥用植物三七中分離出的皂苷成分，主要含三七皂苷、黃酮、多糖、蛋白、甾醇、無機物、揮發(fā)油和油脂等。研究顯示PNS能顯著改善左室收縮和舒張功能，降低血清酶的含量及心律失常發(fā)生率，并通過抗氧化和改善心肌細胞ATP的能量代謝而發(fā)揮對缺血心肌的保護作用[3-4]。

心肌缺血會造成炎癥反應，在冠心病心肌缺血炎癥反應初期，受TNF-α誘發(fā)，大量的IL-6被激活而發(fā)揮其介導炎癥和調節(jié)免疫的作用。如果心肌缺血較長時間不能緩解，則會造成缺血部位的纖維化和心室重構。AngⅡ作為腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的介質之一，參與了心臟纖維化和/或結構重構的過程，具有多種調節(jié)機體功能的作用。因此本研究以IL-6和AngⅡ作為評價指標，探討PNS對不同時間點的心肌缺血的治療作用。

結果表明，在心肌缺血后3、7、14、28d，IL-6和AngⅡ含量均有不同程度的升高。在缺血早期，IL-6迅速升高而在后期稍有下降，AngⅡ的含量隨時間延長逐漸升高。提示在急性心肌缺血期以炎癥反應為主，而在心肌缺血后期則以心肌纖維化為主。PNS在給藥3d后即可顯著降低IL-6，且持續(xù)到給藥28d；而直到連續(xù)給藥28d后才起到降低AngⅡ的作用。因此我們推測，PNS可能在心肌缺血的每個階段均起到保護心肌的作用，即在心肌缺血早期起到抗炎作用，而在心肌缺血后期尤其是連續(xù)給藥14d后起到抗心肌纖維化作用。本研究為PNS治療心肌缺血，制定給藥方案提供了實驗依據(jù)，但關于PNS對心肌缺血不同發(fā)展階段的更深層次的防治機制仍需進一步研究。

[1]Xiaoying Wang，Yi Wang，Min Jiang，et al.Differential Cardioprotective Effects of Salvianolic Acid and Tanshinone on Acute Myocardial Infarction Are Mediated by Unique Signaling Pathways.Journal of Ethnopharmacology，2011，135（3）：662

[2]劉杰，高秀梅，王怡，等.三七總皂苷對心肌缺血大鼠血流動力學影響實驗研究.天津中醫(yī)藥，2005，4（22）：158

[3]王本祥.現(xiàn)代中藥藥理與臨床.天津：天津科技翻譯出版公司，2004：79

[4]李娟莉，蘇式兵.三七總皂苷對大鼠急性心肌梗死的保護作用.中藥藥理與臨床，2013，29（1）：68

R541.405

A

1672-397X（2014）04-0072-02

姬艷蘇（1981-），女，碩士研究生，藥師，中藥藥理學專業(yè)。shasan_2001@163.com

2013-11-30

編輯：吳寧

國家自然科學基金青年基金項目（81102534）