尹紅，張喜娟，嚴(yán)祥，陳明，劉純

(1.自貢市第四人民醫(yī)院消化內(nèi)科，四川 自貢 643000；2.蘭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院干部病房，甘肅 蘭州 710000；3.蘭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，甘肅 蘭州 710000)

·論著·

糖尿病大鼠不同階段Ghrelin變化與胃排空關(guān)系的研究

尹紅1，張喜娟2，嚴(yán)祥2，陳明3，劉純3

(1.自貢市第四人民醫(yī)院消化內(nèi)科，四川 自貢 643000；2.蘭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院干部病房，甘肅 蘭州 710000；3.蘭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，甘肅 蘭州 710000)

目的觀察不同階段糖尿病大鼠Ghrelin的變化情況與胃運(yùn)動異常之間的聯(lián)系，了解在糖尿病的不同階段Ghrelin對胃排空的影響。方法66只Wistar大鼠隨機(jī)分為2周糖尿病組(DM-2w)及對照組（NC-2w）、8周糖尿病組(DM-8w)及對照組(NC-8w)、20周糖尿病組(DM-20w)和對照病組(NC-20w)。高脂料喂養(yǎng)誘導(dǎo)胰島素抵抗后以小劑量鏈脲佐菌素(STZ，30 mg/kg)腹腔注射，制作2型糖尿病大鼠模型。造模成功后第2周、第8周、第20周進(jìn)行核素法胃排空測定胃半排時間、50 min胃內(nèi)核素殘留率；酶聯(lián)免疫法測定血漿Ghrelin水平，免疫組化方法觀察胃組織Ghrelin免疫陽性細(xì)胞密度。結(jié)果(1)DM-2w組半排時間為(22.99±2.53)min，與NC-2w組(48.76±22.06)min比較胃排空明顯加快，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。DM-8w組半排時間為(35.24±11.00)min，與NC-8w組(43.59±13.79)min比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DM-20w組半排空時間為(84.02±27.54)min，與NC-20w組(47.79±13.22)min比較胃排空時間延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。各對照組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。(2)DM-2w組大鼠血漿Ghrelin水平顯著升高，與NC-2w組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。DM-8w組大鼠血漿Ghrelin水平與NC-8W組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DM-20w組大鼠血漿Ghrelin水平與NC-20w組及DM-2w組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。各對照組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。(3)血漿Ghrelin水平與胃半排空時間呈負(fù)的直線相關(guān)。結(jié)論(1)糖尿病的不同階段胃動力的變化有著不同的形式，在早期以胃動力加速為主；隨著糖尿病病程的進(jìn)展，胃排空逐漸減慢延遲。(2)在胃動力變化的過程中，血漿Ghrelin也呈現(xiàn)出與胃動力變化類似的變化趨勢。(3)血漿Ghrelin水平與胃半排空時間呈負(fù)相關(guān)。

胃排空；Ghrelin；糖尿病大鼠

在糖尿病的不同階段，胃動力異常具有不同的表現(xiàn)形式。胃動力障礙在糖尿病患者中發(fā)病率高達(dá)90%[1]。胃動力障礙在糖尿病早期常以胃排空加速為主；晚期由于各種因素的影響，?？梢娢概趴彰黠@延遲，這與文獻(xiàn)資料上Ghrelin在糖尿病中變化極為相似。Ghrelin是1999年Kojima等[2]發(fā)現(xiàn)的第一個生長激素促分泌劑受體的內(nèi)源性配體，是一種重要的腦-肽和胃腸激素，在胃腸運(yùn)動和消化液的分泌具有重要的生理意義。它在糖尿病早期升高，在糖尿病胃輕癱患者中含量明顯降低[34]。這種變化也許有助于解釋糖尿病胃腸病變中的早期胃排加速與中晚期的胃排空延遲。我們通過觀察糖尿病大鼠不同階段Ghrelin的變化，探討Ghrelin在糖尿病胃動力異常中所起的作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗動物SPF級雄性Wistar大鼠66只，體質(zhì)量(200±20)g，購自甘肅中醫(yī)學(xué)院SPF動物實(shí)驗中心。

1.1.2 藥品及主要試劑鏈脲佐菌素(Strepozotocin，STZ)，美國Sigma公司；99锝-亞錫噴替酸，上海欣科公司；Ghrelin試劑盒，美國ADL公司。

1.1.3 試驗儀器多功能時間分辨熒光免疫分析系統(tǒng)，Wallacvictor2；Infinia VC Hawkeye4 SPECT-CT (4Slices)system全數(shù)字化雙探頭，美國GE公司。

1.2 方法

1.2.1 動物模型建立66只Wistar大鼠基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性飼喂1周后隨機(jī)分為2周糖尿病組(DM-2w)及對照組(NC-2w)、8周糖尿病組(DM-8w)及對照組(NC-8w)、20周糖尿病組(DM-20w)和對照組(NC-20w)，每組10只。由于糖尿病大鼠免疫力低易死亡，為保證實(shí)驗順利進(jìn)行，DM-20w組增加6只大鼠，因此DM-20w組為16只大鼠。NC組繼續(xù)飼喂基礎(chǔ)飼料，6周后腹腔注射檸檬酸緩沖液，每只1 ml。DM組以高脂高糖飼料喂養(yǎng)6周，誘導(dǎo)胰島素抵抗[5]。然后實(shí)驗組經(jīng)腹腔注射檸檬酸緩沖液配制的鏈脲佐菌素(STZ，30 mg/kg，pH 4.4)；給藥72 h及1周后測定尾靜脈取血測定血糖，持續(xù)高于16.7 mmol/L并穩(wěn)定者為糖尿病大鼠。實(shí)驗結(jié)束DM-2w組剩余9只，DM-8w組剩余8只，DM-20w組剩余11只；NC-2w、 NC-8w和NC-20w組各10只?；A(chǔ)飼料購自蘭州大學(xué)實(shí)驗動物中心；高脂高糖飼料由66.5%基礎(chǔ)飼料、10%豬油、20%蔗糖、2.5%膽固醇、1%膽酸鈉混合加工制作而成。實(shí)驗過程中動物單籠喂養(yǎng)，自由攝食、飲水，不予降糖藥物控制血糖。

1.2.2 胃排空功能測定所有動物在最后一次飼喂后禁食12 h，不禁水。采用核素標(biāo)記半固體試餐單光子發(fā)射計算機(jī)斷層照像儀(Single photon emission computer tomography，SPECT)顯像技術(shù)測定胃半排空時間(Gastric emptying time，GET 1/2)與50 min胃內(nèi)核素殘留率(Retention rate，RR)。半固體試餐為放射性藥物99锝-亞錫噴替酸(99mTc-Diethylenetriamine pentacetic acid，99mTc-DTPA)標(biāo)記的面粉糊劑，體積為1 ml，由1 ml雙蒸水與0.5 g標(biāo)準(zhǔn)粉配制而成[6]；放射性藥物活度為3.7 MBq(0.1 mCi)。將大鼠置于特制的鼠板上，使大鼠體位固定，不能自由活動，同時將低能通用型準(zhǔn)直器的探頭視野中心置于大鼠腹部(窗寬20，矩陣128×128，放大倍數(shù)310)，以全胃作為感興趣區(qū)，即刻采集其放射性記數(shù)并顯像。將該計數(shù)作為初始計數(shù)，前20 min間隔5 min采集1次，后30 min間隔10 min采集1次，每幀采集時間為30 s，共計8幀，整個采集時間50 min。手工勾畫胃輪廓，得出胃排空時間(GET)1/2和50 min胃內(nèi)核素殘留率。餐后50 min胃排空率=(1-胃內(nèi)存留放射性核素量)×100%。

1.2.3 血漿Ghrelin含量測定1 ml靜脈血加入預(yù)冷的乙二胺四乙酸(EDTA-2)1 mg、抑肽酶500 kIU/ml混勻，4℃，3 000 r/min離心10 min，取上清，-80℃貯存。酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定血漿Ghrelin肽的含量，各步驟嚴(yán)格按照說明書操作。試劑盒為美國ADL公司產(chǎn)品，Catalog No：BA1619。ELISA測定范圍：200μg/ml，批內(nèi)變異系數(shù)＜5%。檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒的說明進(jìn)行操作，所有試驗在20℃～30℃室溫進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計量資料先進(jìn)行正態(tài)檢驗和方差齊性檢驗，滿足正態(tài)分布和方差齊性后組間用兩樣本t檢驗，組內(nèi)用單因素方差分析，病理指標(biāo)采用多組有序變量資料的秩和檢驗進(jìn)行分析。計量數(shù)據(jù)間的相關(guān)關(guān)系采用Pearson線性相關(guān)分析，檢驗水準(zhǔn)取α=0.05，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠體重各組大鼠初始體質(zhì)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。造模前高脂高糖飼料喂養(yǎng)的糖尿病組大鼠體質(zhì)量增長迅速，經(jīng)STZ誘導(dǎo)為糖尿病模型20周后實(shí)驗組大鼠體質(zhì)量較成模前下降。各組大鼠體重比較見表1、圖1。

表1 各組大鼠體重()

表1 各組大鼠體重()

注：與對照組比較：aP＜0.05；bP＜0.01。

組別NC-2w DM-2w NC-8w DM-8w NC-20w DM-20w只數(shù)10 9 10 8 10 11初始體重(g) 200±17.1 196±10.3 199±14.1 194±15.2 196±19.5 199±18.3造模時體重(g) 300±17.8 394±31.9b 319±21.3 396±19.5 302±18.9 403±17.2b實(shí)驗結(jié)束時體重(g) 332±23.5 369±21.1a379±30.5 327±22.6 363±26.6 285±26.2b

圖1 實(shí)驗期間大鼠體重變化

2.2 各組大鼠血糖比較各組大鼠初始血糖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DM-2w、DM-8w、DM-20w大鼠在腹腔注射STZ 72 h后其隨機(jī)血糖較正常對照組大鼠顯著增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。糖尿病各組造模血糖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，對照組造模前后血糖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DM-20w組造模后72 h及實(shí)驗結(jié)束時血糖較造模初期下降，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。NC-20w實(shí)驗結(jié)束時血糖較初始血糖有上升趨勢，但前后差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表2 各種大鼠血糖比較(，mmol/L）

表2 各種大鼠血糖比較(，mmol/L）

注：與對照組比較，aP＜0.01。

組別NC-2w DM-2w NC-8w DM-8w NC-20w DM-20w只數(shù)10 9 10 8 10 11初始血糖5.19±0.49 5.50±0.42 5.17±0.27 5.27±0.35 5.00±0.49 5.12±0.49造模后72 h血糖5.65±0.24 27.07±6.14a5.27±0.68 24.91±3.73a5.47±0.55 27.32±7.00a實(shí)驗結(jié)束時血糖5.24±0.30 26.94±5.73a5.77±0.29 26.40±3.27a6.25±0.56 22.34±2.75a

2.3 胃半排時間和50 min胃內(nèi)核素殘留率的比較DM-2w組半排時間為(22.99±2.53)min，與NC-2w組(48.76±22.06)min比較胃排空明顯加快，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。DM-8w組半排時間為(35.24±11.00)min，與NC-8w組(43.59±13.79)min比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DM-20w組半排空時間為(84.02±27.54)min，與NC-20w組(47.79± 13.22)min比較胃排空時間延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。各對照組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DM-2w組的50 min胃內(nèi)核素殘留率較NC-2w組明顯減少(P＜0.01)。DM-8w組的50 min胃內(nèi)核素殘留率較NC-8w組減少(P＞0.05)。DM-20w組50 min殘留率較NC-20w組明顯增加(P＜0.01)。糖尿病各組50 min胃內(nèi)殘留率之間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，對照組各時間點(diǎn)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表3。

表3 各種大鼠胃排空時間50min胃內(nèi)核素殘留率()

表3 各種大鼠胃排空時間50min胃內(nèi)核素殘留率()

注：與對照組比較aP＜0.05；bP＜0.01。與DM-20w組比較：aP＜0.05；bP＜0.01。

組別NC-2w DM-2w NC-8w DM-8w NC-20w DM-20w只數(shù)10 9 10 8 10 11 GET1/2(min) 48.76±22.06 22.99±2.53bd43.59±13.79 35.24±11.00c47.79±13.22 84.02±27.54a50 min胃內(nèi)核素殘留率(%) 45.40±18.97 9.44±5.73bd41.33±16.34 31.50±15.62c46.50±19.00 62.36±19.27a

2.4 胃排空曲線DM-2w組各時間點(diǎn)上胃內(nèi)殘留率均低于NC-2w組，胃排空明顯加快；DM-8w組各時間點(diǎn)上胃內(nèi)殘留率與NC-8w組相似；DM-20w組各時間點(diǎn)上胃內(nèi)殘留率均高于NC-20w組，胃排空延遲。對照組在各時間點(diǎn)的胃內(nèi)殘留率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(圖2)。

圖2 各組大鼠胃排空曲線

2.5 血漿Ghrelin含量比較DM-2w組大鼠血漿Ghrelin水平顯著升高，與NC-2w組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。DM-8w組大鼠血漿Ghrelin水平與NC-8W組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。DM-20w組大鼠血漿Ghrelin水平與NC-20w組及DM-2w組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。各對照組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)(圖3)。

圖3 各組血漿Ghrelin含量比較

2.6 血漿Ghrelin含量與胃半排空時間相關(guān)性分析Pearson相關(guān)系數(shù)r=-0.449，P=0.007，按0.01水準(zhǔn)，可以認(rèn)為血漿Ghrelin含量與胃半排空時間呈負(fù)的直線相關(guān)(圖4)。

圖4 血漿Ghrelin含量與胃半排空時間相關(guān)性分析

3 討論

高脂飼料喂養(yǎng)加小劑量STZ注射誘導(dǎo)的糖尿病模型是通過高脂肪飼料喂養(yǎng)以誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生肥胖和胰島素抵抗；再以小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射，利用STZ選擇性作用于大鼠的胰腺，使胰腺的β細(xì)胞產(chǎn)生不可逆的損傷，引起胰島素分泌相對不足，產(chǎn)生高血糖，與臨床上2型糖尿病的發(fā)病過程類似，并具有典型的2型糖尿病的代謝特征，是一種比較理想的2型糖尿病模型[7]。目前國外常采用的2型糖尿病模型，如ob/ob小鼠和OL ETF大鼠[8]，遺傳因素在發(fā)病機(jī)制中起著主導(dǎo)作用，價格昂貴，限制了它在國內(nèi)的使用。高脂飼料加小劑量STZ所制作的糖尿病大鼠模型動物具有來源充分、價格便宜、造模方法簡單的特點(diǎn)，目前是在研究2型糖尿病的病理生理實(shí)驗研究及治療糖尿病藥物的實(shí)驗使用最為廣泛的糖尿病大鼠模型。

在糖尿病的病程中，合并胃動力異常在臨床上很常見，多表現(xiàn)為上腹脹、早飽、噯氣、惡心、嘔吐等。據(jù)統(tǒng)計，50%～60%的1型糖尿病患者固體食物和/或營養(yǎng)性液體食物的胃排空時間顯著延遲[9]；但是，在2型糖尿病、非胰島素依賴型糖尿病和沒有自主神經(jīng)病變的1型糖尿病的早期患者中，?？捎^察到胃排空加速的情況[10-11]。在STZ誘導(dǎo)的早期糖尿病大鼠模型和BB的自發(fā)性糖尿病大鼠模型中胃排空加速也有報道[3]。當(dāng)前多集中在對糖尿病并發(fā)胃輕癱上的研究上，對導(dǎo)致早期糖尿病胃動力的加速機(jī)制研究還沒有進(jìn)行深入的探討，更缺乏以一個整體的觀念去關(guān)注糖尿病疾病發(fā)展過程中的胃動力變化。

糖尿病患者胃動力異常發(fā)生的機(jī)制尚不十分明確，推測與消化系統(tǒng)的神經(jīng)病變、血管病變、胃平滑肌病變及高血糖對胃起搏點(diǎn)的影響有關(guān)。但這都不足以解釋在糖尿病的不同階段，糖尿病的胃動力障礙從早期的胃排空加速到晚期的排空延遲這一改變。Ghrelin的出現(xiàn)為我們研究這一問題提供了一個新的思路。Ghrelin是在大鼠胃中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性生長激素的一個配體。它由胃的X/A樣細(xì)胞產(chǎn)生，翻譯加工后釋放入血，第三位絲氨酸上的辛?；撬闹饕幕钚曰鶊F(tuán)。Ghrelin具有多種生理作用，通過下丘腦刺激食欲、增加胃酸分泌、促進(jìn)胃腸蠕動[12]；加速大鼠、人和小鼠對固體及營養(yǎng)性液體的排空。國外最新的研究發(fā)現(xiàn)在糖尿病早期血漿Ghrelin水平明顯增高，通過增加幽門與十二指腸的協(xié)調(diào)性運(yùn)動加速了胃排空。在晚期糖尿病及糖尿病胃輕癱患者中Ghrelin含量明顯降低[4]。這種變化也許有助于解釋糖尿病胃腸病變中的早期胃排加速與中晚期的胃排空延遲這一現(xiàn)象。

胃對固體和液體的排空有著不同的機(jī)制。對液體的排空來自于胃和十二指腸之間的壓力梯度；固體的排空由胃竇、幽門和十二指腸的協(xié)調(diào)性運(yùn)動所調(diào)節(jié)，竇與幽門的協(xié)調(diào)性運(yùn)動在大鼠對固體的排空也起著重要的作用。Ghrelin加速胃的排空機(jī)制，也主要是刺激胃竇、幽門和十二指腸的協(xié)調(diào)性運(yùn)動。為了證實(shí)Ghrelin參與了糖尿病早期胃排空加速和晚期胃排空延遲與胃輕癱的發(fā)展過程這個假設(shè)，我們通過高脂飲食加小劑量的STZ腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型，測定糖尿病大鼠不同階段的血漿Ghrelin水平；并利用核素胃排空法測定的胃排空時間、50 min胃內(nèi)核素殘留率。放射性核素胃排空檢查能確切檢查液體和固體從胃排空的速度，具有非侵入性、不干擾正常生理、可定量、重復(fù)性好等特點(diǎn)，是檢測胃排空的“金標(biāo)準(zhǔn)”。固體食物排空是檢測胃功能不全的早期靈敏指標(biāo)，但由于方法復(fù)雜，使其臨床應(yīng)用受到了一定限制，有研究表明半固體試餐能較好地反映胃的排空情況[13]。本實(shí)驗采用核素法測定糖尿病大鼠的半固體胃排空，采集的圖像清晰，使動物實(shí)驗中胃排空功能的測定更接近人類的胃排空方法。

實(shí)驗結(jié)果顯示，Ghrelin參與了從2周糖尿病大鼠胃排空加速到20周胃排空減慢的發(fā)病過程。根據(jù)文獻(xiàn)，糖尿病的自主神經(jīng)病變出現(xiàn)在注射STZ后6～8周[14]。由于排除了自主神經(jīng)和血管病變的影響，我們推測，糖尿病2周時，大鼠胃排空的加速主要是由于升高的血漿Ghrelin水平所引起?，F(xiàn)糖尿病后期胃輕癱的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，普遍認(rèn)為主要與神經(jīng)病變、胃腸激素異常、高血糖、胃微血管和平滑肌病變、Cajal間質(zhì)細(xì)胞缺失、幽門螺桿菌感染等有關(guān)[15]，降低的血漿Ghrelin水平可能只是導(dǎo)致胃動力障礙的一個方面。

胰島素是影響血漿Ghrelin水平的重要因素，使用胰島素灌流離體的鼠胃，顯示胃內(nèi)的Ghrelin分泌受到抑制，提示胰島素對Ghrelin水平具有調(diào)節(jié)作用[16]。高血漿胰島素鉗夾實(shí)驗研究顯示，在人和大鼠中胰島素對Ghrelin的分泌產(chǎn)生抑制作用[17]，但是它不能解釋后期的血漿Ghrelin水平降低與胰島素的關(guān)系，或許是由于在糖尿病后期自主神經(jīng)病變和血管病變等多種因素亦會對胃排空產(chǎn)生一定的影響，也有可能與不同階段胰島素對胃運(yùn)動功能的影響不盡相同所致。

糖尿病后期，胃內(nèi)分泌Ghrelin的免疫活性細(xì)胞數(shù)量減少是引起血漿Ghrelin水平的下降的主要原因。此外，Ghrelin分泌受到來自于自主神經(jīng)的迷走神經(jīng)影響。而在糖尿病患者中，可以觀察到食管胃迷走神經(jīng)常出現(xiàn)形態(tài)學(xué)的異常，如神經(jīng)軸突脫髓鞘、軸索萎縮等變化[18]。在用STZ制作的糖尿病大鼠模型上也發(fā)現(xiàn)了神經(jīng)樹突腫脹，腎上腺素能、膽堿能神經(jīng)結(jié)構(gòu)異常[19]。因此，自主神經(jīng)病變亦應(yīng)該是導(dǎo)致血漿Ghrelin降低的另一原因。

就目前研究結(jié)果來看，Ghrelin參與了糖尿病胃動力異常的發(fā)病過程，但不是唯一因素。Ghrelin表達(dá)與分泌的調(diào)控機(jī)制比較復(fù)雜，在許多重要的問題上缺乏一致性的意見，而機(jī)體是統(tǒng)一的整體，糖尿病時全身代謝紊亂，影響血漿Ghrelin水平的因素較多。我們尚不清楚引起Ghrelin水平在糖尿病早期升高和后期降低這一變化的真正原因，也不清楚早期升高的Ghrelin水平能否被胰島素的治療所逆轉(zhuǎn)。對Ghrelin的深入研究將有助于更好地探討糖尿病胃動力障礙的機(jī)制。

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Relationship between ghrelin and gastric emptying in diabetic rats at different stages.

YIN Hong1,ZHANG Xi-juan2,YAN Xiang2,CHEN Ming3,LIU Chun3.1.Department of Gastroenterology,the Fourth People's Hospital of Zigong,Zigong 643000,Sichuan,CHINA;2.VIP Department,the First Affiliated Hospital of Lanzhou University，Lanzhou 710000,Gansu,CHINA；3.Department of Nuclear Medicine,the First Affiliated Hospital of Lanzhou University，Lanzhou 710000,Gansu,CHINA

ObjectiveTo investigate the relationship between ghrelin and gastric emptying in diabetic rats at different stages.MethodsSixty-six Wistar rats were randomly divided into six groups∶2 week diabetic group (DM-2w group)and 2-week control group(NC-2w group),8-week diabetic group(DM-8w group)and 8-week control group(NC-8w group),20-weeks diabetic group(DM-20w group)and 20-week control group(NC-20w group). Type 2 diabetes model was induced in rats by intraperitoneal injection of a low dose of streptozotocin plus long-term high fat and high caloric laboratory chow.The gastric emptying half time(GET1/2)and 50 min residual rate were measured by single photon emission computed tomography(SPECT),the level of ghrelin in plasma was detected by Enzyme-linked immunosorbent test(ELISA)and ghrelin immunoreactive positive cells were observed in gastric tissue at 2 weeks,8 weeks or 20 weeks,respectively before the rats were sacrificed.Those data were compared between the control and model groups.Results(1)The GET1/2 in DM-2w group was significantly faster than that in NC-2w group[(22.99±2.53)min vs(48.76±22.06)min,P＜0.01].There was no difference between DM-8w group and NC-8w group(P＞0.05).The GET1/2 in DM-20w group was significantly lower than that in NC-20w group[(84.02±27.54)min vs(47.79±13.22)min,P＜0.01].(2)The increased size of plasma ghrelin level in DM-2w group was significantly higher than that in DM-2w group(P＜0.05).There were no differences between DM-8w group and NC-8W group(P＞0.05). There were significant differences between DM-20w group and NC-20w group and DM-2w group(P＞0.05).(3)There was a negative correlation between plasma ghrelin level and gastric half-emptying time.Conclusion(1)The changes of gastric motility varied at different stages of diabetes.In early stage,it presented accelerates gastric motility. With the progression of diabetes,gastric emptying gradually slowed down.(2)With the changes of gastric motility, ghrelin in plasma showed a similar trending with gastric motility.(3)There was a negative correlation between plasma ghrelin level and gastric half-emptying time.

Gastric emptying;Ghrelin;Diabetic rats

R-332

A

1003—6350（2014）19—2809—05

2014-04-15)

甘肅省醫(yī)藥衛(wèi)生科研項目（編號：GSWST09-04）

嚴(yán)祥。E-mail：Yanxiang528@sohu.com

doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2014.19.1108