康慶偉，閻 姝

艾地苯醌(Idebenone)是一種難溶于水的有機合成藥物（結構式見圖1），具有良好的抗氧化活性，能激活腦線粒體呼吸活性，改善大腦能量代謝，刺激神經生長因子的合成，是一種能量代謝改善藥物，在治療腦血管疾病方面有廣泛的療效[1-2]，對人體無毒，副作用也相對較少。但是由于其首過效應大，生物利用度低，限制了其臨床應用。納米結構脂質載體作為一種緩釋載體，能夠提高其生物利用度并能夠很好的解決這些問題。本文通過比較不同形式的艾地苯醌載藥方式的體外釋放情況，用以控制制劑質量，評價制劑工藝。

圖1 艾地苯醌分子結構式

1 材料與方法

1.1 材料 高效液相色譜儀（LabAlliance，美國）；超聲波清洗脫氣機（HS3120，天津東科儀器有限公司）；恒溫恒濕箱（LHS-150SC，上海一恒科技有限公司）；小型空氣浴精密恒溫搖床（THZ-03M2，北京西化儀器科技有限公司）；

艾地苯醌（上海德默化學技術有限公司）；TDB-NE，TDB-NLC（實驗室自制），Tween 80（天津市江天化工技術有限公司）；甲醇（色譜級，天津市江天化工技術有限公司）；透析袋（截留分子量MWCO10000，美國）；0.22 μm微孔濾膜（上海市新亞凈化器件廠）。

1.2 檢測條件 采用HPLC方法進行檢測，色譜條件:色譜柱:μbandpadTM C18(3.9×300mm)；流動相:甲醇:水(72:28)；流速:1.0mL/min；檢測波長:278 nm；進樣量:20 μL。

1.3 體外釋放實驗方法 采用動態(tài)透析法進行體外釋放實驗。透析袋置于釋放介質（PH 7.4的磷酸鹽緩沖液，含0.3%（w/v）的吐溫80）中浸泡12 h至滲透擴散平衡，取出一端用透析夾夾緊，精密量取1.0mL的艾地苯醌納米結構脂質載體分散液（艾地苯醌載藥濃度為5mg/mL）置于預先盛有1mL釋放介質的透析袋中，立即夾緊另一端，置含100mL釋放介質的250mL錐形瓶中，保持搖床轉速為70 r/min。分別于0.5，1.5，4，6，12，18，24，48，72 h取樣1mL，同時補加等溫同體積的釋放介質。樣液加入到4mL流動相中，混合均勻，經納米乳膜（0.22 μm）過濾后HPLC法測定其在278 nm下的峰面積，代入回歸方程，求得測定的濃度，以測定濃度與已知濃度之比計算藥物累積釋放百分率。3次平行試驗。

1.4 不同劑型藥物釋放度測定 精密量取1.0mL不同劑型:艾地苯醌自由藥物（溶于Miglyol 812油相），艾地苯醌納米結構脂質載體，艾地苯醌納米乳、艾地苯醌納米結構脂質載體水凝膠，艾地苯醌納米乳水凝膠的艾地苯醌載體分散液進行實驗。

1.5 釋放介質的影響 取3個透析袋分別模擬胃液、腸液和體液環(huán)境[3-4]，置于不同釋放介質（pH 1.2的磷酸鹽緩沖液，pH 6.8的磷酸鹽緩沖液，pH 7.4的磷酸鹽緩沖液，均含0.3%（w/v）的吐溫80）中浸泡12 h至滲透擴撒平衡，取出一端用透析夾夾緊，分別精密量取1.0mL艾地苯醌納米結構脂質載體和艾地苯醌納米乳（表面活性劑為Tween 80，艾地苯醌載藥濃度為5mg/mL）分散液進行實驗。

1.6 攪拌速度的影響 分別精密量取1.0mL艾地苯醌納米結構脂質載體和艾地苯醌納米乳，在70 r/min的搖床轉速和100 r/min的搖床轉速下進行實驗。

2 結果

NE劑型體外釋放較快，其釋放曲線始終處于NLC劑型體外釋放曲線上方，在24 h時約有22%的藥物被釋放；NLC劑型體外釋放速率次之，在24 h時約有17%的藥物被釋放；自由藥物體外釋放速率最慢，在24 h時只有5%的藥物被釋放（見圖2）。

圖2 不同劑型對藥物釋放的影響

NLC劑型和NLC水凝膠劑型體外釋放速率前期基本相近，NLC劑型體外釋放曲線和NLC水凝膠劑型體外釋放曲線在24 h前基本無區(qū)別，在48 h后，NLC水凝膠的釋放速率明顯慢于NLC水凝膠的釋放速率。

NE劑型和NE水凝膠劑型體外釋放速率前期也是基本相近，NE劑型體外釋放曲線和NE水凝膠劑型體外釋放曲線在24 h前基本無區(qū)別，在48 h后，NE水凝膠的釋放速率明顯慢于NE水凝膠的釋放速率。

NLC劑型在人工胃液（pH 1.2）、人工腸液（pH 6.8）和人工體液（pH 7.4）三種人體內環(huán)境中釋放速度相近，在不同釋放介質中藥物釋放僅有一點的差距。分析IDB的NLC劑型在不同釋放介質中釋放的不同，可能與釋放介質的pH和溶解性有關。最終結果是艾地苯醌NLC在pH6.8的人工腸液環(huán)境下釋放稍快，在pH7.4的人工體液環(huán)境下釋放稍慢，證明艾地苯醌NLC在腸液中的溶出比較明顯（見圖3、圖4）。

圖3 釋放介質對艾地苯醌NLC釋放的影響

圖4 釋放介質對艾地苯醌NE釋放的影響

NE劑型在人工胃液（pH 1.2）和人工體液（pH 7.4）兩種人體內環(huán)境中釋放速度相近，在兩種釋放介質中藥物釋放僅有一點的差距。但是艾地苯醌NE劑型在人工腸液（pH 6.8）中的釋放速度相對來說非?？欤?4 h已達50%，證明艾地苯醌NE在腸液中的溶出相對來說迅速。從實驗結果可知，NE劑型艾地苯醌在人工胃液和人工體液中釋放相對較慢，在人工腸液釋放相對較快的對pH敏感的性質可以使藥物在腸道中控制釋放。

NLC劑型在100 r/min的搖床轉速條件下體外釋放較快，其釋放曲線始終處于NLC劑型在70 r/min的搖床轉速條件下體外釋放曲線上方，在24 h時分別有22%和17%的藥物被釋放。NE劑型在100 r/min的搖床轉速條件下體外釋放較快，其釋放曲線始終處于NLC劑型在70 r/min的搖床轉速條件下體外釋放曲線上方，在24 h時分別有26%和22%的藥物被釋放（見圖5、圖6）。

圖5 攪拌速度對艾地苯醌NLC釋放的影響

圖6 攪拌速度對艾地苯醌NE釋放的影響

3 討論

本實驗利用透析袋擴散法對于不同劑型的艾地苯醌在不同條件下的釋放進行研究，并運用高效液相色譜來檢測藥物的累積釋放率。分別從劑型、水凝膠、釋放介質和攪拌速度等方面對于藥物釋放進行研究，了解到運用不同的表面活性劑會影響藥物的釋放速度，NE劑型的釋放速度快于NLC劑型；水凝膠有明顯的藥物緩釋作用；另外，在一定范圍內，搖床轉速越高，藥物的緩釋效果更明顯。

當艾地苯醌溶解于Miglyol 812的油相和水相相接觸時，艾地苯醌由于其脂溶性而與Miglyol 812有很強烈的相互作用，基本不向水相分配，這就是自由藥物的釋藥速度比NLC和NE都慢的原因[5]。由于劑型限制了藥物分子在制劑內部的自由運動，加上微粒的保護作用，使藥物在體內的溶解和吸收速率明顯減慢，從而最終會延長藥物的作用時間，減少了藥物的服用次數(shù)，實現(xiàn)對藥物的緩控釋功能。NE劑型艾地苯醌在人工胃液和人工體液中釋放相對較慢，在人工腸液釋放相對較快的對PH敏感的性質可以使藥物在腸道中控制釋放。艾地苯醌納米結構脂質載體和艾地苯醌納米乳在進入體內后藥物釋放將受到胃腸道蠕動激烈程度的影響，胃腸道蠕動越激烈，藥物釋放的速度越快[6]。

納米結構脂質載體和納米乳及其水凝膠劑型都是靶向給藥的潛力劑型，可以通過研究其在胃腸道中的控制釋放達到劑型功能的更佳應用。但納米乳液作為藥物載體的靶向性比較差，納米乳液體系有一定的刺激性，藥物的釋放機理不很明確，故納米乳液作為藥物載體在臨床上應用較少。但隨著對納米乳液體系研究的不斷深入，新的表面活性劑的不斷出現(xiàn)及納米乳液作為藥物載體藥物釋放模型的建立和完善，納米乳液作為藥物載體，最終可達到藥物的緩釋控釋，提高藥物療效的目的。而且納米結構脂質載體作為第二代脂質納米粒，在很多各方面相對于納米乳都存在優(yōu)勢，在靶向用藥方面會有更大的機會和潛力。

[1]張翼,陳繼華,付鵬程.艾地苯醌對缺血性腦卒中后抑郁的預防性研究[J].實用醫(yī)學雜志，2013，29(19):3222-3224.

[2]郭章玉，崔元孝，商笑.艾地苯醌對癲癇患者認知功能和生活質量的影響觀察[J].中國藥房，2013，24(6):529-532.

[3]田霞，全東琴.聯(lián)苯雙酯過飽和自微乳釋藥系統(tǒng)的體內外評價[J].中國藥學雜志，2011，46(8):600-604.

[4]余東升，潘立群，姚昶,等.黃芪注射液濃縮液微乳的體外釋放實驗研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2007，34(7):969-970.

[5]Jia-You Fang，Chia-Lang Fang，Chi-Hsien Liu et al. Lipid nanoparticles as vehicles for topical psoralen delivery:Solid lipid nanoparticles(SLN)versus nanostructured lipid carriers(NLC)[J].Eur J Pharm Biopharm，2008，70(2):633-640.

[6]劉穎，張萍，馮年平,等.冬凌草甲素自微乳給藥系統(tǒng)的體外釋放動力學研究[J].中國中藥雜志，2008，33(18):2049-2052.