蘭 杰，李曉亮，薛 蓉，李春芳，宋敬敬，孫續(xù)國(guó)

(1天津醫(yī)科大學(xué)，天津300203;2天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院)

阿爾茨海默病(AD)是老年癡呆的一種常見(jiàn)類型，其臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性認(rèn)知功能損害［1］。到2030年，AD患病人數(shù)可能達(dá)6 600萬(wàn)［2］。然而，AD致病機(jī)制尚未完全闡明，其主要存在兩種假說(shuō)，淀粉樣變假說(shuō)認(rèn)為由淀粉樣蛋白沉積引發(fā)的神經(jīng)毒性反應(yīng)是導(dǎo)致疾病發(fā)生的主要原因，而血管性假說(shuō)認(rèn)為由血管系統(tǒng)紊亂導(dǎo)致的腦循環(huán)低灌注是導(dǎo)致認(rèn)知功能受損的主要原因［1］。作為一種復(fù)雜的進(jìn)展性疾病，其致病機(jī)制必然呈現(xiàn)多因素化。為探討血漿成分改變對(duì)AD疾病發(fā)生、發(fā)展中的重要作用，我們觀察了AD患者血漿淀粉樣變程度、血清總膽固醇水平及全血黏度變化，并分析其相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013年11月～2014年3月天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院收治的AD患者30例，男24例，女6 例;年齡(69.40±8.57)歲;MMSE 評(píng)分(21.1±3.6分)。納入標(biāo)準(zhǔn):符合中國(guó)精神障礙分類與診斷(CCMD-3)標(biāo)準(zhǔn);依據(jù)簡(jiǎn)易精神狀態(tài)檢查(MMSE)判定癡呆程度;Hachin-sb缺血指數(shù)量表(HIS)得分＜4分，以排除血管性癡呆和混合性癡呆。另選同期年齡、性別與AD匹配的非癡呆健康對(duì)照人群30例(對(duì)照組)，男24例，女6例;年齡(65±4.4)歲;MMSE 評(píng)分(26.7±1.2)分。納入標(biāo)準(zhǔn):年齡60歲以上，無(wú)嚴(yán)重軀體疾病，無(wú)記憶障礙主訴，無(wú)認(rèn)知功能損害病史。兩組一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 血漿淀粉樣變程度判斷 采用硫磺素 T法［3，4］。將6 mol/L ThT 溶液與血漿共孵育 20 min后，兩者結(jié)合可產(chǎn)生一定波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度，采用FL F-2500熒光分光光度計(jì)檢測(cè)淀粉樣纖維熒光強(qiáng)度，計(jì)算淀粉樣纖維水平，以此判斷血漿淀粉樣變程度。

1.3 血液流變學(xué)指標(biāo)及血脂檢測(cè) 所有受試者空腹12 h，于次日清晨7時(shí)～8時(shí)抽取靜脈血5 mL，注入含肝素鈉(20 U/mL)抗凝劑的真空試管(肝素抗凝采血管)內(nèi)，搖勻抗凝，LBY-N6A血流變儀檢測(cè)血液流變學(xué)指標(biāo)［全血黏度(低切1.001/s)、全血黏度(低切5.001/s)、全血黏度(低切30.001/s)、全血黏度(高切200.001/s)、血漿濃度、血沉、紅細(xì)胞壓積、全血高切相對(duì)指數(shù)、全血低切相對(duì)指數(shù)、血沉方程k值、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、全血低切還原黏度、全血高切還原黏度、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、紅細(xì)胞變形指數(shù)TK1］;同時(shí)抽取2 mL不抗凝靜脈血，采用TBA-120FR全自動(dòng)生化儀檢測(cè)血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，組間均數(shù)作獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，各指標(biāo)間的關(guān)系采用多元線性回歸分析法。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血漿淀粉樣纖維水平比較 觀察組及對(duì)照組血漿淀粉樣纖維水平分別為(16.63±5.67)、(12.83±0.27)U/mL，兩組比較，P ＜0.05。

2.2 兩組血液流變學(xué)指標(biāo)比較 觀察組及對(duì)照組全血黏度(低切 1.001/s)分別為(18.16±3.60)、(17.92±0.40)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;全血黏度(低切5.001/s)分別為(8.64±1.45)、(8.40±0.37)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;全血黏度(低切30.001/s)分別為(5.32±0.76)、(5.09±0.16)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;全血黏度(高切 200.001/s)分別為(4.16±0.54)、(3.74±0.15)mPa·s，兩組比較，P ＜0.05;血漿濃度分別為(1.40±0.10)、(1.33±0.07)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;血沉分別為(11.80±6.18)、(8.30± 6.09)mm/h，兩組比較，P ＞0.05;紅細(xì)胞壓積分別為(0.43±0.61)、(0.45±0.31)mm/h，兩組比較，P ＞0.05;全血高切相對(duì)指數(shù)分別為 2.94±0.22、2.74±0.26，兩組比較，P＞0.05;全血低切相對(duì)指數(shù)分別為12.79±1.78、14.24±1.32，兩組比較，P ＞0.05;血沉方程 k值分別為39.61±13.08、32.26±15.27，兩組比較，P ＞0.05;紅細(xì)胞聚集指數(shù)分別為4.34±0.36、4.13±0.14，兩組比較，P ＞0.05;全血低切還原黏度分別為(38.36±2.77)、(38.81±2.50)mPa·s，兩組比較，P＞0.05;全血高切還原黏度分別為(6.33±0.40)、(6.19±0.49)mPa·s，兩組比較，P ＞0.05;紅細(xì)胞剛性指數(shù)分別為 4.50±0.34、4.70±0.50，兩組比較，P＞0.05;紅細(xì)胞變形指數(shù) TK分別為0.82±0.08、0.81±0.07，兩組比較，P ＞0.05。

2.3 兩組血脂水平比較 結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 兩組血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白比較(mmol/L，±s)

表1 兩組血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白比較(mmol/L，±s)

注:與對(duì)照組比較，*P ＜0.05

組別 總膽固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白 低密度脂蛋白觀察組 4.71±1.24*1.87±1.12 1.21±0.35 2.70±0.84對(duì)照組3.95±0.22 1.36±0.11 1.40±0.17 2.78±0.36

2.4 血漿淀粉樣變程度、血清總膽固醇水平與全血黏度的相關(guān)性 血漿淀粉樣變程度、血清總膽固醇水平與全血黏度(高切)呈正相關(guān)趨勢(shì)(r分別為0.598、0.664，P 均 ＜0.05)?；貧w方程為 ^Y=2.798+0.070X1+0.027X2，^Y 為全血黏度(高切)，X1為血漿淀粉樣纖維水平，X2為血清總膽固醇。

3 討論

血液流變學(xué)主要研究血液在血管中流動(dòng)的規(guī)律，以及血液中有形成分(細(xì)胞)的變形性和無(wú)形成分(血漿)的流動(dòng)性對(duì)血液流動(dòng)的影響，以反映各組織、器官的血供狀態(tài)。全血黏度升高會(huì)引發(fā)微循環(huán)滯留時(shí)間延長(zhǎng)，易致微血栓形成以及腦組織血液灌注受損，進(jìn)一步導(dǎo)致腦組織能量以及氧氣供應(yīng)受損，觸發(fā)神經(jīng)元細(xì)胞降解、死亡。研究［5］指出，AD患者腦血流量明顯低于年齡匹配的非癡呆患者，揭示了腦組織血液低灌注是導(dǎo)致AD發(fā)病的危險(xiǎn)因素之一。改善AD患者外周血流變學(xué)參數(shù)，可減輕腦組織低灌注，延緩疾病發(fā)展。本研究顯示，觀察組全血黏度(高切)值高于對(duì)照組，提示AD患者外周血紅細(xì)胞變形能力降低。

研究［6］發(fā)現(xiàn)，AD患者外周循環(huán)中 ＞15%的紅細(xì)胞體積變大，與正常非癡呆老年人相比具有顯著性差異;同時(shí)，對(duì)紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)膜蛋白與骨架蛋白組成發(fā)生改變，參與是導(dǎo)致紅細(xì)胞變形能力降低的因素之一［7］。此外，血漿蛋白組成影響紅細(xì)胞的變形能力。本研究顯示，觀察組血漿淀粉樣纖維水平高于對(duì)照組，提示血漿淀粉樣變程度的變化與疾病的發(fā)生有關(guān)。研究［8～16］指出，血漿淀粉樣蛋白β(淀粉樣蛋白的一種類型)可以與紅細(xì)胞結(jié)合，引發(fā)紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變，如體積變大，變形能力減弱，膜蛋白和骨架蛋白構(gòu)成發(fā)生改變，其發(fā)生機(jī)制可能與Aβ介導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)［12］，膜脂質(zhì)過(guò)氧化，血紅蛋白熒光降解產(chǎn)物增加，以及聚集的Aβ纖維可在紅細(xì)胞質(zhì)膜表面形成孔道，破壞細(xì)胞膜屏障，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)外電解質(zhì)紊亂等有關(guān)。血漿中銅離子與Aβ纖維結(jié)合后，會(huì)加劇纖維的細(xì)胞毒性反應(yīng)。同時(shí)，Aβ可介導(dǎo)紅細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)合，破壞血管的完整性，進(jìn)一步加劇組織缺氧，導(dǎo)致大腦低灌注［17］。

本研究還發(fā)現(xiàn)，觀察組血清總膽固醇高于對(duì)照組，提示膽固醇水平升高可引發(fā)血液高黏狀態(tài)，降低腦血流供應(yīng)，促進(jìn)疾病發(fā)生、發(fā)展。一方面，膽固醇水平的升高增加了血漿蛋白含量，直接造成全血黏度的增加;另一方面，高血脂可以使患者紅細(xì)胞膜質(zhì)成分發(fā)生變化，使紅細(xì)胞膜膽固醇、膽固醇/磷脂值增加從而使紅細(xì)胞變形能力下降，同時(shí)血脂還能吸附于紅細(xì)胞表面，使其表面電荷被屏蔽，從而導(dǎo)致紅細(xì)胞表面電荷減少，進(jìn)而其排斥力降低，血液度增加［18］。AD患者腦組織神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)膜膽固醇水平含量增高，可通過(guò)調(diào)節(jié)AβPP剪切酶活性促進(jìn)Aβ的產(chǎn)生與釋放［19］。降低膽固醇藥物，如他汀類藥物，對(duì)AD具有治療作用［20］。腦組織6% ～7%膽固醇含量可與循環(huán)中的膽固醇進(jìn)行交換，當(dāng)循環(huán)中膽固醇水平升高時(shí)可增加腦組織膽固醇含量，由此引發(fā)一系列病理變化，如神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)膜膽固醇含量增多導(dǎo)致細(xì)胞流動(dòng)性降低;由吸收增多導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)高膽固醇水平可增加AβPP小泡分泌，進(jìn)而增加Aβ的產(chǎn)生與沉積;細(xì)胞內(nèi)外膽固醇代謝紊亂，可促進(jìn)tau蛋白磷酸、抑制樹(shù)突細(xì)胞生長(zhǎng)、破壞神經(jīng)突觸的生成和可塑性，最終導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞的降解［21］。降低循環(huán)中膽固醇水平可有效的減少Aβ的產(chǎn)生，進(jìn)而減輕淀粉樣蛋白的細(xì)胞毒效應(yīng)，對(duì)AD預(yù)防與治療具有重要作用。

多元線性回歸分析表明，血漿淀粉樣變程度、血清膽固醇水平與全血黏度(高切)具有一定相關(guān)性，且血漿淀粉樣變程度對(duì)全血黏度的影響作用強(qiáng)于血漿膽固醇對(duì)全血黏度的影響(回歸方程中血漿淀粉樣變程度的偏相關(guān)系數(shù)大于血漿膽固醇的偏相關(guān)系數(shù))，其原因可能為除淀粉樣蛋白直接增加全血黏度、參與紅細(xì)胞膜氧化應(yīng)激損傷導(dǎo)致紅細(xì)胞變形能力降低外，血清膽固醇水平升高可影響神經(jīng)元細(xì)胞淀粉樣前體蛋白代謝，加速淀粉樣蛋白的產(chǎn)生和沉積，通過(guò)腦血屏障，導(dǎo)致外周循環(huán)Aβ水平升高，進(jìn)一步加劇淀粉樣蛋白的損害作用［22～24］。

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