李建光， 張 露， 李新霞

(新疆醫(yī)科大學藥學院， 烏魯木齊 830011)

溶出度是一種模擬口服固體制劑在胃腸中崩解和溶出的體外簡易試驗方法。通過體外溶出度試驗研究，對藥品的內在工藝品質進行評估[1]。目前國內外測定藥物溶出度的方法仍然以手工取樣測定為主，不僅操作繁雜，并且得到的數據不完整，人為誤差較大，尤其對于小規(guī)格藥物，誤差影響更為顯著，而且手工取樣難以準確了解藥物溶出的全過程[2]。光纖藥物溶出度實時測定儀(FODT)集溶出度試驗與分析檢測于一體，通過光導纖維將光源信號直接導入溶出杯中，根據藥物的光譜特性選擇合適的探頭，藥物溶出過程濃度的變化引起光信號的改變，通過數學模型消除背景干擾，經軟件系統(tǒng)編譯后實現對藥物溶出過程的原位和實時測定，可獲得藥物溶出度的過程溶出曲線，反映藥物的真實溶出過程[3-4]。

奮乃靜(Perphenazine)為吩噻嗪類的呱嗪衍生物，屬于抗精神病藥。奮乃靜片規(guī)格很小，標示量為2 mg，相對累積溶出度100%時吸光度值為0.32，在預試驗過程中發(fā)現輔料對樣品吸光度值有干擾，且輔料的吸收不是恒定值，是1條有斜率的曲線。系數倍率法在組分的測定波長處建立系數倍率法數學模型，扣除輔料的吸收。本實驗參照文獻[5-10]的方法利用光纖藥物溶出度實時測定儀，采用動態(tài)倍率系數法得到數學模型，實時扣除干擾，建立奮乃靜片體外溶出度過程分析方法。

1 儀器與試藥

紫外可見分光光度計(日本島津，型號：2550)，光纖藥物溶出度實時測定儀(新疆富科思生物技術發(fā)展有限公司，FODT-601型)，奮乃靜片(江蘇黃河藥業(yè)股份有限公司,批號：130322)，奮乃靜對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：100133-200602)，聚山梨酯80(南京威爾化工有限公司，批號：120824)，乙醇(分析純批號：140128)，水為脫氣蒸餾水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1溶液的配制

2.1.1 溶出介質 稱取30 g聚山梨酯80，加水定容至10 000 mL，搖勻即得0.3%聚山梨酯80溶液。

2.1.2 對照品溶液的配置 精密稱取奮乃靜對照品0.011 1 mg于50 mL量瓶中，加無水乙醇完全溶解稀釋至刻度，分別精密量取1.5、2.5、3.5、4.5、5.0 mL置于250 mL量瓶中，用0.3%聚山梨酯80溶液定容至刻度，濃度分別為1.332、2.220、3.108、3.996、4.440 μg/mL，相當于奮乃靜片相對累積溶出度為33.3%、55.5%、77.7%、99.9%、111.0%的系列對照品溶液。

2.2探頭及測定波長的選擇取相對累積溶出度為99.9%的奮乃靜對照品溶液，于FODT-601對照品模式下，采用5 mm(10 mm光程)探頭，在200～600 nm波長范圍內掃描吸收光譜，結果奮乃靜在259 nm波長處有最大吸收，吸光度為0.3～0.7，因此選擇5 mm探頭，測定波長為259 nm。

2.3系數倍率法消除輔料干擾取自身對照品溶液及此溶液過濾后的續(xù)濾液，在 FODT 系統(tǒng)進行紫外掃描(圖1) 。

圖1 自身對照品溶液過濾前后紫外吸收光譜

吸收光譜顯示，過濾前有輔料的樣品溶液在410～600 nm范圍內，吸光度不為零而是1條吸光度逐漸減小的斜線，說明自身對照品溶液未過濾時溶液中有輔料的干擾，故以波長為橫坐標，在同一波長處用未過濾溶液的吸光度值減去過濾后溶液的吸光度值，以此差值為縱坐標回歸，可以得到輔料的吸收曲線。

2.4方法學考察

2.4.1 標準曲線的建立 取上述系列濃度對照品溶液在FODT-601對照品模式下6個通道分別測定吸光度值(n=6)，以吸光度為橫坐標，以相對百分濃度為縱坐標進行線性回歸，1～6通道回歸方程及相關系數分別為：Y=304.56X+5.069 6，r=0.998 9；Y=298.82X+7.013 5，r=0.999 3；Y=302.0 9X+3.811 3，r=0.999 3；Y=302.9 2X+4.165 0，r=0.998 0；Y=300.49X+4.417 5，r=0.998 5；Y=297.47X+3.447 5，r=0.998 2。

2.4.2 精密度試驗 將“2.2”項下系列濃度標準溶液在FODT“溶出度測定”模式下，輸入標準曲線方程，采用FODT 測定，考察日內、日間精密度，結果日內精密度分別為1.98%、2.25%、2.46%、3.04%、2.58%；日間精密度分別為3.32%、2.85%、3.50%、4.02%、3.26%。

2.4.3 回收率試驗 稱取5片奮乃靜片，精密稱定，平均片重為0.104 88 g，精密稱取藥品粉末0.105 62 g置于500 mL量瓶中，超聲40 min使其充分溶解，溶出介質稀釋至刻度，搖勻，即得自身對照品溶液，相對百分濃度為100.7%。以3份自身對照品溶液作為本底，分別加高中低濃度為3.108、3.996、4.440 μg/mL的對照品溶液，采用FODT測定，經計算回收率分別為99.3%、99.7%、100.2%，相對標準偏差(RSD)分別為1.20%、1.85%、2.45%(n=6)。

2.5奮乃靜片溶出度過程分析奮乃靜片溶出度測定條件參照《中國藥典》奮乃靜片溶出度的檢測方法與條件[11]，轉籃法，溫度：(37±0.30)℃，轉速：100 r/min，溶媒：500 mL，0.3%聚山梨酯80溶液，溶出時間：45 min。

FODT采用倍率系數法用于消除輔料的干擾，在溶出度模式下輸入標準曲線，將6片奮乃靜片同時放入溶出杯中，所有操作均由計算機控制，FODT 測定奮乃靜片的溶出度，監(jiān)測120 min，獲得溶出曲線。奮乃靜片光纖實時溶出度曲線顯示，奮乃靜片在0～5 min時基本沒有溶出，5～25 min時快速釋放，25 min時5片藥已基本完全溶出，相對百分溶出度均在80%以上，但有1片藥溶出63%，30 min后溶出曲線已基本走平，藥片完全溶出，見圖2；同時于17、60 min進行手動取樣，平行操作，按照《中國藥典》方法測定藥物溶出度，進行對照實驗。手動取樣時取樣針位置均在光纖探頭同一水平面上，取樣后溶液均用0.45 μm濾頭過濾，并棄去前2 mL濾液，作為供試品溶液，照紫外可見分光光度法，在259 nm的波長處測定吸光度，計算每片藥的溶出量，與光纖檢測的溶出度值比較其差值。奮乃靜片在上述3個時間點處手動取樣測定吸光度，經計算溶出度后與光纖比較，得出差值。在10 min時光纖與手動平均相差4.15%，誤差較大，原因是此時藥片快速溶出，手動取樣與光纖檢測時間不可能完全一致，在微小的時間差內藥片溶出迅速，故產生較大誤差，而FODT為計算機操作，實時檢測藥物吸光度，避免了人為操作產生的誤差，精準反映藥片實時溶出結果。在17 min時藥物平均相對百分溶出度已達到77%，藥物基本溶出，光纖與手動平均僅相差1.90%。60 min時藥物平均相對百分溶出度已達到95%，藥物完全溶出，光纖與手動平均僅相差1.53%，見表1。

圖2 奮乃靜片光纖實時溶出度曲線

表1 FODT與紫外分光光度法溶出百分率比較/%

3 結論

FODT 法測定溶出度時光纖探頭始終處于溶出液中，溶出液為一渾濁體系，輔料對測定藥物的吸光度造成干擾，采用動態(tài)倍率系數法可消除輔料對測定值的干擾。

奮乃靜片在5～10 min時溶出度快速達到40%，溶出速率較快，人工取樣在這一時間段很難做到取樣一致；而FODT法探頭始終處于溶出液中，每 10 s采集1次數據，保證了數據獲取的一致性。

奮乃靜片的標示量很小，100%溶出時最大濃度為4 μg/mL，在過濾和稀釋過程很少的吸附就會引入較大的誤差。FODT法采用數學模型，無需取樣，減少了稀釋等操作帶來的誤差。本研究為快速釋放及小規(guī)格藥物溶出度過程分析提供了一種可以借鑒的方法。

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