謝 楊，李建新

（石家莊鐵路公安處 刑事技術(shù)支隊(duì)，河北 石家莊 050000）

1985年，英國遺傳學(xué)家Jeffreys等用RFLP（限制性片段長度多態(tài)性）的方法分析人類基因組DNA，檢測(cè)到多條譜帶，有如人的指紋一樣，具有高度的個(gè)體特異性，稱之為“DNA指紋”技術(shù)，開創(chuàng)了DNA識(shí)別技術(shù)的歷史先河。隨著DNA多態(tài)性檢測(cè)系統(tǒng)的大量出現(xiàn)，以PCR方法為基礎(chǔ)進(jìn)行的檢驗(yàn)，其個(gè)體識(shí)別率顯著提高，目前已不使用DNA指紋技術(shù)。同時(shí)，STR基因座以其多態(tài)性好，分型更簡便，靈敏度更高，對(duì)于微量、降解檢材亦顯示出較強(qiáng)的檢驗(yàn)?zāi)芰?，在結(jié)果分析方面易于標(biāo)準(zhǔn)化，易于實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的共享等特點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用。目前應(yīng)用STR復(fù)合擴(kuò)增技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)，已經(jīng)成為生物檢材檢驗(yàn)、鑒定的主要手段。

交通事故按交通運(yùn)輸方式可分為道路、鐵路、航空、船舶交通事故四類［1］。隨著DNA技術(shù)的發(fā)展，DNA檢測(cè)廣泛地應(yīng)用于道路交通事故案件中肇事車輛和駕駛?cè)藛T的確認(rèn)［2］。但在其應(yīng)用于鐵路交通肇事機(jī)車認(rèn)定時(shí)，由于DNA提取環(huán)節(jié)存在問題，成功率并不高?；疖囁俣瓤?，因夜晚、霧霾、彎道等可導(dǎo)致瞭望條件不佳的客觀因素的存在，個(gè)別火車司機(jī)在事故發(fā)生后并不知道已經(jīng)撞人，而是由隨后經(jīng)過的司機(jī)發(fā)現(xiàn)。在這種情況下只能依靠DNA比對(duì)認(rèn)定肇事車輛。目前，DNA檢測(cè)已廣泛地應(yīng)用于道路交通事故案件的偵破工作。同樣，其在鐵路交通事故肇事機(jī)車的認(rèn)定中也具有舉足輕重的地位。由于火車相對(duì)于汽車具有質(zhì)量大、速度快、需按列車運(yùn)行圖運(yùn)行等特點(diǎn)，所以在火車機(jī)車上提取相關(guān)生物檢材的方法也具有特殊性。

一、案例材料

2013年石家莊鐵路公安處管轄范圍內(nèi)共發(fā)生鐵路交通事故50余起，其中包含5起需要認(rèn)定肇事機(jī)車的案件。

此類案件的處理，需提取機(jī)車上可疑斑跡和尸體血樣進(jìn)行DNA比對(duì)（結(jié)果見表1）。采用干濕兩步棉簽擦拭法將機(jī)車上的可疑斑跡轉(zhuǎn)移，之后將現(xiàn)場(chǎng)轉(zhuǎn)移的棉簽和尸體血一并送檢，進(jìn)行DNA提取、擴(kuò)增和檢測(cè)。采用Chelex-100法進(jìn)行DNA提取，應(yīng)用Identifiler系統(tǒng)進(jìn)行STR（短串聯(lián)重復(fù)序列）基因座復(fù)合擴(kuò)增；擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)ABI-3130XL型遺傳分析儀進(jìn)行檢測(cè)，得到最終STR分型結(jié)果，將現(xiàn)場(chǎng)轉(zhuǎn)移的可疑斑跡與尸體血進(jìn)行同一認(rèn)定。

其中案例1提取的可疑斑跡位于排障器左側(cè)，案例2提取的可疑斑跡位于機(jī)車前輪，檢驗(yàn)結(jié)果都是非人源性的，初步分析為機(jī)車在行駛過程中撞擊或者碾軋動(dòng)物所形成，均不能認(rèn)定肇事機(jī)車。案例3提取的可疑斑跡位于機(jī)車左前部，成功確定了肇事機(jī)車。案例4提取的可疑斑跡位于機(jī)車前部腳踏板處，雖然是人源性的，但是和死者為不同來源。究其原因，可能為該部位曾經(jīng)遺留有他人的生物檢材，或者在物證提取及后續(xù)送檢及檢驗(yàn)過程中出現(xiàn)污染。案例5，共有兩個(gè)嫌疑機(jī)車，分別為機(jī)車1和機(jī)車2。在對(duì)兩個(gè)機(jī)車分別勘驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)機(jī)車上都有疑似為血跡的可疑斑跡。機(jī)車1上血跡集中分布于機(jī)車右前側(cè)，我們提取了5份疑似血跡；機(jī)車2則在其機(jī)車左側(cè)及其右側(cè)排障器上集中分布有噴濺狀疑似血跡，我們分別在1室左側(cè)1輪前彈簧處提取1處疑似血跡，在右側(cè)提取4處。結(jié)果顯示只有機(jī)車2的1室左側(cè)1輪前彈簧處提取的可疑斑跡為人源性血跡并且和死者為同一來源。機(jī)車1上提取的5處和機(jī)車2上其他4處可疑斑跡均為非人源性，或?yàn)闄C(jī)車撞擊或碾軋動(dòng)物所形成。而后結(jié)合尸體位置和現(xiàn)場(chǎng)的血跡分布，推斷撞擊部位為機(jī)車左前部，DNA檢驗(yàn)結(jié)果和現(xiàn)場(chǎng)勘查結(jié)論也相互吻合。

表1 5例鐵路交通事故人車提取的D NA比對(duì)情況

二、案例相關(guān)問題分析

對(duì)以上案例數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，用DNA比對(duì)的方法進(jìn)行肇事機(jī)車的確認(rèn)，比對(duì)成功率為40%，檢材有效率僅為9%。由此可見依照常規(guī)的思路，在易發(fā)生碾軋或撞擊的部位（機(jī)車前部車輪、機(jī)車前部、排障器）提取肉眼觀察疑似為血跡的斑跡，進(jìn)行DNA檢驗(yàn)，成功率很低，提取到的絕大部分為非人源性物質(zhì)。

（一）鐵路交通事故肇事機(jī)車DNA的特點(diǎn)

通過對(duì)上述鐵路交通事故肇事機(jī)車DNA存在情況進(jìn)行研究分析，發(fā)現(xiàn)其有以下幾個(gè)特點(diǎn)。

第一，鐵路線路為開放場(chǎng)地，且比較偏僻，常有動(dòng)物活動(dòng)，火車碾軋或撞擊動(dòng)物后所形成的血跡及組織會(huì)粘附在機(jī)車上，僅依靠直觀判斷很難區(qū)分其為動(dòng)物組織還是人體組織。在以上幾個(gè)案例中，機(jī)車上可疑斑跡均檢出非人源性物質(zhì)。

第二，火車速度很快，易使粘附不牢的組織或斑跡滅失；或當(dāng)懷疑某車為肇事機(jī)車時(shí)，其距離事發(fā)地已有數(shù)百公里，要追趕此次列車相當(dāng)困難，而當(dāng)此機(jī)車到達(dá)終點(diǎn)或者回到事發(fā)地時(shí)可能已經(jīng)是一天或者數(shù)天以后，這種情況也容易造成物證的滅失，極不利于物證的保護(hù)和提取。同時(shí)，機(jī)車極有可能在這幾天內(nèi)再次撞擊或碾軋動(dòng)物，造成混淆，降低物證檢出率。如案例3和案例5，機(jī)車上既檢出了人源性物質(zhì)并且得到同一認(rèn)定的結(jié)論，同時(shí)也檢出了非人源性物質(zhì)。

第三，鐵路交通事故和公路交通事故有所不同。火車以保證運(yùn)行通暢為第一要?jiǎng)?wù)，除極端情況不會(huì)臨時(shí)停車，且進(jìn)站時(shí)間有限，不利于機(jī)車上物證的提取和保存。這也要求技術(shù)工作者必須充分利用機(jī)車進(jìn)站的時(shí)機(jī)提取物證，提高效率。

第四，火車機(jī)車的材質(zhì)為特殊材料，硬度大，撞擊物體后，不易留下撞擊痕跡，難以從機(jī)車外觀確定撞擊部位，增加了物證發(fā)現(xiàn)和提取的難度。以上幾個(gè)案例中機(jī)車均無明顯撞擊痕跡。

第五，按照鐵路部門相關(guān)規(guī)章制度，機(jī)車到站后必須進(jìn)行清潔。肇事機(jī)車被清洗后，物證可能絕大部分或者全部滅失，提取到相關(guān)物證的可能性大大降低。如第一次提取的物證經(jīng)檢驗(yàn)未得到理想結(jié)果，進(jìn)行復(fù)勘，再次提取到相關(guān)物證的可能性微乎其微。

（二）鐵路交通事故肇事機(jī)車上DNA提取應(yīng)注意的問題

針對(duì)鐵路交通事故肇事機(jī)車上DNA提取的以上幾個(gè)特點(diǎn)，為了提高物證檢出率，更好地為案件的偵破提供證據(jù)支持，謹(jǐn)對(duì)DNA提取工作提出以下幾點(diǎn)建議。

第一，根據(jù)尸體位置、損傷情況和現(xiàn)場(chǎng)血跡分布，重建事故發(fā)生過程，確定機(jī)車碾軋或撞擊部位，重點(diǎn)提取，提高成功率。

第二，機(jī)車碾軋或撞擊動(dòng)物的發(fā)生率很高，應(yīng)進(jìn)行人類種屬特異性檢驗(yàn)，以確定是否為人體組織。如條件允許，應(yīng)在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行初篩，以提高發(fā)現(xiàn)人源性斑跡的可能性。

第三，通過協(xié)調(diào)，爭取讓在火車經(jīng)過地點(diǎn)的技術(shù)單位給予協(xié)助，第一時(shí)間提取物證，最大程度地保護(hù)物證，減少滅失，避免污染。

第四，以高度負(fù)責(zé)的工作態(tài)度，認(rèn)真細(xì)致地勘驗(yàn)嫌疑車輛，不放過任何疑點(diǎn)。提高事故處理人員的專業(yè)素質(zhì)，規(guī)范DNA檢材的發(fā)現(xiàn)、提取、包裝及送檢程序，避免人源性污染和物證之間的交叉污染。

三、鐵路交通事故肇事機(jī)車DNA提取流程

首先進(jìn)行準(zhǔn)備工作。（1）盡可能先進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)勘查，推斷機(jī)車撞擊或碾軋部位，在此部位重點(diǎn)提取。（2）戴好帽子、口罩、手套，做好個(gè)人防護(hù)工作，禁止赤手觸摸可疑斑跡及檢材，避免人源性污染。（3）準(zhǔn)備好提取用具，所用提取用品必須為一次性用具或經(jīng)高溫高壓處理，禁止重復(fù)使用，避免檢材之間的互相污染。

其次進(jìn)行DNA提取工作。（1）根據(jù)檢材附著的不同載體，提取方法有擦拭、剪切、刮削、吸附、浸泡、鋸鑿、挖取等。機(jī)車車體材質(zhì)質(zhì)地致密，宜采取干濕兩步擦拭法進(jìn)行轉(zhuǎn)移提取，同時(shí)提取檢材附近的空白材料作為對(duì)照。（2）具體方法為根據(jù)血量的多少，準(zhǔn)備適量的棉簽，用蒸餾水浸潤（不要留有多余水分），然后仔細(xì)擦拭可疑斑跡，將其全部轉(zhuǎn)移，在陰涼處晾干，每份檢材用紙袋獨(dú)立包裝，詳細(xì)記錄提取部位。（3）盡量在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行人類種屬特異性檢驗(yàn)，使用抗人血紅蛋白金標(biāo)記試紙條進(jìn)行檢測(cè)。其原理是雙抗體夾心法。操作步驟為剪取疑含有人血斑的檢材置于0.5ml離心管內(nèi)，加入450μl純水，室溫放置，不時(shí)振蕩，將試劑條帶MAX標(biāo)記一端插入上清中，觀察結(jié)果。陽性結(jié)果：二條帶，質(zhì)控線及檢測(cè)線均為陽性，表示檢出人血；陰性結(jié)果：一條帶，僅有質(zhì)控線，表示未檢出人血反應(yīng)；無效結(jié)果：無帶或僅有檢測(cè)線。在使用此種方法時(shí)應(yīng)注意平行設(shè)置陰陽性對(duì)照。避免由于試紙條自身的問題出現(xiàn)假陰性或假陽性，從而錯(cuò)失有價(jià)值的物證。

最后進(jìn)行DNA送檢工作。（1）送檢工作應(yīng)盡快進(jìn)行，以避免檢材的腐敗降解，影響后續(xù)的檢驗(yàn)結(jié)果。（2）運(yùn)送過程中應(yīng)避免互相摩擦、沖撞及失落，易碎檢材應(yīng)防止擠壓和震動(dòng)，易散失的檢材應(yīng)嚴(yán)密包裝。

在鐵路交通事故中，肇事機(jī)車處于室外暴露環(huán)境，易被污染，而且受陽光暴曬等作用后DNA易于降解?；赟TR復(fù)合擴(kuò)增技術(shù)的DNA檢驗(yàn)，由于其具有準(zhǔn)確率高、靈敏度高、種屬特異性好，對(duì)微量降解檢材亦可獲得較好結(jié)果的特點(diǎn)，在鐵路交通事故中肇事機(jī)車的認(rèn)定中必將發(fā)揮重要作用。%

［1］謝先奇.DNA檢驗(yàn)技術(shù)在交通事故案件中的應(yīng)用［J］.廣東公安科技，2011，（1）.

［2］閔建雄.法醫(yī)損傷學(xué)（第2版）［M］.北京：中國人民公安大學(xué)出版社，2010：403.