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鴨疫里默氏桿菌血清型鑒定及耐藥性分析

2014-07-18 16:51蔡丙嚴(yán)王濤吳植李巨銀
江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年1期
關(guān)鍵詞:藥敏試驗(yàn)鑒定血清型

蔡丙嚴(yán) 王濤 吳植 李巨銀

摘要:從泰州地區(qū)疑似鴨疫里默氏桿菌感染鴨場采集病料,經(jīng)細(xì)菌分離培養(yǎng)得到2株菌株,通過細(xì)菌形態(tài)、培養(yǎng)特性、生化試驗(yàn)等方法鑒定為鴨疫里默氏桿菌,分別命名為TY1株和TY2株。采用玻片凝集試驗(yàn)對(duì)2個(gè)分離株進(jìn)行血清型鑒定、K-B 紙片擴(kuò)散法進(jìn)行12種常用抗菌藥物的藥敏試驗(yàn),結(jié)果顯示,TY1和TY2株均為血清1型,對(duì)頭孢吡肟、環(huán)丙沙星高度敏感,對(duì)復(fù)方新諾明、阿米卡星、慶大霉素、青霉素、鏈霉素、阿奇霉素、林可霉素、利福平耐藥。

關(guān)鍵詞:鴨疫里默氏桿菌;血清型;鑒定;藥敏試驗(yàn)

中圖分類號(hào): S858.322.61文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2014)01-0168-02

收稿日期:2013-05-09

基金項(xiàng)目:江蘇省高等學(xué)校大學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃(編號(hào):2012JSSPITP3463);江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院科技資助項(xiàng)目(編號(hào):YB1204)。

作者簡介:蔡丙嚴(yán)(1980—),男,河南濮陽人,碩士,講師,主要從事動(dòng)物防疫與檢疫專業(yè)的教學(xué)及科研工作。E-mail:caibingyan20@163.com。鴨疫里默氏桿菌(Riemerella anatipestifer,RA)是一種革蘭氏陰性、無鞭毛、無芽孢的棒狀桿菌,瑞氏染色呈兩極著色。鴨疫里默氏桿菌所引起的傳染病稱為鴨傳染性漿膜炎,該病呈世界范圍分布,給養(yǎng)鴨業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。

RA對(duì)營養(yǎng)要求較高,在普通營養(yǎng)瓊脂和麥康凱瓊脂上不生長,在胰酶大豆瓊脂(TSA)、血液瓊脂、巧克力瓊脂上生長良好。RA在初次分離培養(yǎng)時(shí)對(duì)CO2依賴性強(qiáng),一般在燭罐或CO2培養(yǎng)箱中,提高CO2濃度和濕度,37 ℃培養(yǎng) 48~72 h,RA生長最佳[2]。RA血清型眾多且非常復(fù)雜,現(xiàn)在國際上報(bào)道的血清型共有21 種,其中優(yōu)勢血清型為 1 型和 2 型[3],在我國,程安春等在此基礎(chǔ)上又發(fā)現(xiàn)了4 個(gè)新的血清型[4]。血清型的復(fù)雜及血清型之間無交叉保護(hù)力給此病的防治帶來極大的困難,多年來,由于生產(chǎn)上盲目用藥、濫用藥或超劑量用藥,RA對(duì)各種抗生素均產(chǎn)生不同程度的耐藥性,尤其對(duì)喹諾酮類和氨基糖苷類抗生素的耐藥性非常普遍,耐藥率極高,耐藥情況復(fù)雜,并且來自同一群不同株對(duì)同一藥物敏感性有差異的情況非常普遍[5-6]。

從江蘇泰州周邊地區(qū)2個(gè)規(guī)模養(yǎng)鴨場臨床疑似鴨疫里默氏桿菌感染的病死鴨中,進(jìn)行病原分離和血清型鑒定,并且對(duì)分離菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),為切實(shí)做好該病的防治工作提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1病料來源2013年3月,從泰州周邊地區(qū)獲得臨床具有典型鴨疫里默氏桿菌感染的病死鴨,從病死鴨的腦、心血、肝臟中分離獲得2株菌株,分別命名為TY1、TY2。

1.1.2培養(yǎng)基胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA,批號(hào):2107469)、胰蛋白酶大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB,批號(hào):2191068),均購自碧迪醫(yī)療器械(上海)有限公司;麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(批號(hào):12075)、普通瓊脂培養(yǎng)基(批號(hào):120909),均購自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.1.3藥品阿莫西林、慶大霉素、環(huán)丙沙星、多西環(huán)素、頭孢吡肟、阿米卡星、復(fù)方新諾明、青霉素、鏈霉素、阿奇霉素、林可霉素、利福平等12種藥敏試紙(批號(hào):20120920),購自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.1.4試劑革蘭氏染液、瑞氏染液、微量生化發(fā)酵管,均購自杭州天和微生物試劑有限公司;犢牛血清,購自浙江天航生物科技有限公司;鴨疫里默氏桿菌1~10型陽性血清,購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.2方法

1.2.1細(xì)菌分離培養(yǎng)與形態(tài)觀察無菌采取病死鴨腦、心血、肝臟等病料,分別接種于普通瓊脂培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)、巧克力瓊脂培養(yǎng)基、鮮血瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上,置37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48 h。觀察菌落形態(tài),挑取單個(gè)疑似菌落涂片,革蘭氏染色和瑞氏染色鏡檢,純培養(yǎng)后,以40%甘油生理鹽水于-70 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2生化試驗(yàn)挑取TSA 瓊脂培養(yǎng)基、鮮血瓊脂培養(yǎng)基平板上純化的疑似 RA 菌株,按 Edwards PR 的方法用接種環(huán)在超凈臺(tái)將菌落接種于乳糖、半乳糖、蕈糖、果糖、蔗糖、棉子糖、葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、山梨醇、枸櫞酸鹽、H2S、M-R、V-P 尿素酶、吲哚等生化培養(yǎng)基上,繼續(xù)培養(yǎng) 48~72 h 觀察試驗(yàn)結(jié)果。

1.2.3血清型鑒定將純化培養(yǎng)的分離菌株在含有5%犢牛血清的 TSA 培養(yǎng)基上,37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36 h。取1滴標(biāo)準(zhǔn)陽性血清滴于干凈玻片上,挑取少量菌落混勻于標(biāo)準(zhǔn)陽性血清中,靜置片刻觀察玻片凝集結(jié)果。

1.2.4藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片擴(kuò)散法,將保存的2株菌株分別在TSA瓊脂培養(yǎng)基平板上擴(kuò)增培養(yǎng),刮取菌落,用滅菌生理鹽水稀釋細(xì)菌懸液至1.5×108個(gè)/mL,吸取0.1 mL均勻涂布于TSA瓊脂培養(yǎng)基平板上,待菌液表面干燥后,用滅菌鑷子將抗生素紙片貼附在瓊脂表面,繼續(xù)培養(yǎng) 48 h后測量抑菌圈直徑。

2結(jié)果與分析

2.1細(xì)菌分離培養(yǎng)特性與形態(tài)特征

分離菌株在胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)上生長良好,菌落濕潤,小菌落呈露滴樣,在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上不生長。取菌落涂片、染色鏡檢,革蘭氏染色可見陰性小桿菌,單個(gè)或成雙存在;瑞氏染色呈現(xiàn)兩極濃染的小桿菌。

2.2生化試驗(yàn)

由表1可見,TY1和TY2株均不發(fā)酵乳糖、半乳糖、葡萄糖、麥芽糖、蔗糖等多種碳水化合物,不產(chǎn)生靛基質(zhì)和硫化氫,過氧化氫酶、氧化酶和明膠液化試驗(yàn)為陽性,符合鴨疫里默氏桿菌的生化反應(yīng)特征。

表12株分離菌株生化特性鑒定結(jié)果

項(xiàng)目1結(jié)果1項(xiàng)目1結(jié)果1項(xiàng)目1結(jié)果乳糖1-1麥芽糖1-1M-R1-半乳糖1-1甘露醇1-1H2S1-覃糖1-1山梨醇1-1過氧化氫酶1+果糖1-1枸櫞酸鹽1-1尿素酶1-蔗糖1-1硝酸鹽還原1-1氧化酶1+棉子糖1-1檸檬酸鹽1-1吲哚1-葡萄糖1-1V-P1-1明膠液化1+

2.3血清型鑒定

將TY1和TY2株分別與鴨疫里默氏桿菌1~10型單因子陽性血清做玻片凝集試驗(yàn),兩菌株均與1型陽性血清出現(xiàn)清晰的乳白色絮狀凝集塊,與其他型陽性血清均不反應(yīng)。由此鑒定,TY1和TY2株均為血清1型。

2.4藥敏試驗(yàn)

由表2可見,TY1和TY2株對(duì)頭孢吡肟、環(huán)丙沙星高度敏感,對(duì)強(qiáng)力霉素、阿莫西林中度敏感,對(duì)復(fù)方新諾明、阿米卡星、慶大霉素、青霉素、鏈霉素、阿奇霉素、林可霉素、利福平耐藥。

表22株分離菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

藥物名稱1抑菌圈直徑(mm)TY11TY21藥物濃度

(μg/片)頭孢吡肟119118115環(huán)丙沙星11611715強(qiáng)力霉素112113130阿莫西林114111110復(fù)方新諾明1919123.71、1.25阿米卡星1918130慶大霉素1818110青霉素1917110鏈霉素1718110阿奇霉素1816115林可霉素151712利福平151315注:抑菌圈直徑10 mm 以下為耐藥(不敏感);10~15 mm為中度敏感;15 mm以上為高度敏感。

3小結(jié)與討論

鴨疫里默氏桿菌初次分離培養(yǎng),由于所需生長條件苛刻、病料不新鮮和鴨場大量使用抗生素等原因,往往不易分離到,因此,RA初次分離,病料的采取和培養(yǎng)條件的選擇至關(guān)重要。從分離過程中發(fā)現(xiàn),在病鴨剛死亡或?yàn)l臨死亡時(shí)無菌采取鴨腦組織和心血,且在TSA瓊脂培養(yǎng)基平板上37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48 h,病菌分離成功率較高。

血清型鑒定有利于疫苗的研究和RA 控制。由于RA 血清型較多,且各血清型之間的交叉保護(hù)性差, 因此,研制針對(duì)本地血清型的RA疫苗對(duì)于鴨疫里默氏桿菌的防治具有重要意義[7]。根據(jù)胡清海等人的調(diào)查,江蘇地區(qū)主要以1、2、10 型為主[8]。從本次試驗(yàn)結(jié)果可知,泰州周邊地區(qū)規(guī)模鴨場分離的2株RA菌株均為血清1型,基本摸清了本地區(qū)流行RA菌株的優(yōu)勢血清型,為研制相應(yīng)血清型的疫苗、控制該病的發(fā)生奠定了理論基礎(chǔ)。

目前,鴨疫里默氏桿菌已成為國內(nèi)危害養(yǎng)鴨業(yè)最嚴(yán)重的傳染病之一,大部分鴨場,尤其是肉鴨場都有此病發(fā)生。雖然 RA 對(duì)多種抗生素敏感,但極易產(chǎn)生耐藥性,而且不同地區(qū)、不同菌株對(duì)抗菌藥物的敏感性不一,給實(shí)際治療工作帶來困難,最好能對(duì)當(dāng)?shù)胤蛛x菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),以便選擇最佳藥物進(jìn)行治療[9]。頭孢吡肟為新的第四代注射用頭孢菌素,對(duì)葡萄球菌屬和腸桿菌屬(尤其產(chǎn)氣和陰溝腸桿菌)的作用更強(qiáng),對(duì)多種質(zhì)粒介導(dǎo)和染色體介導(dǎo)的β內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,獸醫(yī)臨床應(yīng)用較少。本次藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,泰州地區(qū)鴨疫里默氏桿菌對(duì)頭孢吡肟和環(huán)丙沙星高度敏感,對(duì)氨基糖苷類抗生素如慶大霉素、丁胺卡那霉素、林可胺類抗生素和磺胺類抗生素等耐藥。因此,臨床選擇用藥時(shí)必須以藥敏試驗(yàn)結(jié)果為依據(jù),才能做到正確用藥,減少耐藥菌的產(chǎn)生,從而提高治愈率,減少經(jīng)濟(jì)損失[10],有條件的鴨場更應(yīng)定期對(duì)環(huán)境中RA的藥敏特性進(jìn)行監(jiān)測,以便在發(fā)病時(shí)及時(shí)有效地用藥。

參考文獻(xiàn):

[1]Calnek B W. 禽病學(xué)[M]. 11版. 高福,蘇敬良,索勛,等譯. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005:767-772.

[2]馬志偉,劉世超,許家榮,等. 鴨疫里默氏桿菌的分離、鑒定及培養(yǎng)條件優(yōu)化[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(5):1123-1126,1155.

[3]Pathanasophon P,Phuektes P,Tanticharoenyos T,et al. A potential new serotype of Riemerella anatipestifer isolated from ducks in Thailand[J]. Avian Pathology,2002,31(3):267-270.

[4]程安春,汪銘書,陳孝躍,等. 我國鴨疫里默氏桿菌血清型調(diào)查及新血清型的發(fā)現(xiàn)和病原特性[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),2003,23(4):320-323.

[5]劉穎,蘇敬良,劉文華,等. 鴨疫里默氏菌的藥物敏感性檢測[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2005,41(5):10-12.

[6]許金俊,范海峰,金文杰,等. 徐州地區(qū)鴨傳染性漿膜炎的病原分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2006,28(5):503-506.

[7]呂敏娜,黃承鋒,張毓金. 鴨疫里默氏桿菌大腸桿菌二聯(lián)蜂膠苗的研制[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2005,41(1):48-50.

[8]胡清海,張知良,苗晉鋒,等. 江蘇安徽兩省鴨疫里默氏桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 中國獸醫(yī)科技,2001,31(8):12-13.

[9]謝永平,陳澤祥,許力干,等. 鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及耐藥性研究[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,41(7):729-731.

[10]都振玉.濰坊地區(qū)鴨傳染性漿膜炎病原體的分離鑒定與疫苗制備應(yīng)用研究[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2009:1-47.成鋼,王文龍,趙銘,等. 湖區(qū)波爾山羊常見寄生蟲病臨床診斷與綜合防控[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(1):170-171.

項(xiàng)目1結(jié)果1項(xiàng)目1結(jié)果1項(xiàng)目1結(jié)果乳糖1-1麥芽糖1-1M-R1-半乳糖1-1甘露醇1-1H2S1-覃糖1-1山梨醇1-1過氧化氫酶1+果糖1-1枸櫞酸鹽1-1尿素酶1-蔗糖1-1硝酸鹽還原1-1氧化酶1+棉子糖1-1檸檬酸鹽1-1吲哚1-葡萄糖1-1V-P1-1明膠液化1+

2.3血清型鑒定

將TY1和TY2株分別與鴨疫里默氏桿菌1~10型單因子陽性血清做玻片凝集試驗(yàn),兩菌株均與1型陽性血清出現(xiàn)清晰的乳白色絮狀凝集塊,與其他型陽性血清均不反應(yīng)。由此鑒定,TY1和TY2株均為血清1型。

2.4藥敏試驗(yàn)

由表2可見,TY1和TY2株對(duì)頭孢吡肟、環(huán)丙沙星高度敏感,對(duì)強(qiáng)力霉素、阿莫西林中度敏感,對(duì)復(fù)方新諾明、阿米卡星、慶大霉素、青霉素、鏈霉素、阿奇霉素、林可霉素、利福平耐藥。

表22株分離菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

藥物名稱1抑菌圈直徑(mm)TY11TY21藥物濃度

(μg/片)頭孢吡肟119118115環(huán)丙沙星11611715強(qiáng)力霉素112113130阿莫西林114111110復(fù)方新諾明1919123.71、1.25阿米卡星1918130慶大霉素1818110青霉素1917110鏈霉素1718110阿奇霉素1816115林可霉素151712利福平151315注:抑菌圈直徑10 mm 以下為耐藥(不敏感);10~15 mm為中度敏感;15 mm以上為高度敏感。

3小結(jié)與討論

鴨疫里默氏桿菌初次分離培養(yǎng),由于所需生長條件苛刻、病料不新鮮和鴨場大量使用抗生素等原因,往往不易分離到,因此,RA初次分離,病料的采取和培養(yǎng)條件的選擇至關(guān)重要。從分離過程中發(fā)現(xiàn),在病鴨剛死亡或?yàn)l臨死亡時(shí)無菌采取鴨腦組織和心血,且在TSA瓊脂培養(yǎng)基平板上37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48 h,病菌分離成功率較高。

血清型鑒定有利于疫苗的研究和RA 控制。由于RA 血清型較多,且各血清型之間的交叉保護(hù)性差, 因此,研制針對(duì)本地血清型的RA疫苗對(duì)于鴨疫里默氏桿菌的防治具有重要意義[7]。根據(jù)胡清海等人的調(diào)查,江蘇地區(qū)主要以1、2、10 型為主[8]。從本次試驗(yàn)結(jié)果可知,泰州周邊地區(qū)規(guī)模鴨場分離的2株RA菌株均為血清1型,基本摸清了本地區(qū)流行RA菌株的優(yōu)勢血清型,為研制相應(yīng)血清型的疫苗、控制該病的發(fā)生奠定了理論基礎(chǔ)。

目前,鴨疫里默氏桿菌已成為國內(nèi)危害養(yǎng)鴨業(yè)最嚴(yán)重的傳染病之一,大部分鴨場,尤其是肉鴨場都有此病發(fā)生。雖然 RA 對(duì)多種抗生素敏感,但極易產(chǎn)生耐藥性,而且不同地區(qū)、不同菌株對(duì)抗菌藥物的敏感性不一,給實(shí)際治療工作帶來困難,最好能對(duì)當(dāng)?shù)胤蛛x菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),以便選擇最佳藥物進(jìn)行治療[9]。頭孢吡肟為新的第四代注射用頭孢菌素,對(duì)葡萄球菌屬和腸桿菌屬(尤其產(chǎn)氣和陰溝腸桿菌)的作用更強(qiáng),對(duì)多種質(zhì)粒介導(dǎo)和染色體介導(dǎo)的β內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,獸醫(yī)臨床應(yīng)用較少。本次藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,泰州地區(qū)鴨疫里默氏桿菌對(duì)頭孢吡肟和環(huán)丙沙星高度敏感,對(duì)氨基糖苷類抗生素如慶大霉素、丁胺卡那霉素、林可胺類抗生素和磺胺類抗生素等耐藥。因此,臨床選擇用藥時(shí)必須以藥敏試驗(yàn)結(jié)果為依據(jù),才能做到正確用藥,減少耐藥菌的產(chǎn)生,從而提高治愈率,減少經(jīng)濟(jì)損失[10],有條件的鴨場更應(yīng)定期對(duì)環(huán)境中RA的藥敏特性進(jìn)行監(jiān)測,以便在發(fā)病時(shí)及時(shí)有效地用藥。

參考文獻(xiàn):

[1]Calnek B W. 禽病學(xué)[M]. 11版. 高福,蘇敬良,索勛,等譯. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005:767-772.

[2]馬志偉,劉世超,許家榮,等. 鴨疫里默氏桿菌的分離、鑒定及培養(yǎng)條件優(yōu)化[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(5):1123-1126,1155.

[3]Pathanasophon P,Phuektes P,Tanticharoenyos T,et al. A potential new serotype of Riemerella anatipestifer isolated from ducks in Thailand[J]. Avian Pathology,2002,31(3):267-270.

[4]程安春,汪銘書,陳孝躍,等. 我國鴨疫里默氏桿菌血清型調(diào)查及新血清型的發(fā)現(xiàn)和病原特性[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),2003,23(4):320-323.

[5]劉穎,蘇敬良,劉文華,等. 鴨疫里默氏菌的藥物敏感性檢測[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2005,41(5):10-12.

[6]許金俊,范海峰,金文杰,等. 徐州地區(qū)鴨傳染性漿膜炎的病原分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2006,28(5):503-506.

[7]呂敏娜,黃承鋒,張毓金. 鴨疫里默氏桿菌大腸桿菌二聯(lián)蜂膠苗的研制[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2005,41(1):48-50.

[8]胡清海,張知良,苗晉鋒,等. 江蘇安徽兩省鴨疫里默氏桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 中國獸醫(yī)科技,2001,31(8):12-13.

[9]謝永平,陳澤祥,許力干,等. 鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及耐藥性研究[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,41(7):729-731.

[10]都振玉.濰坊地區(qū)鴨傳染性漿膜炎病原體的分離鑒定與疫苗制備應(yīng)用研究[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2009:1-47.成鋼,王文龍,趙銘,等. 湖區(qū)波爾山羊常見寄生蟲病臨床診斷與綜合防控[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(1):170-171.

項(xiàng)目1結(jié)果1項(xiàng)目1結(jié)果1項(xiàng)目1結(jié)果乳糖1-1麥芽糖1-1M-R1-半乳糖1-1甘露醇1-1H2S1-覃糖1-1山梨醇1-1過氧化氫酶1+果糖1-1枸櫞酸鹽1-1尿素酶1-蔗糖1-1硝酸鹽還原1-1氧化酶1+棉子糖1-1檸檬酸鹽1-1吲哚1-葡萄糖1-1V-P1-1明膠液化1+

2.3血清型鑒定

將TY1和TY2株分別與鴨疫里默氏桿菌1~10型單因子陽性血清做玻片凝集試驗(yàn),兩菌株均與1型陽性血清出現(xiàn)清晰的乳白色絮狀凝集塊,與其他型陽性血清均不反應(yīng)。由此鑒定,TY1和TY2株均為血清1型。

2.4藥敏試驗(yàn)

由表2可見,TY1和TY2株對(duì)頭孢吡肟、環(huán)丙沙星高度敏感,對(duì)強(qiáng)力霉素、阿莫西林中度敏感,對(duì)復(fù)方新諾明、阿米卡星、慶大霉素、青霉素、鏈霉素、阿奇霉素、林可霉素、利福平耐藥。

表22株分離菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

藥物名稱1抑菌圈直徑(mm)TY11TY21藥物濃度

(μg/片)頭孢吡肟119118115環(huán)丙沙星11611715強(qiáng)力霉素112113130阿莫西林114111110復(fù)方新諾明1919123.71、1.25阿米卡星1918130慶大霉素1818110青霉素1917110鏈霉素1718110阿奇霉素1816115林可霉素151712利福平151315注:抑菌圈直徑10 mm 以下為耐藥(不敏感);10~15 mm為中度敏感;15 mm以上為高度敏感。

3小結(jié)與討論

鴨疫里默氏桿菌初次分離培養(yǎng),由于所需生長條件苛刻、病料不新鮮和鴨場大量使用抗生素等原因,往往不易分離到,因此,RA初次分離,病料的采取和培養(yǎng)條件的選擇至關(guān)重要。從分離過程中發(fā)現(xiàn),在病鴨剛死亡或?yàn)l臨死亡時(shí)無菌采取鴨腦組織和心血,且在TSA瓊脂培養(yǎng)基平板上37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48 h,病菌分離成功率較高。

血清型鑒定有利于疫苗的研究和RA 控制。由于RA 血清型較多,且各血清型之間的交叉保護(hù)性差, 因此,研制針對(duì)本地血清型的RA疫苗對(duì)于鴨疫里默氏桿菌的防治具有重要意義[7]。根據(jù)胡清海等人的調(diào)查,江蘇地區(qū)主要以1、2、10 型為主[8]。從本次試驗(yàn)結(jié)果可知,泰州周邊地區(qū)規(guī)模鴨場分離的2株RA菌株均為血清1型,基本摸清了本地區(qū)流行RA菌株的優(yōu)勢血清型,為研制相應(yīng)血清型的疫苗、控制該病的發(fā)生奠定了理論基礎(chǔ)。

目前,鴨疫里默氏桿菌已成為國內(nèi)危害養(yǎng)鴨業(yè)最嚴(yán)重的傳染病之一,大部分鴨場,尤其是肉鴨場都有此病發(fā)生。雖然 RA 對(duì)多種抗生素敏感,但極易產(chǎn)生耐藥性,而且不同地區(qū)、不同菌株對(duì)抗菌藥物的敏感性不一,給實(shí)際治療工作帶來困難,最好能對(duì)當(dāng)?shù)胤蛛x菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),以便選擇最佳藥物進(jìn)行治療[9]。頭孢吡肟為新的第四代注射用頭孢菌素,對(duì)葡萄球菌屬和腸桿菌屬(尤其產(chǎn)氣和陰溝腸桿菌)的作用更強(qiáng),對(duì)多種質(zhì)粒介導(dǎo)和染色體介導(dǎo)的β內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,獸醫(yī)臨床應(yīng)用較少。本次藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,泰州地區(qū)鴨疫里默氏桿菌對(duì)頭孢吡肟和環(huán)丙沙星高度敏感,對(duì)氨基糖苷類抗生素如慶大霉素、丁胺卡那霉素、林可胺類抗生素和磺胺類抗生素等耐藥。因此,臨床選擇用藥時(shí)必須以藥敏試驗(yàn)結(jié)果為依據(jù),才能做到正確用藥,減少耐藥菌的產(chǎn)生,從而提高治愈率,減少經(jīng)濟(jì)損失[10],有條件的鴨場更應(yīng)定期對(duì)環(huán)境中RA的藥敏特性進(jìn)行監(jiān)測,以便在發(fā)病時(shí)及時(shí)有效地用藥。

參考文獻(xiàn):

[1]Calnek B W. 禽病學(xué)[M]. 11版. 高福,蘇敬良,索勛,等譯. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005:767-772.

[2]馬志偉,劉世超,許家榮,等. 鴨疫里默氏桿菌的分離、鑒定及培養(yǎng)條件優(yōu)化[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(5):1123-1126,1155.

[3]Pathanasophon P,Phuektes P,Tanticharoenyos T,et al. A potential new serotype of Riemerella anatipestifer isolated from ducks in Thailand[J]. Avian Pathology,2002,31(3):267-270.

[4]程安春,汪銘書,陳孝躍,等. 我國鴨疫里默氏桿菌血清型調(diào)查及新血清型的發(fā)現(xiàn)和病原特性[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),2003,23(4):320-323.

[5]劉穎,蘇敬良,劉文華,等. 鴨疫里默氏菌的藥物敏感性檢測[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2005,41(5):10-12.

[6]許金俊,范海峰,金文杰,等. 徐州地區(qū)鴨傳染性漿膜炎的病原分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2006,28(5):503-506.

[7]呂敏娜,黃承鋒,張毓金. 鴨疫里默氏桿菌大腸桿菌二聯(lián)蜂膠苗的研制[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2005,41(1):48-50.

[8]胡清海,張知良,苗晉鋒,等. 江蘇安徽兩省鴨疫里默氏桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 中國獸醫(yī)科技,2001,31(8):12-13.

[9]謝永平,陳澤祥,許力干,等. 鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及耐藥性研究[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,41(7):729-731.

[10]都振玉.濰坊地區(qū)鴨傳染性漿膜炎病原體的分離鑒定與疫苗制備應(yīng)用研究[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2009:1-47.成鋼,王文龍,趙銘,等. 湖區(qū)波爾山羊常見寄生蟲病臨床診斷與綜合防控[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(1):170-171.

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