謝飛龍 福建省連城縣文亨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)水廠站 366202
豬圓環(huán)病毒 (Porcinecircovirus,PCV) 可分為PCV1型和PCV2型2種血清型[1],PCV1不具有致病性,而PCV2型作為豬圓環(huán)病毒病的主要病原,同時也是引起豬免疫障礙的重要傳染病病原之一,其毒力差異顯著,可以感染不同年齡段豬,在臨床上主要表現為斷乳仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎與腎炎綜合征(PDNS)、母豬繁殖障礙和豬間質性肺炎。患豬和帶毒豬是該病主要的傳染源,感染豬只常由于并發(fā)細菌病或病毒病而導致死亡率增加。副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis,HPS)是豬 G1asser病的病原體,隨著規(guī)?;B(yǎng)豬業(yè)發(fā)展,這幾年副豬嗜血桿菌的感染呈現遞增趨勢,患豬死亡率增加[2]。該菌的菌株具有多樣性,且毒力各不相同,作為豬的上呼吸道常在菌,當機體受到應激或感染時易發(fā)此病,臨床特征為關節(jié)炎、漿膜炎和腦膜炎[3]。
連城縣某豬場飼養(yǎng)母豬300余頭。2014年8月,發(fā)現120多頭平均體重約為18 kg保育豬發(fā)生以呼吸困難為主要癥狀的疾病,大量小豬出現死亡,死亡率達到65%。臨床上主要表現為豬只體溫升高,達到40~42℃,精神萎頓,消瘦,厭食,呼吸困難,生長緩慢;部分患豬行走困難,運動緩慢,甚至臥地不起;有的豬只后肢關節(jié)腫脹;有的腹瀉、被毛粗亂和黃疸。
剖檢3頭患豬,內臟情況基本一致。心包、胸腔積水,心包、肺臟和腹腔都有大量纖維蛋白滲出,肺與胸膜壁黏連,可見間質性肺炎;全身淋巴結腫大,肝臟和脾臟變硬,腎臟呈現淡黃色,表面有灰白色壞死灶;關節(jié)腫大,切開關節(jié)腔見有淡黃色液體。
3.1 細菌分離與培養(yǎng)
1)取患豬的心包液、心血、肺臟、胸腹腔積液、關節(jié)腔液等病料分別接種于含有V因子的血瓊脂平板、血瓊脂平板和普通瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24~48 h,在含有V因子血瓊脂平板上可見邊緣整齊、小而透明的不溶血菌落,血瓊脂平板上生長貧瘠,而普通瓊脂平板沒有菌落生長。
2)挑取可疑菌落經革蘭氏染色后鏡檢,觀察到革蘭氏陰性的短小桿狀、球桿狀,少部分絲狀菌體。
3)將含有V因子的血瓊脂平板分成兩部分,都接種分離到的可疑菌落,然后挑取金黃色葡萄球菌在其中一半劃線,37℃培養(yǎng)24~48 h,發(fā)現在金黃色葡萄球菌的附近有呈“衛(wèi)星”生長的針尖大小、圓形、半透明、不溶血菌落,且菌落直徑較另一半大。
3.2 生化鑒定 挑取純培養(yǎng)的單個菌落接種于添加NAD的葡萄糖、蔗糖、半乳糖等的生化微量反應鑒定管,同時進行氧化酶和接觸酶試驗,結果發(fā)現接觸酶、葡萄糖、半乳糖和蔗糖為“+”,其他為“-”。
3.3 病原檢測 對3頭患豬分別采集肺臟、肝臟、脾臟、淋巴結等病料進行豬瘟病毒、豬圓環(huán)病毒2型、偽狂犬病病毒、藍耳病病毒等病原檢測,結果只有豬圓環(huán)病毒2型為陽性,其他病原檢測均為陰性。
根據發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化和實驗室檢查,最后確診該場為豬圓環(huán)病毒2型與副豬嗜血桿菌病混合感染。
1)無害化處理病死豬,對發(fā)病豬進行隔離治療,每頭每千克體重肌注替米考星0.1 mL、黃芪多糖0.2 mL,每天2次;每噸水添加葡萄糖粉5 kg、復合多維500 g,連用15 d;每噸飼料添加黃芪多糖1 kg,連用1個月。同時交替使用聚維酮碘1∶1 500和戊二醛1∶1 000對環(huán)境、豬舍、用具及排泄物進行徹底消毒。
2)仔豬14日齡首免豬圓環(huán)病毒疫苗,3周后再次加強免疫,采集不同階段豬的血清進行抗體檢測,若發(fā)現問題應及時調整免疫程序。
3)堅持自繁自養(yǎng),保證做到全進全出,同時加強引種檢疫工作,防止將病原引進場內,定期對豬場及周圍環(huán)境進行消毒。
4)加強飼養(yǎng)管理,做好仔豬舍的防寒保暖、通風換氣,減少豬群的應激。同時做好豬群的免疫和藥物預防工作,定期進行抗體檢測,了解豬群整體的抗體水平。
通過采取上述防治措施后,疫情得到控制,1個月后發(fā)病豬病情明顯好轉,生產情況基本恢復正常。
1)該場保育豬有接種過圓環(huán)病毒2型疫苗,但仍然發(fā)生圓環(huán)病毒病,進一步調查發(fā)現接種圓環(huán)病毒疫苗后沒有進行抗體檢測,不清楚疫苗效果如何,且斷乳后隨著母源抗體消失,存在可能感染野毒的風險??紤]到節(jié)約成本和勞動力,仔豬在14日齡只接種一次豬圓環(huán)病毒滅活苗,而對于滅活苗來說必須經過基礎免疫和第2次加強免疫才可以產生很好的免疫保護力,從而降低豬群的發(fā)病率和死亡率,提高實際的生產效益。因此,在首免后的3周需加強免疫一次豬圓環(huán)病毒疫苗,而且不論接種任何疫苗都要定期進行抗體檢測,確保豬群的抗體水平整齊度好,個體之間差異小,出現問題應及時調整免疫接種程序,同時加強飼養(yǎng)管理,減少豬群應激。
2)豬的免疫抑制性疾病如豬圓環(huán)病毒病會使豬的抵抗力下降,而副豬嗜血桿菌是一種條件菌,在免疫抑制性疾病的協同作用下,一旦并發(fā)細菌感染,會使得臨床癥狀變得更加復雜,診斷起來也更加困難。疫苗防控是一個不錯的辦法,但必須意識到副豬嗜血桿菌的血清型眾多,至少有15種血清型,還有30%未定型,血清型之間缺乏交叉保護,豬場需要了解自場流行的副豬嗜血桿菌血清型,以此來選擇相應的商品化疫苗,才能做到有效防控。而對于自家苗并不是很提倡,因為在其中可能含有其他微生物,如豬圓環(huán)病毒,它的抵抗力非常強,甲醛很難殺死病毒,一旦滅活不完全,會更難防控該病的發(fā)生。因此該病應以預防為主,重視平常的飼養(yǎng)管理,在發(fā)現有患豬時應立即做好隔離措施,淘汰僵豬或嚴重的患豬,降低豬只感染的機會,并嚴格消毒,也可在飼料中投藥進行藥物預防,做好其他呼吸道疾病的免疫接種工作。
[1]Finsterbusch T,Mankertz A.Porcine circoviruses-small but powerful[J].Virus Res,2009,143:177-183.
[2]斯特勞.豬病學[M].8版.劉文軍,張中秋,譯.北京:中國農業(yè)大學出版社,1998:407-416.
[3]Oliveira S,Galina L,Blanco I,et al.Naturally-farrowed,artificially-reared pigs as an alternative model for experimental infection by Haemophilus parasuis[J].Can J Vet Res,2003,67(2):l46-150.