王智明+張峰舉+許興

摘要：綜述了鹽脅迫對植物體內葉綠素、脯氨酸、可溶性蛋白質、可溶性糖、甜菜堿、光合作用、質膜通透性、抗氧化酶等生理生化指標影響的研究進展，旨在為進一步揭示植物耐鹽性生理、分子機制及篩選和培育耐鹽性植物新品種提供參考依據。

關鍵詞：植物鹽脅迫；生理生化指標；耐鹽機理

中圖分類號：Q945.78 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2014）07-1493-04

Advances on Physiological and Biochemical Indexes of Salt Tolerance in Plant

WANG Zhi-minga， ZHANG Feng-jub， XU Xinga

（a.Agricultural College；b.R & D Center for Application of New Technology， Ningxia University， Yinchuan 750021， China）

Abstract： Advances on physiological and biochemical indexes of plant salt tolerance such as chlorophyll， proline， soluble protein， soluble sugar， betaine， photosynthesis， cell membrane permeability， antioxidant enzymes， were reviewed to further unveil the physiological and molecular mechanism of plant salt tolerance， and to provide a reference for screening and breeding new varieties with salt tolerance.

Key words： plant salt stress； physiological and biochemical index； salt tolerance mechanism

鹽漬土是對各種鹽漬化土壤的俗稱，包括不同程度的鹽土、堿土以及次生鹽漬化土壤[1]。鹽土是指土壤溶液中可溶性鹽（NaCl、Na2SO4等）的含量（一般在0.30%以上）超過了作物正常生長發(fā)育的耐受極限的土壤；而堿土則是指土壤溶液中含有大量的可交換性Na+，顯著改變了土壤和植物理化性狀的土類，通常其堿化度在15%以上，pH大于9，又稱鈉質土。

土壤鹽漬化嚴重影響我國的農業(yè)生產和生態(tài)環(huán)境，是制約現(xiàn)代農業(yè)增產、增效和實現(xiàn)農業(yè)良性發(fā)展的兩大土壤因素之一[2]。土壤中的鹽堿是影響植物生長發(fā)育的重要限制因子，主要脅迫因子包括pH、Na+及Cl-[3]。研究表明，在鹽堿混合脅迫下，作物生長發(fā)育遲緩，代謝功能紊亂甚至喪失，嚴重時植株發(fā)生永久性萎蔫，尤其是西部干旱荒漠地帶[4]。

植物的耐鹽性是一個受多基因控制的綜合數量性狀，涉及諸多抗鹽基因選擇性差異表達和多種耐鹽生理生化的協(xié)調作用[5]。每種鹽生植物甚至非鹽生植物均有一套獨特的耐鹽方式和耐鹽機制，使得它們的基因和生理生化指標變化差異明顯，所以綜合考慮其多項指標，才能科學評價植物的耐鹽性。本文就植物耐鹽性對諸多學者近年來關于耐鹽生理生化指標的研究進行了綜述，以期為進一步揭示不同植物的耐鹽機制，完善植物耐鹽性的綜合衡量指標體系以及選育適鹽性植物新品種提供參考依據。

1 生理生化指標

1.1 對光合系統(tǒng)影響的研究

1.1.1 光合作用 光合作用是地球上最基礎的生化反應，是綠色植物正常生長發(fā)育所需的物質與能量來源[6]，其主要涉及到光能捕獲、轉化和碳同化過程。鹽脅迫可能通過滲透脅迫、鹽離子毒害及光合產物積累的反饋抑制等途徑抑制光合作用[7]。研究表明，鹽脅迫能夠抑制植物光合作用的碳同化過程[8]，降低其凈光合速率（Pn）[9]。但對植物Pn降低的原因有分歧，一些學者認為氣孔限制是引起Pn下降的主要原因。張川紅等[10]研究表明，在200 mmol/L NaCl脅迫下，國槐與核桃在11：00—15：00的氣孔導度（Gs）明顯低于對照，并且核桃Gs的降低程度較大。即鹽脅迫使植物部分氣孔孔徑減小甚至關閉，限制氣孔的CO2進入量，最終導致Pn下降。

研究發(fā)現(xiàn)，鹽堿脅迫影響植物光合作用的因素包括氣孔因素和非氣孔因素[11]。劉霞[12]的研究發(fā)現(xiàn)，在低濃度Na2CO3脅迫下，蠶豆Pn受到抑制，此時Gs、胞間CO2濃度（Ci）下降，氣孔限制值（Ls）升高，說明Pn下降的主要因素是氣孔限制；隨著Na2CO3處理濃度繼續(xù)增大，雖然Gs下降程度更大，但Ci升高，Ls下降，說明高濃度Na2CO3處理時影響光合作用的氣孔限制作用減小，非氣孔限制因素增大。而惠紅霞等[13]利用不同濃度的NaCl處理枸杞的結果表明，短期NaCl脅迫下，枸杞主要通過調節(jié)Gs影響CO2交換速率，降低其光合作用，但長期脅迫時，非氣孔限制因素又占據主導地位。鄭國琦等[14]的試驗結果表明，NaCl脅迫強度低于0.60%（占干土重量的百分數）時，枸杞根系產生大量脫落酸（ABA），以ABA或化學電位的形式向地上部分傳遞化學信號，導致其Ls增加、光合作用強度和Gs降低，即低鹽脅迫下，以氣孔限制因素為主；NaCl脅迫強度高于0.60%時，枸杞葉片中含有大量的Na+、Cl-，鹽離子降低1，5-二磷酸核酮糖羧化酶（RuBPCase）等多種酶的催化活性，最終降低枸杞的光合速率，此時，非氣孔限制又成為主要因素。

1.1.2 葉綠素含量的變化 鹽脅迫對植物Pn的影響很大一部分歸因于葉綠素含量的降低。葉綠素是光合作用中完成光吸收的主要色素，如葉綠素a、葉綠素b等；鹽脅迫強度與葉綠素含量呈現(xiàn)很好的相關關系。一些學者認為，低鹽濃度下，鹽離子促進葉綠素的合成；而高鹽濃度下，植物體內Na+、Cl-含量增加，使葉綠素與葉綠素蛋白質之間的親和性降低，最終葉綠素游離，同時高鹽脅迫強度必然會抑制葉綠素合成關鍵酶的活性，激活葉綠素酶，加速其降解。杜軍華等[15]的試驗表明，低濃度NaCl處理蠶豆，蠶豆葉片的葉綠素含量呈先增加后降低的趨勢，隨著NaCl脅迫值增大，葉綠素含量降低。翁錦周等[16]也得出了相似的結論。

目前，針對植株葉綠素含量與鹽脅迫之間的相關關系基本達成統(tǒng)一，但對鹽脅迫與葉綠素a/b之間的相關性還存在爭議。合適的葉綠素a/b可抑制葉片內冗余的光能誘導產生O2-，防止膜系統(tǒng)脂質過氧化?？梢姡~綠素a/b是反映植物耐鹽性的一個重要指標。崔興國[17]認為，鹽脅迫增強了植物體內葉綠素酶的活性，并分解葉綠素，葉綠素酶對葉綠素b的降解作用要高于葉綠素a，從而使植株體內的葉綠素a/b增大。但多數學者認為，葉綠素a/b與鹽脅迫強度之間未呈現(xiàn)單一變化走向[16-18]。武德等[19]通過試驗得出，Na2Cl脅迫下，刺槐的葉綠素a/b無明顯變化；但在Na2CO3處理下，葉綠素a/b增加；對絨毛白蠟的研究也是如此。這可能與不同學者所選的試驗材料和鹽濃度設定有關。

1.2 有機物滲透調節(jié)的研究

鹽堿脅迫環(huán)境下，土壤溶液中Na+、Cl-含量較高，滲透壓升高，水勢遠低于根系細胞，造成植物吸水困難甚至脫水；植物為了減輕滲透脅迫對自身的損傷，往往在細胞內積累一定數量的有機調節(jié)劑（如可溶性糖等）和無機滲透調節(jié)離子，以維持根毛細胞較大的“滲透力”、較低的水勢，保證植物能夠從高鹽逆境中滲透吸水。

1.2.1 脯氨酸的變化 脯氨酸是植物胞質內重要的可溶性有機滲透調節(jié)劑之一[6]，其具有減緩液泡內區(qū)域隔離化鹽分的滲透脅迫，防止胞質失水，維持細胞正常膨脹狀態(tài)等生理功能，因此，脯氨酸的積累是植物抗鹽、耐鹽的一項應激性保護措施。研究表明，隨著鹽堿脅迫強度的增大，植物體內脯氨酸的含量逐漸增加，呈明顯的正相關。王寧等[20]研究發(fā)現(xiàn)，136 mmol/L NaCl脅迫中、后期，光蠟樹葉片中的脯氨酸含量與對照組相比分別增加65.39%和96.72%。楊帆等[21]研究發(fā)現(xiàn)，1.50 g/kg NaCl處理下，構樹葉片的脯氨酸含量比對照增加56.30%；而高濃度鹽脅迫下脯氨酸含量約為對照組的3～6倍，之后隨著鹽脅迫時間的推移，脯氨酸的含量緩慢降低，但最終高濃度處理組略高于對照組。因此，葉片中脯氨酸的積累是綠色植物的一種保護性措施，而不是受到鹽害的結果。

1.2.2 可溶性蛋白質的變化 一般認為鹽脅迫打破了植物體內蛋白質代謝的動態(tài)平衡，即蛋白質降解速率遠大于其合成速率，最終使胞質可溶性蛋白質含量隨鹽脅迫強度的增加而降低[22]，可溶性蛋白質的積累是植物響應鹽害的一種生理現(xiàn)象。楊帆等[21]研究發(fā)現(xiàn)，不同等級鹽脅迫下，構樹葉片中可溶性蛋白質含量下降幅度不同，總體表現(xiàn)為高鹽>中鹽>輕鹽。但也有學者不同意這種說法，閻艷霞等[23]認為，不同濃度NaCl處理下，4種棗樹葉片中可溶性蛋白質含量比對照均有不同程度的增加，并與鹽脅迫強度呈顯著正相關。肖強等[24]通過試驗也得出了相同的結論?？扇苄缘鞍踪|究竟如何響應鹽脅迫有待進一步研究。

1.2.3 可溶性糖的變化 可溶性糖也是植物響應鹽堿脅迫的一種有機滲透調節(jié)劑，如葡萄糖和蔗糖等，在細胞內起類似于保護酶的作用，同時其作為碳水化合物為有機物的合成提供充足的物質和能量供應。在對燕麥的研究中發(fā)現(xiàn)，胞質內可溶性糖含量與鹽濃度之間存在正相關性[25]。王志春等[26]與其持相同觀點?？梢姡|內可溶性糖含量的變化是反映植株耐鹽性強弱的一個典范生理指標。但也有人持不同觀點，陳潔[27]的研究發(fā)現(xiàn)，在高濃度鹽脅迫下，水稻海香1號中可溶性糖含量呈下降趨勢。這可能是因為鹽脅迫降低了水稻的光合作用，ATP產生不足，植株為滿足其能量需求，增強呼吸作用，以消耗可溶性糖來提供足夠的能量，最終導致胞質內的糖含量下降明顯。

1.2.4 甜菜堿的變化 甜菜堿即甘氨酸甜菜堿，為一類季銨化合物，是高等植物細胞內廣泛存在的一類親和性有機滲透調節(jié)劑和酶蛋白保護劑，并且對維持細胞膜的完整性具有重要的生理作用。胞質內甜菜堿的濃度與土壤鹽脅迫強度之間存在正相關性，并且高濃度甜菜堿對胞內多種活性酶及其他結構蛋白質均無影響。李長有等[28]通過試驗得出，NaCl脅迫下，虎尾草幼苗的甜菜堿含量較對照約增加7.50倍。羊草的甜菜堿含量和甜菜堿醛脫氫酶活性均隨鹽迫值的提高而增加[29]。當植株受到鹽害時，根系細胞內迅速合成大量甜菜堿，以平衡液泡內區(qū)域隔離化的鹽離子，避免胞質中高濃度Na+、Cl-等的生理毒害作用。因此，鹽脅迫下，植物胞內甜菜堿的大量合成是植物響應鹽害的重要生理措施，其含量與物種的耐鹽性和鹽脅迫強度呈正相關。

1.3 質膜通透性

質膜通透性直接反映細胞質膜的完整度和穩(wěn)定性，是衡量植物耐鹽性的重要指標之一。鹽脅迫下，質膜最先遭受破壞，Na+置換出質膜中的Ca2+，使質膜的穩(wěn)定性顯著下降，通透性增加，選擇透性降低甚至喪失。當鹽濃度增大時，由于Na+、Cl-的脅迫作用使構樹細胞質膜的結構發(fā)生改變，穩(wěn)定性降低，導致質膜出現(xiàn)滲漏，胞內電解質漏滲[21]。同時，鹽脅迫還會使植物體內產生過量活性氧（AOS），過氧化質膜中的膜脂、MDA含量增加，相對電導率增大[4]。齊曼·尤努斯等[30]在對新疆大果沙棗的研究中發(fā)現(xiàn)，NaCl、Na2SO4脅迫下，質膜的通透性、相對電導率和膜脂過氧化程度與土壤鹽堿脅迫值呈顯著正相關。相對電導率的大小可以反映植物在鹽堿脅迫下質膜的通透性變化和受損傷程度。由此可見，膜透性是評價植物耐鹽性的重要生理測定指標。

1.4 抗氧化酶

鹽堿脅迫下，植物體內會產生大量的氧自由基，即AOS，包括O2-、OH-、·OH和H2O2等，為了避免體內過多的氧自由基造成生物膜系統(tǒng)損傷以及細胞內氧化磷酸化障礙，植物主要借助于抗氧化酶清除氧自由基，抗氧化酶主要包括超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）3種。SOD作為植物抗氧化系統(tǒng)的第一道防線，首先發(fā)生歧化反應將O2- 轉化為O2和H2O2，催化反應式為：2O2-+2H+→H2O2+O2↑，其次，H2O2再在POD、CAT的催化作用下進一步分解為H2O和O2，其催化反應式為：2H2O2→2H2O+O2↑。鑒于上述生理功能，可見抗氧化酶活性增強能顯著提高植物的抗逆性，因而備受研究者的關注。多數學者認為，隨著鹽堿或其他脅迫強度的增加，不同抗氧化酶的活性增速不同；張永峰等[31]通過鹽堿脅迫對苗期紫花苜蓿影響的研究得出，不同濃度鹽堿（NaCl和Na2CO3）混合脅迫下，紫花苜蓿幼苗中SOD活性最強出現(xiàn)在處理后第一天，POD活性最強出現(xiàn)在處理后第三天，比SOD晚2 d，之后逐漸下降，但最終其活性均高于對照；而CAT活性隨鹽堿脅迫強度的變化無規(guī)律性可言。陳海燕等[32]研究認為，鹽處理下，武運粳8號（鹽敏感）和韭菜青（強耐鹽）兩個粳稻品種根中SOD的活性無顯著差異，但韭菜青的POD、CAT活性明顯高于武運粳8號。張恩平等[33]、夏更壽等[34]也得出了相同的結論。其差異可能與不同學者所選取的植物材料（抗鹽機制不同）、鹽堿梯度和處理時間差異有關。但他們均認為，植物主要通過這3種抗氧化酶的相互作用來修復脅迫損傷，其活性的增強和含量的增加可顯著提高植物的耐鹽性，是植物響應鹽脅迫免遭鹽害的應急防護措施。

2 展望

土壤鹽漬化是制約我國未來生態(tài)農業(yè)可持續(xù)性發(fā)展的主要環(huán)境因子之一，嚴重影響我國農業(yè)的糧食生產安全和生態(tài)建設。我國東西部水資源嚴重失衡，西部水量不足，所以利用洗鹽的方式解決土壤鹽漬化的可能性很小，同時考慮到我國是以燃煤為主要能源的國家，大量的煙氣脫硫廢棄物帶來了嚴重的土地污染和空間占用問題，但研究者通過試驗發(fā)現(xiàn)其對鹽漬土的改良效果顯著。因此，在煙氣脫硫廢棄物改良鹽堿土的條件下，篩選和培育耐鹽性植物新品種有望成為未來開展生態(tài)農業(yè)建設的主要途徑。

植物的耐鹽性并非是僅由單個基因所決定的，而是多個抗逆基因適時誘導聯(lián)合表達的結果。目前，其耐鹽堿機制涉及到器官、組織、細胞乃至蛋白質、基因等多個層次，盡管不同的學者已經從不同水平上對植物的耐鹽堿機制有所研究，但研究仍不夠深入，如不同植株耐鹽性主導因子的確定、分子層次上的植物耐鹽機理（如耐鹽基因的調控機理等）尚不是很明確及植物耐鹽性的評價體系不完善等，有待進一步研究。

進入21世紀，隨著基因組學研究的深入，可以利用cDNA微陣列、cDNA芯片、基因敲除、外源基因插入失活等方法，對耐鹽植物的耐鹽基因進行尋找和生物學功能鑒定；也可借助農桿菌介導法、DNA重組技術和細胞融合等方法將特定抗鹽功能基因轉化敏感作物，使利用基因工程的方法培育耐鹽新品種成為可能。

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