傅紹喜 鄭偉紅 劉領(lǐng)波

摘要： 目的：探討分泌性中耳炎（secretory otitis media，SOM）與胃食管反流病（gastroesophageal reflux disease， GERD）相關(guān)因素分析。方法：抽取分泌性中耳炎患者鼓室積液45例，對(duì)積液中的胃蛋白酶（Pepsin）使用酶聯(lián)反應(yīng)免疫吸附法（ELISA法）測(cè)定，并用酶標(biāo)儀測(cè)定其含量并行相關(guān)分析。結(jié)果：檢出含有胃蛋白酶陽(yáng)性患者31例，陽(yáng)性率68.9%，其含量0.659±0.46μg/ml。討論：反流的胃內(nèi)容物可能進(jìn)入鼻咽及中耳，GERD可引發(fā)分泌性中耳炎，分泌性中耳炎與胃食管反流病有關(guān)。

關(guān)鍵詞：分泌性中耳炎；胃食管反流?。晃傅鞍酌?；鼓室積液

【中圖分類號(hào)】R453【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A【文章編號(hào)】1002-3763（2014）09-0130-02分泌性中耳炎（secretory otitis media，SOM）是以傳導(dǎo)性聾及鼓室積液（包含漿液、黏液及漿—黏液）為特征的中耳非化膿性炎癥疾病[1]。其發(fā)病機(jī)制是否與胃食管反流?。℅ERD）有關(guān)，國(guó)內(nèi)外專家學(xué)者對(duì)其研究甚少。Tasker等[2]證明食管炎中反流的胃內(nèi)容物可以進(jìn)入鼻咽部和中耳，導(dǎo)致了中耳炎的發(fā)生；國(guó)內(nèi)學(xué)者周長(zhǎng)華等[3] 也證明分泌性中耳炎的發(fā)病因素可能與胃食管反流病有關(guān)。

本研究在我院耳鼻喉科門(mén)診2012.7—2013.11月抽取鼓室積液45例，采用酶聯(lián)反應(yīng)免疫吸附法（ELISA法），檢測(cè)其中胃蛋白酶的含量，觀察與分析分泌性中耳炎與胃食管反流病的關(guān)系，為分泌性中耳炎的臨床治療提供新的理論依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料及方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 臨床資料：采用全國(guó)最新的分泌性中耳炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]為診斷依據(jù)。選取2012.7—2013.11月在青海大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻喉科抽取的45例鼓室積液為樣本，所有病例均填寫(xiě)詳細(xì)的調(diào)查表格。其中男29例，女16例，年齡2-52歲，中位數(shù)30.7±4.5歲；

1.1.2 主要試劑及設(shè)備：人胃蛋白酶ELISA試劑盒（北京久峰潤(rùn)達(dá)生物技術(shù)有限公司）；Elx800酶標(biāo)儀（美國(guó)BIO-TAK INSTRUMENTS.INC公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣本取材：使用鼓膜穿刺術(shù)（tympanotomy）抽吸鼓室液體，后將樣本移入1.5ml無(wú)菌離心管，離心20分鐘（3000轉(zhuǎn)/分）后，收集上清液，放置于冰箱（-20℃）中保存待查。

1.2.2 觀察指標(biāo)：嚴(yán)格按照人胃蛋白酶ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，批內(nèi)變異系數(shù)<9%，批間變異系數(shù)<15%。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫定量測(cè)定中耳積液胃蛋白酶水平。讀取OD在450nm波長(zhǎng)值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品胃蛋白酶的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

45例分泌性中耳炎患者鼓室積液使用P/N法定性測(cè)定，其中含有胃蛋白酶31例，陽(yáng)性率68.9%。將胃蛋白酶稀釋為0.1μg/ml-10μg/ml之間，根據(jù)在450nm出的吸光度與濃度關(guān)系制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)方程可測(cè)得鼓室積液中胃蛋白酶含量為（0.659±0.46μg/ml），

由此推測(cè)反流的胃內(nèi)容物可能進(jìn)入鼻咽及中耳，GERD可引發(fā)分泌性中耳炎。中耳胃蛋白酶的存在可作為GERD食管外的一種表現(xiàn)，將來(lái)可能通過(guò)處理GERD來(lái)治療胃酸反流導(dǎo)致的中耳炎，其機(jī)制為：通過(guò)抑制胃酸的反流，控制胃蛋白酶逆行上移經(jīng)鼻咽部和咽鼓管進(jìn)入中耳腔，從而可以避免患者接受鼓膜造口術(shù)及其他有創(chuàng)治療。

3 討論

分泌性中耳炎又稱為滲出性中耳炎（otitis media with effusion，OME）、卡他性中耳炎（catarrhal otitis media），如積液粘稠呈膠凍狀者，又稱為膠耳。中醫(yī)稱為“耳閉”。分泌性中耳炎是耳鼻咽喉頭頸外科常見(jiàn)疾病，尤其多發(fā)于兒童，發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)。其臨床癥狀主要表現(xiàn)為傳導(dǎo)性耳聾及鼓室積液，伴有輕微的耳痛，耳鳴，耳閉塞感，嚴(yán)重者可見(jiàn)極度內(nèi)陷的鼓膜。國(guó)際上召開(kāi)過(guò)多次關(guān)于分泌性中耳炎的專題研討會(huì)，證明其病因可能與免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟、病毒感染、神經(jīng)性炎癥機(jī)制改變、乳突氣化不良、咽鼓管功能不良等有關(guān)。在引起咽鼓管功能不良的各種原因中，GERD為其主要熱點(diǎn)之一。咽鼓管功能不良可能歸因于反流后酸性環(huán)境下的黏膜炎癥、膽汁酸的毒性及酸的滲透作用，尤其是胃蛋白酶的水解破壞，這一系列反應(yīng)都受蛋白水解活性調(diào)節(jié)[5]。

Tasker等[2]使用ELISA法得出，82%患者中耳滲出液中有胃蛋白酶原的存在，且測(cè)出胃蛋白酶的濃度高于血清濃度1000倍。從而認(rèn)為：食管炎中反流的胃內(nèi)容物可以進(jìn)入鼻咽部和中耳，導(dǎo)致了中耳炎的發(fā)生。另有Lieu等[6]實(shí)驗(yàn)：測(cè)得分泌性中耳炎泌出液中胃蛋白酶和胃蛋白酶原的陽(yáng)性率77%。Crapko等[7]對(duì)已行鼓膜置管的20例分泌性中耳炎患兒的鼓室積液中的胃蛋白酶使用Western Blot法進(jìn)行分析，結(jié)果表明：胃蛋白酶陽(yáng)性率為60%， 這也證明了中耳炎的發(fā)病因素可能與胃食管反流病有關(guān)。

OReilly等[8]對(duì)患有分泌性中耳炎的小兒（n=509）進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)20%小兒鼓室積液中可檢出胃蛋白酶，平均濃度為202.4±329.1ng/ml（12.5～2303ng/ml），結(jié)果表明胃蛋白酶很有可能是分泌性中耳炎發(fā)病的危險(xiǎn)因素。

本研究，旨在對(duì)分泌性中耳炎和胃食管反流病的關(guān)系進(jìn)行探討。通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察到：45例鼓室積液中有31例測(cè)得胃蛋白酶，其陽(yáng)性率為68.9%，含量為0.659±0.46μg/ml，從而證明分泌性中耳炎的發(fā)病因素及病理過(guò)程可能與胃食管反流病有關(guān)，以便為分泌性中耳炎的臨床治療提供新的理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 黃選兆，汪吉寶，孔維佳.實(shí)用耳鼻咽喉頭頸外科學(xué)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：848-855.

[2] Tasker A，Dettmar PW， Panetti M，et al. Is gastricrc reflux a cause of otitis media with effusion in children[J]. Laryngoscope.2002，112：1930.

[3] 周長(zhǎng)華.胃食管反流疾病與分泌性中耳炎[J].聽(tīng)力學(xué)及言語(yǔ)疾病雜志.2010，18：200.

[4] 遲放魯，王正敏.中耳炎的分類和診斷[J].中國(guó)眼耳鼻喉科雜志。2004，5：137.