周壯海

【摘要】 目的：探討型糖尿?。?T2DM）患者血清游離脂肪酸（NEFA）和脂蛋白（a）（Lp（a））的水平變化及其與糖尿病的關(guān)系。方法：對(duì)50例T2DM患者和50例健康體檢者進(jìn)行血清NEFA、TG及Lp（a）的檢測(cè)并進(jìn)行比較。結(jié)果：T2 DM患者血清NEFA、TG及Lp（a）的水平明顯高于正常對(duì)照組（P<0.01）。結(jié)論：T2 DM患者血清NEFA及Lp（a）水平測(cè)定可作為糖尿病病情控制良好與否及監(jiān)測(cè)并發(fā)癥的參考指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 糖尿?。挥坞x脂肪酸；健康人群

【中圖分類號(hào)】R722.12

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【文章編號(hào)】1671- 0061（2014） 12 - 00048 - 02

隨著人們生活水平的提高和生活方式的改變，糖尿病的發(fā)病率越來(lái)越高。糖尿病是人類最常見的代謝性疾病，不僅表現(xiàn)為高血糖，脂代謝異常也是其常見表現(xiàn)。血清中游離脂肪酸（ FFA）的增加不僅參與了胰島素抵抗的發(fā)生，同時(shí)也有損害胰島B細(xì)胞分泌胰島素的功能和導(dǎo)致胰島細(xì)胞凋亡的作用，與型糖尿病發(fā)病密切相關(guān)。本文通過(guò)比較健康人與型糖尿病患者血清游離脂肪酸（ NEFA）和脂蛋白（a）（Lp（a））的水平變化及其與糖尿病的關(guān)系。

本文對(duì)50例T2DM患者血清NEFA及Lp（a）水平進(jìn)行回顧性分析并與健康人進(jìn)行比較，探討其與T2DM的關(guān)系。

1.資料與方法

1.1.一般資料根據(jù)2007年版《中國(guó)2型糖尿病防治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇2013年12月至2014年6月在我院住院的50例T2DM患者，其中男38例，女12例，年齡35-76歲，平均（61. 12±10.65）歲；同時(shí)選擇50例健康體檢者作為正常對(duì)照組，年齡38～75歲，平均（58.78 ±9.75）歲，排除高血壓、冠心病、糖尿病、肝腎疾病及血液病等。

1.2.儀器、試劑與方法NEFA測(cè)定采用酶法，試劑由積水醫(yī)療株式會(huì)社提供。TG測(cè)定采用比色法，試劑由德國(guó)羅氏診斷有限公司提供。Lp（a）測(cè)定采用免疫比濁法，試劑由上海北加生化試劑有限公司提供。儀器為日立7600全自動(dòng)生化分析儀。標(biāo)本采集：被檢者空腹12 h后于次日晨采集靜脈血2 ml，分離血清待檢。

1.3.分析方法（1）、儀器與試劑1100型HPLC儀配四元梯度泵（Agilent公司），熒光檢測(cè)器，100位自動(dòng)進(jìn)樣器，Elipse XDB - C8色譜柱，AETS（自制），DMF（減壓蒸餾后使用），四種脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)樣品（上海試劑廠），乙腈為光譜純，其余試劑均為分析純，水為去離子水（2）、色譜條件色譜柱：EclipseXDB - C8色譜柱（4.6mm*150mm，5um）流動(dòng)相：A：20%乙腈水溶液B：100%的乙腈流速：1.Oml/min柱溫：30℃。激發(fā)波長(zhǎng)：404nm，發(fā)射波長(zhǎng)：440nm梯度洗脫：15%B20min線性梯度到25%B，50min線性梯度到100%B，之后再運(yùn)行15min。（3）、血清預(yù)處理及分析取樣本血清100μl，加入盛有l(wèi)Omg無(wú)水K2 C03催化劑的2ml安培瓶中，再依次加入180μIN-N二甲基甲酰胺（DMF），120μl熒光衍生化試劑吖啶酮。

1.4.分析方法驗(yàn)證。分別取空白血清6份各100μl按照“血清預(yù)處理”項(xiàng)方法操作，不加內(nèi)標(biāo)，進(jìn)樣10μl分析，得色譜圖A；取空白血清100μl，分別加入十四酸、油酸、亞油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液100μl（125μmnol？L-1）、內(nèi)標(biāo)正十七酸100μl（125 μmol？L-l），依同法操作，得色譜圖B；取樣本血清100μl，加入內(nèi)標(biāo)正十七酸100μl（125μmol？L-1），依同法操作，得色譜圖C。比較A、B、C色譜圖中各FFA和內(nèi)標(biāo)物的出峰時(shí)間，計(jì)算RSD，確定有無(wú)雜質(zhì)的干擾。取高、中、低3個(gè)濃度（分別為20、100、300μnol？L-1）的正十四酸溶液，每個(gè)濃度連續(xù)進(jìn)樣5次，連續(xù)進(jìn)樣3個(gè)分析批，獲得測(cè)定結(jié)果的平均值和批間RSD，驗(yàn)證相關(guān)數(shù)據(jù)是否符合要求。取高、中、低3個(gè)濃度的正十四酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；在一45℃下分別放置ld、2d、4d、8d，重復(fù)測(cè)定三次以上。與新配置的標(biāo)準(zhǔn)正十四酸在相同條件下的測(cè)定值比較。

1.5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用SPSS 13.O統(tǒng)計(jì)軟件。檢測(cè)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ +s）表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

T2DM患者和正常對(duì)照組血清NEFA、TG及Lp（a）的檢測(cè)結(jié)果：T2 DM患者血清NEFA、TG及Lp（a）的水平明顯高于正常對(duì)照組（P

3.討論

NEFA是血清中未與甘油、膽固醇等酯化的脂肪酸，在血清中長(zhǎng)鏈的脂肪酸與白蛋白結(jié)合而成可溶狀態(tài)，短鏈脂肪酸具有較大的水溶性，可以以解離的形式存在，或以陰離子的形式存在。其來(lái)源主要由貯存于脂肪組織中的TG被分解釋放人血。正常情況下血清中NEFA含量極少，僅占總脂肪酸的5%一10%，主要與血清蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)到全身組織利用。NEFA有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性，可損害細(xì)胞膜、線粒體和溶酶體膜等，引起細(xì)胞內(nèi)微器損害，而且能增強(qiáng)細(xì)胞因子毒性，在許多疾病的病理生理中起重要作用。高濃度的NEFA可以通過(guò)多種途徑影響胰島素的作用及葡萄糖代謝，與胰島素抵抗的發(fā)生有著密切的關(guān)系。NEFA通過(guò)抑制葡萄糖氧化、抑制糖原合成，促進(jìn)糖異生，影響胰島素的分泌和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、影響細(xì)胞的凋亡等造成IR。

目前已有充分證據(jù)表明：血清中酯類水平的升高（主要是NEFA和TG）是導(dǎo)致IR的重要原因。本研究結(jié)果顯示，T2DM患者血清NEFA水平明顯升高，與正常對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.Ol）。說(shuō)明T2DM患者存在脂代謝紊亂。還有研究表明，在T2DM中，血脂各項(xiàng)指標(biāo)差異不明顯，NEFA和葡萄糖的變化相一致，在反應(yīng)機(jī)體脂代謝異常情況方面NEFA的變化要比甘油三酯和膽固醇的變化更敏感，因而可以把NEFA作為除葡萄糖之外另一個(gè)反映糖尿病的敏感指標(biāo)，定期檢測(cè)NE-FA水平，了解血脂水平，對(duì)T2DM的治療有重要意義，可作為糖尿病病情控制良好與否的參考指標(biāo)。

本文結(jié)果顯示糖尿病患者血清Lp（a）水平明顯高于正常對(duì)照組。Lp（a）是一種由肝臟合成的獨(dú)立的脂蛋白，與其他脂蛋白無(wú)相關(guān)性，腎臟是主要代謝場(chǎng)所，在血清中的濃度主要由遺傳決定，幾乎不受飲食、年齡、性別等因素影響，在個(gè)體中相對(duì)穩(wěn)定，男女間無(wú)顯著差異。Lp（a）的升高被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化的一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的危險(xiǎn)因子，與動(dòng)脈粥樣硬化的展有密切關(guān)系。而微血管病變是糖尿病患者嚴(yán)重的并發(fā)癥，Lp（a）的升高會(huì)促進(jìn)血栓形成，加重腎小球基底膜的損害，促進(jìn)腎小球硬化，加重腎損害甚至形成惡性循環(huán)，因此有效控制Lp（a）的水平對(duì)延緩糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展有重要意義。

綜上所述，糖尿病患者會(huì)有明顯的脂代謝異常，其在糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展中有重要作用，NEFA水平可作為糖尿病病情控制良好與否的參考指標(biāo)，Lp（a）的水平可作為監(jiān)測(cè)糖尿病并發(fā)癥的參考指標(biāo)，定期檢測(cè)其水平對(duì)糖尿病的早期診斷和防治具有現(xiàn)實(shí)的指導(dǎo)意義和臨床應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

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