陳婧，陳璽，柯文山，王萬賢，袁莉，王美玲，趙佩奇，陳文華

（湖北大學生命科學學院，湖北 武漢430062）

0 引言

日本血吸蟲病是廣泛流行于中國和東南亞各國的寄生蟲病.湖北釘螺（Oncomelaniahupensis）是日本血吸蟲的唯一中間宿主，控制釘螺的發(fā)生是控制日本血吸蟲病流行的有效防治手段之一［1］，了解釘螺的生長發(fā)育和繁殖情況是實現(xiàn)控制釘螺數(shù)量的基礎(chǔ)工作.資料顯示，在釘螺的飼養(yǎng)方面有用蚯蚓糞作為飼養(yǎng)飼料［2］、泥土混合飼料［3］、螺旋藻和魚腥藻飼料［4-5］，也有用含藻類干粉的營養(yǎng)紙飼養(yǎng)［6］以及人工配方飼料［7-8］多種.本實驗選用釘螺滋生地常見且易獲材料為飼料，取浮游植物（phytoplankton）作為植物類型，常見的鯽魚（Carassiusauratus）、河蚌（Potamiluscapax）和蚯蚓（earthworm）作為動物類型，將3種動物材料分別與浮游植物材料按1∶1混合組成3種混合型飼料.用3種類型的7種飼料分別飼喂釘螺，觀察不同飼料對釘螺發(fā)育及繁殖的影響.所得實驗數(shù)據(jù)更接近釘螺野外生活的現(xiàn)狀，希望能有利于對疫區(qū)釘螺發(fā)生量的預(yù)測，并對釘螺防控工作起到積極的作用.

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 釘螺來源 成螺采自武漢市天興洲，卵和幼螺來自實驗室培養(yǎng).

1.1.2 飼料來源 浮游植物、河蚌和蚯蚓從釘螺生活地（武漢市天興洲）采集，鯽魚從超市購買.采集和購買來的材料經(jīng)室內(nèi)加工處理而成.

1.1.3 材料處理

1）植物型材料浮游植物晾干，動物型材料河蚌去殼，鯽魚去頭、鰭和大的棘刺.

2）用九陽豆?jié){機（型號D25D）將上述處理的飼養(yǎng)材料粉碎或勻漿.

3）以冷凍干燥機（型號 福特斯FTS-7.5）除去水分.

4）以研缽將飼料塊研成粉狀，過40目篩后置于食品袋中0℃低溫保存?zhèn)溆?混合飼料則將浮游植物干粉分別與動物干粉按1∶1混合后置于食品袋中0℃低溫保存?zhèn)溆?

5）制備的7種飼養(yǎng)飼料，下文中A＝水生浮游植物干粉，B＝鯽魚干粉，C＝河蚌干粉，D＝蚯蚓干粉，E＝水生浮游植物＋鯽魚干粉，F(xiàn)＝水生浮游植物＋河蚌干粉，G＝水生浮游植物＋蚯蚓干粉.

1.2 方法 幼螺的發(fā)育前期在飼養(yǎng)盒中進行，生長至4～5旋后轉(zhuǎn)至泥水盤中進行，將初孵幼螺按每組30只分為7組在飼養(yǎng)盒（12cm×12cm×9cm）中飼養(yǎng).每組投放上述7種飼料，每日投放一次，每周更換飼養(yǎng)盒中的去氯水一次.幼螺生長至5旋后轉(zhuǎn)至泥水瓷盤（32cm×23cm×7.5cm）中培養(yǎng)，泥盤放置時一端高出2cm，使盤中的泥面正好一半有水一半無水.幼螺飼料裝入紗巾做成的小紗袋（2.5cm×2.5cm）內(nèi)，便于更換.成螺飼料投放在1cm2的塑料墊片上，便于清理.飼養(yǎng)盒盤均置于25℃光照培養(yǎng)箱（GXZ型智能光照培養(yǎng)箱，寧波江南儀器制造廠）中進行.其他實驗于實驗室自然溫度.

將早春（4月上、中旬）從野外收集的釘螺成螺分成7組，每組10頭，室內(nèi)自然溫度條件下分別飼養(yǎng)在泥盤中，5d后將泥盤中的雌螺轉(zhuǎn)入泥皿中，分單只投放相同飼料繼續(xù)飼養(yǎng)，皿置于25℃的光照培養(yǎng)箱中，每種飼料分泥皿10個，連續(xù)10d計數(shù)單只雌螺繁殖數(shù)據(jù).

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析 釘螺每15d統(tǒng)計一次死亡率［9］.每處理隨機觀察10只雌螺，觀察記錄每只產(chǎn)卵量.每處理隨機選取10只幼螺在解剖鏡下用測微尺量體長.所用數(shù)據(jù)來自3次重復的平均值.方差分析采用鄧肯多重比較.

2 結(jié)果與分析

2.1 飼養(yǎng)幼螺的存活 不同飼料飼養(yǎng)下釘螺幼螺飼養(yǎng)至105d時，飼料G的存活率最高達43%，其他飼料存活率在30%～33%之間，B、C兩種飼料所飼養(yǎng)的幼螺一個月內(nèi)全部死亡（表1）.從表1可見，飼養(yǎng)幼螺的死亡以1～15d最高，以后隨幼螺的發(fā)育死亡率逐漸降低，90d以后的15d中無死亡.

表1 不同飼料飼養(yǎng)釘螺的死亡率與死亡時間

2.2 食物與發(fā)育 1種植物飼料（A）、3種動物性飼料（B、C、D）和3種混合飼料（E、F、G）喂養(yǎng)釘螺幼螺，觀察幼螺生長情況（圖1）.結(jié)果表明，在25℃的條件下，飼料A和G喂養(yǎng)的釘螺，其體長最長，分別為6.89mm和6.81mm，且顯著長于飼料F、E、D喂養(yǎng)的釘螺（P＜0.05），分別為3.05、4.51、5.11mm；飼料F、E、D喂養(yǎng)的釘螺也顯著長于飼料B、C所飼養(yǎng)的幼螺（P＜0.05）；飼料B、C所飼養(yǎng)的幼螺表現(xiàn)為不能發(fā)育.且A、D、E、F、G 5種飼料飼養(yǎng)的釘螺，在觀察期間內(nèi)，其體長與喂養(yǎng)時間程明顯的線性關(guān)系（圖2）.飼料A和G幾乎無差別，飼料E和F差別不明顯，飼料D發(fā)育緩慢.

圖1 釘螺幼螺在不同飼料下的發(fā)育（25℃）

圖2 飼料與釘螺體長發(fā)育的關(guān)系

2.3 飼料與繁殖 實驗每只或每組雌螺在10d內(nèi)的繁殖結(jié)果見表2.表2結(jié)果顯示：在25℃的溫度條件下，從野外采回的成螺在室內(nèi)各飼料飼養(yǎng)下均能正常產(chǎn)卵，其產(chǎn)卵量的高低、有效產(chǎn)卵天數(shù)、平均產(chǎn)卵天數(shù)均與飼料種類不同有關(guān).植物型飼料A飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時間長，產(chǎn)卵量高（13.9%）；動物型飼料B、C、D飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時間短產(chǎn)卵量也低；混合飼料E和F飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時間和產(chǎn)卵量低于植物型飼料，而高于動物型飼料飼養(yǎng)的釘螺.混合飼料G飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量最高（14.1%）.但不同飼料都表現(xiàn)出：產(chǎn)卵量隨時間的延長不斷減少，動物型飼料飼養(yǎng)的釘螺的產(chǎn)卵時間僅3～5d（圖3）.各種食物飼養(yǎng)的釘螺所產(chǎn)的卵均能正常孵化，其孵化率在77.30%～80.91%之間，孵化期（15.53±0.40）d［1］.

表2 不同飼料對釘螺繁殖的影響（25℃）

3 小結(jié)與討論

3.1 不同飼料喂養(yǎng)釘螺幼螺實驗表明（表1），浮游植物與蚯蚓混合飼料喂養(yǎng)的成活率最高，是較好的混合喂養(yǎng)飼料，而鯽魚和河蚌干粉則不宜于喂養(yǎng).飼養(yǎng)幼螺的死亡主要集中在孵化后的一個月內(nèi)，占總死亡率的80%以上，是飼養(yǎng)需要關(guān)注和改進的關(guān)鍵環(huán)節(jié).從不同飼料對幼螺生長情況看（圖1），在25℃的條件下，浮游植物干粉及蚯蚓與浮游植物混合飼養(yǎng)的幼螺發(fā)育最快.因此，這兩種飼料是本實驗最佳室內(nèi)喂養(yǎng)飼料，且利用水生浮游植物飼養(yǎng)釘螺具有簡便易得、經(jīng)濟實用的特點，是一種可供選擇的良好飼養(yǎng)材料.同時也可推斷，自然界中，水生浮游植物是湖北釘螺繁殖和生長發(fā)育的主要食物.

圖3 7種不同飼料對產(chǎn)卵量和產(chǎn)卵時間的影響產(chǎn)卵量為10頭♀螺所產(chǎn)，產(chǎn)卵時間為每組產(chǎn)卵天數(shù).

以蚯蚓干粉飼喂的釘螺相較于鯽魚干粉和河蚌干粉飼喂的釘螺，其存活的時間較長且能發(fā)育，可能與取自釘螺適生區(qū)蚯蚓的消化道內(nèi)有取食時隨泥土進入水生浮游植物、藻類和苔蘚等有關(guān).這可能也是有些報道可用蚯蚓糞和泥土能飼養(yǎng)釘螺的原因［2-3］.

3.2 從野外采回的成螺在室內(nèi)各飼料飼養(yǎng)下均能正常產(chǎn)卵，在25℃的溫度條件下植物型飼料飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時間長產(chǎn)卵量高（y＝-2.042x＋25.133，R2＝0.833 5）；動物型飼料產(chǎn)卵時間短產(chǎn)卵量也低（y＝-2.099x＋10.365，R2＝0.947 6）；混合飼料產(chǎn)卵時間和產(chǎn)卵量低于植物型飼料高于動物型飼料（y＝-2.109x＋23.331，R2＝0.961 3）.在3種不同類型飼料飼養(yǎng)的繁殖實驗中，浮游植物和混有浮游植物的混合飼料的產(chǎn)卵量遠高于單一動物飼料，說明植物型食物是繁殖釘螺的主要營養(yǎng)源.以動物型飼料飼養(yǎng)的釘螺能少量產(chǎn)卵3～5d，可能與前期野外生活時的營養(yǎng)儲備殘留有關(guān).

長期野外的數(shù)量調(diào)查［2］和資料顯示［3］，天興洲早春調(diào)查釘螺始現(xiàn)于3月下旬，交配產(chǎn)卵盛于4月中旬，至5月上旬產(chǎn)卵量逐漸減少.本實驗材料取于4月19日，20日開始用設(shè)定飼料進行“過渡”飼養(yǎng)，25日開始單只連續(xù)10d的產(chǎn)卵觀察，結(jié)束時間在5月上旬，室內(nèi)飼養(yǎng)實驗的產(chǎn)卵數(shù)量與時間的關(guān)系與野外調(diào)查的結(jié)果基本一致.表明生活在天興洲的湖北釘螺產(chǎn)卵期在4月上中旬至5月中旬，有明顯的較為集中的時間段［3］.

3.3 湖北釘螺產(chǎn)卵量的高低與食物種類密切相關(guān).水生浮游植物干粉飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量最高，混有水生浮游植物干粉的各動物型干粉飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量次之，單一動物型干粉飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量最低.從產(chǎn)卵量的時間效應(yīng)看，各飼料飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量隨產(chǎn)卵時間的延長產(chǎn)卵量逐漸減少，室內(nèi)飼養(yǎng)實驗的產(chǎn)卵數(shù)量與時間的關(guān)系與野外調(diào)查的結(jié)果基本一致.不同食物飼養(yǎng)對湖北釘螺卵的孵化率和孵化歷期影響不明顯，各種食物飼養(yǎng)的釘螺所產(chǎn)卵孵化率均在77.30%～80.91%之間.

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