申曉莉,葉 春,孟坤武,楊曉玲,黃園媛,朱 波,孫 霖
(四川省大竹縣動物疫病預防控制中心,635100)
四君子湯出自《太平惠民和劑局方》,藥物配方是:人參9 克,白術9 克,茯苓9 克,甘草6 克。據(jù)《醫(yī)方解集.補養(yǎng)之劑》記載:人參甘溫,大補元氣為君;白術苦溫,燥脾補氣為臣;茯苓甘淡,滲濕瀉熱為佐;甘草干平,和中益土為使。四君子湯具有補中益氣、健脾燥濕、解毒、增強抵抗力、抗胃腸粘膜損傷、調節(jié)胃腸活動、促進消化吸收、增強腸道粘膜免疫功能、調節(jié)胃腸激素、抗腫瘤、抗疲勞等功能。
目前,國內外尚未有報道四君子湯對豬只豬瘟病毒抗體、藍耳病抗體、口蹄疫病毒抗體的影響。我們于2014 年10 月至11 月,在大竹某豬場進行了四君子湯用藥前后這三種抗體的檢測實驗,現(xiàn)就其檢測結果分析、報告如下。
實驗豬只。大竹縣某養(yǎng)豬場30 日齡斷奶仔豬100 頭,經健康檢查后隨機挑選60 頭,分為實驗組和對照組,每組30 頭。藥物配方:人參9 克,白術9 克,茯苓9 克,甘草6 克,超微粉碎,密閉保存。
疫苗:豬瘟耐熱保護苗,成都天邦生物制品有限公司,批號2014037;豬O 型口蹄疫疫苗,中牧實業(yè)保山藥廠,批號201407005;藍耳滅活苗,中牧實業(yè)成都藥械廠,批號1407013。檢測試劑:豬瘟病毒抗體檢測試劑盒,深圳市康百得生物科技有限公司,批號20140228;豬藍耳病抗體檢測試劑盒,深圳市康百得生物科技有限公司,批號20140311;豬口蹄疫病毒抗體檢測試劑盒,深圳市康百得生物科技有限公司,批號20140227。
飼養(yǎng)方法:實驗組按照平常飼養(yǎng)程序進行,實驗組在飼料中添加四君子湯組方,每頭仔豬9 克/天,從31 日齡開始飼喂,連用15 天。
免疫程序和方法:按照疫苗瓶標簽說明,對34 日齡仔豬每頭分點接種豬瘟疫苗2.2 頭份、豬O 型口蹄疫疫苗2.2ml,對44 日齡仔豬每頭接種藍耳病滅活苗2.2 頭份,都是耳后肌肉注射。
樣品采集:分別在30 日齡(用藥前)和60 日齡(用藥后)對仔豬進行采血,分離血清,冷凍保存,待檢。
檢測方法:操作按照ELISA 試劑盒使用說明書進行。
1.3.1 豬瘟實驗
實驗結果有效性判定:陰性對照孔OD 值≤0.15(若大于0.15 則實驗無效);陽性對照孔OD 值≥0.30(若小于0.30 則實驗無效)。
檢測結果判定:陰性對照平均OD 值小于0.08 按0.08 計,結果用S/N 表示;當S/N>2.1 時,判定豬瘟病毒抗體陽性;當S/N≤2.1 時,判為豬瘟病毒抗體陰性;S/N=樣品OD 值/陰性對照平均OD 值。
1.3.2 藍耳病
實驗結果有效性判定:陰性對照孔OD 值≤0.15(若大于0.15 則實驗無效);陽性對照孔OD 值≥0.30(若小于0.30 則實驗無效)。
檢測結果判定:陰性對照平均OD 值小于0.08 按0.08 計,結果用S/N 表示;當S/N>2.1 時,判定豬藍耳病抗體陽性;當S/N≤2.1 時,判為豬藍耳病抗體陰性;S/N=樣品OD 值/陰性對照平均OD 值。
檢測方法和判斷標準和判定標準與周艷萍[1]報道一致。
1.3.3 豬口蹄疫實驗
實驗結果有效性判定:陰性對照孔OD 值≤0.15(若大于0.15 則實驗無效);陽性對照孔OD 值≥0.30(若小于0.30 則實驗無效);
檢測結果判定:陰性對照平均OD 值小于0.08 按0.08 計,結果用S/N 表示;當S/N>2.1 時,判定豬口蹄疫病毒抗體陽性;當S/N≤2.1 時,判為豬口蹄疫病毒抗體陰性;S/N=樣品OD 值/陰性對照平均OD 值。
為了使實驗數(shù)據(jù)真實可靠性,剔除了實驗中途死亡的豬只數(shù)據(jù)。因而,在統(tǒng)計整理數(shù)據(jù)時,實驗組按28 頭、對照組按24頭計算。
用藥前后群體三種免疫抗體合格率和平均S/N 值見表1。
表1 用藥前后群體三種免疫抗體合格率和平均S/N 值
從表1 可以看出:用藥前,實驗組和對照組在豬瘟病毒抗體、藍耳病抗體、口蹄疫病毒抗體的合格率和平均S/N 值基本沒有差異。用藥后,實驗組豬瘟病毒抗體合格率(92.85%)遠遠高于對照組(83.33%),實驗組藍耳病抗體合格率(96.43%)也遠遠高于對照組(83.33%),實驗組口蹄疫病毒抗體合格率(89.28%)與對照組(87.5%%)差異不大。用藥后實驗組豬瘟病毒抗體、藍耳病抗體、口蹄疫病毒抗體平均S/N 值高于照組。說明添加四君子湯后,仔豬豬瘟病毒抗體、藍耳病抗體、豬口蹄疫病毒抗體合格率和平均S/N 值都高于對照組。說明四君子湯對提高保育階段豬只的豬瘟病毒抗體、藍耳病抗體、口蹄疫病毒抗體合格率和平均S/N 值的增加有促進作用。本實驗檢測結果為四君子湯在豬場臨床應用提供了可行性依據(jù)。
[1]周艷萍,楊繼元,趙志剛。高致病性豬藍耳病活疫苗免疫抗體監(jiān)測的分析報告[J].養(yǎng)殖技術顧問,2014,10:237-238.