王中梅 王 昶
(1.響水縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所,江蘇鹽城 224600;2.響水縣老舍畜牧獸醫(yī)站,江蘇鹽城 224600)
在養(yǎng)豬生產(chǎn)中,豬的喘氣病一直是困擾廣大養(yǎng)殖戶的一個難題,大多數(shù)病豬以非痰性干咳、喘氣、生長停滯、死亡率低和高發(fā)病率為特征。同時,亦可見呼吸困難,發(fā)燒和總體生產(chǎn)性能降低。感染的豬通常食欲變化不大,但不能達到正常的增重率。當繼發(fā)感染其他細菌后,則出現(xiàn)食欲減退和發(fā)育不良、有高燒或黏液性濕痰,并導致死亡率上升,造成養(yǎng)豬成本上升,利潤下降。
1.1.1 材料 典型喘氣病癥狀的病豬。
1.1.2 儀器 手術剪、手術刀、天秤、絞碎機、冰箱、量筒、恒溫箱、玻璃棒、過濾網(wǎng)、漏斗、紗布、滅菌瓶。
1.1.3 試劑 蒸餾水、生理鹽水、0.4%甲醇、氫氧化鋁膠。
(1)采集病料:病料取自癥狀典型,病程較長或瀕臨死亡的病豬,病料組織為病原體侵害的靶器官,針對本場的呼吸道綜合癥狀,應取肺、脾臟、淋巴結(jié)。采集的病料迅速作冷凍處理,以防變質(zhì)。
(2)切碎:用1 000 IU/ml的雙抗液沖洗病料表面,將冷凍的病料切成小塊(除去筋膜氣管及較粗的支氣管,摘除心臟,但一定要取出肺門淋巴結(jié)),便于放入攪拌機中。
(3)攪碎:將碎塊放入高速勻漿機中攪拌4~6次后,使之攪成肉糊。
(4)稀釋:按病料與生理鹽水1∶3~5的比例向肉漿糊中加入生理鹽水,使之成稀泥狀。
(5)過濾:將上述步驟制成的物質(zhì)分3次過濾,第1次用1層紗布過濾,第2次用2層紗布過濾,第3次用4層紗布過濾(每次的濾渣丟棄,濾液待用)。濾液加入生理鹽水至所需要制作的量。
(6)滅活:以500 ml的濾液加1.5~2 ml的0.4%甲醇,甲醇比例按照實際情況加入,然后將其放入36 ℃的恒溫箱中滅活,在滅活的過程中要搖勻,搖4~6次,24 h后取出。
(7)加鋁膠:500 ml的自家苗中加入100 ml的鋁膠,比例5∶1的比例加入所需的量。然后于2℃~8℃冷藏保存待用。
(8)無菌檢查將滅活后的自家苗接種在普通瓊脂培養(yǎng)基上,37 ℃培養(yǎng)24 h,未見細菌生長。
(9)安全性檢測:先用自家苗注射1~2窩小豬,觀察2 d,看有無發(fā)生過敏反應,注射部位發(fā)生炎癥。如果沒有上述現(xiàn)象說明自家苗制作成功。
2.1.1 試驗動物 1日齡杜大長三元仔豬217頭。
2.1.2 試驗試劑 勃林格喘氣苗(勃林格廠家生產(chǎn))、自家苗(本場自做)、生理鹽水。
2.1.3 試驗儀器 注射器、天平、稱、記錄表。
(1)分組選擇健康、胎次相近的新生杜大長三元仔豬21窩,隨機分為自家苗、喘氣苗、對照組3組,每組70頭左右。自家苗組分別于7日齡、21日齡每頭各肌肉注射1 ml、1.5 ml自家苗,喘氣苗組分別于7日齡、21日齡每頭各肌肉注射2 ml、2.5 ml勃林格喘氣苗,對照組肌肉注射生理鹽水。當100日齡時試驗結(jié)束。
(2)飼養(yǎng)管理與保?。?組豬只均按豬場實際生產(chǎn)模式進行:21日齡斷奶,40日齡轉(zhuǎn)入育成段;飼養(yǎng)管理與保健措施均同生產(chǎn)程序操作。
喘氣病發(fā)病率與頭耗藥分析:3組的出欄率、喘氣病發(fā)病率和頭均醫(yī)藥費統(tǒng)計情況詳見表1。
表1 出欄率,發(fā)病率和頭耗藥統(tǒng)計表
從表1可見,自己苗組分別比喘氣苗組和對照組出欄率分別提高4.3%、8.47%(P<0.05)、頭耗藥費分別減少1.55元、4.21元(P<0.05),喘氣病發(fā)生率分別下降了21.12%、39.95%(P<0.05),差異比較明顯,用自家組織苗后喘氣病發(fā)病率減少。這個結(jié)果也與試驗期間在生產(chǎn)上臨床觀察到的實際情況相吻合。
統(tǒng)計了試驗組、使用自家苗和對照組的增重情況,詳見表2。
表2 增重情況表
從表2可見,日增重分析全期總?cè)赵鲋刈约颐缃M比喘氣苗組和對照組分別多20 g、40 g(P<0.05),結(jié)合生產(chǎn)實踐觀察,且均勻度也好,這也是用了自家組織苗后發(fā)病率減少。表中7~40日齡的日增重,對照組反優(yōu)于2組試驗組,這是由于試驗之初受免疫應激反應的影響所致。
(1)本試驗結(jié)果表明,本豬場使用本場病豬制作自家苗免疫可提高豬的抗體水平,可減低一些疫病的發(fā)病率,甚至控制一些疫病的發(fā)生,從而使出欄率提高8.47%、平均每頭豬藥費降低4.21元、全期日增重提高40g,因此應用效果是肯定的。但自家組織苗的應用效果是受下列因素制約的。
①豬呼吸道病綜合征的病毒盡管感染性很強,但其傳染性并不強,只有在豬只密切接觸的情況下才會發(fā)??;其次,持續(xù)感染是該病毒的特征之一,也是本病最重要的流行病學特點。因此,要更好控制本病,必須在使用自家組織苗的同時,還要做好下列工作:合理建群,加強環(huán)境衛(wèi)生,保持豬圈干燥、加強豬舍通風換氣、保持舍內(nèi)適宜溫度,強化消毒隔離措施等。
②一種疫苗,要使其對特定傳染病產(chǎn)生免疫作用,必須具備2個條件:a.疫苗中必須含有相應的具有免疫原性的抗原;b.抗原必須達到一定量??乖刻?,不能產(chǎn)生有效抗體,而且還可能誘導免疫耐受。自家組織苗通常都是通過采集病豬的病料來制作的,然而各種病原對組織的嗜好不一樣,如藍耳病病毒嗜好肺部,所以,在肺部含量較多,豬瘟病毒嗜好內(nèi)皮細胞,所以,在腎臟和免疫器官中含量較多。如果把病豬所有內(nèi)臟一起搗碎制苗,那么各種抗原都將被稀釋,很難達到多種病各自對有效免疫的抗原劑量的要求。所以,在制作自家組織苗時,必須有的放矢,即疫苗用于預防何種疾病的,就應該選取該病的病原相對含量最多的器官或組織用來制苗。這樣免疫的效果會更好一些。
③一個豬場在使用自家苗的過程中為何開始時效果很好,但時間長了,效果卻會減弱呢?這是因為自家組織苗的效果,取決于病變組織中病毒的含量,當自家組織苗剛開始使用時,由于豬場在以前一直沒有使用過有效的疫苗,發(fā)病豬癥狀都比較典型,病變組織中病毒含量較多,而且,每批采集的病料中病毒含量的變異度也不大,所以,制作的自家組織苗的應用效果就較顯著而穩(wěn)定;但是,隨著豬場疾病逐步得到控制,越來越難以獲得典型病料,即使采集到自然發(fā)病豬的病變組織,其病毒含量也不及發(fā)病初期那么高,所制備的自家組織苗的應用效果自然不及以前。
(2)自家苗的作用機理不明,可能是自家苗中的特異性抗體作用,也可能是異體蛋白的刺激激活了免疫系統(tǒng)而提高了機體免疫力,所以,要慎重使用自家苗。