李永輝 郄冰冰 郭永輝

·藥物研究·

注射用對氨基水楊酸鈉近紅外定量模型的建立

李永輝 郄冰冰 郭永輝

目的利用近紅外光譜法快速測定注射用對氨基水楊酸鈉的含量。方法采集注射用對氨基水楊酸鈉NIR光譜，采用偏最小二乘法(PLS)進行回歸，經外部交叉驗證建立注射用對氨基水楊酸鈉的NIR光譜與其主要成分的HPLC法測定值之間的多元校正模型，預測其主成分的含量。結果校正集樣品濃度范圍為98.1%～102.2%(mg/mg%)。外部交叉驗證決定系數(shù)(R2)為77.6，外部驗證均方差(RMSEP)為0.228。結論本方法快速、簡便，適用于藥品的現(xiàn)場快檢。

對氨基水楊酸鈉；NIR；偏最小二乘法

注射用對氨基水楊酸鈉 為抗結核藥物，用于結核分枝桿菌所致的肺及肺外結核病，為臨床常用藥物。現(xiàn)行標準為《中國藥典》2010年版二部[1]，其含量測定采用HPLC法。本文收集了來自國內不同地域、不同流通領域及不同貯存條件下3個廠家61批注射用對氨基水楊酸鈉，分別采集近紅外漫反射光譜，以偏最小二乘法(PLS)建立數(shù)學模型，對其主成分進行定量分析，并對預測集樣品進行測定，結果準確，分析速度快，表明NIR技術可用于現(xiàn)場監(jiān)督檢驗[2-6]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 Matrix-F近紅外光譜儀(德國BRUKER公司)，BRUKER公司OPUS 5.0分析軟件。島津LC-2010高效液相色譜儀；Sartorius電子天平，其余試劑均為分析純。3個生產廠家61批注射用對氨基水楊酸鈉為市場抽驗樣品，規(guī)格：2.0 g。分別來自國內不同地域、不同流通領域及不同貯存條件(溫度12～29℃；相對濕度35%～70%)。對氨基水楊酸鈉照品來自中國食品藥品檢定研究院。

1.2 方法

1.2.1 對氨基水楊酸鈉含量測定：照《中國藥典》2010年版二部[1]，采用HPLC測定主成分含量作為理論含量。測定61批樣品，濃度范圍為98.1%～102.2%(mg/mg%)。見圖1。

圖1 注射用對氨基水楊酸鈉理論含量分布情況

1.2.2 光譜采集：采用Matrix-F隨機配帶的光纖探頭，光譜掃描范圍為12 000～4 000/cm，分辨率8/cm，掃描次數(shù)32次，每批樣品測定3瓶，使用平均光譜建模。

2 結果

2.1 校正模型的建立 從61批樣品中選擇選擇40批樣品作為校正集(純度98.1%～102.2%)，21批樣品作為驗證集(純度99.5%～101.5%)，單位mg/mg%。利用OPUS軟件Quant-2中所有預處理方法和自動優(yōu)化功能(NIR方式) 對校正集樣品進行外部交叉驗證，主因子數(shù)為2，比較外部驗證RMSEP和Different/Ture結果，確定最優(yōu)校正模型預處理方法為矢量歸一，最佳光譜范圍5 450.2～4 505.2。外部交叉驗證決定系數(shù)(R2)為77.6，外部驗證均方差(RMSEP)為0.228，維數(shù)(Rank)為7。見圖2、3。

圖2 注射用對氨基水楊酸鈉最佳光譜范圍

圖3 注射用對氨基水楊酸鈉定量分析模型外部交叉驗證結果

2.2 準確性考察 用建立的模型測定預測驗證集中21個樣品的含量，考察模型預測結果的準確性和可靠性。NIR法預測結果與理論結果相比[3，4]，最大偏差為0.395 mg/mg%，最大相對偏差為0.4%。NIR預測結果與理論結果在95%可信區(qū)間內進行差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 注射用對氨基水楊酸鈉含量預測結果

2.3 專屬性考察 用樣品的馬氏距離與限定值進行比較檢驗異常樣品[4]。限定值=Factor×Rank/M 中Rank為主成分維數(shù)；M為建模樣品數(shù)，F(xiàn)actor為因子。限定值為0.35。于注射用對氨基水楊酸鈉西林瓶中加入適量的其它物質配制成異常樣品，利用建立模型分別測定，測得馬氏距離均大于限定值，說明所建立的定量模型具有良好的專屬性。

3 討論

3.1 建模樣品的選擇 本次樣品純度范圍較小,僅為98.1%～102.2%，驗證R2僅達77.6,因此認為所建模型的適用范圍較窄,在今后模型建立過程中將嘗試改變樣品濃度以擴大適用范圍.

3.2 誤差分析 在注射用粉針劑的測定中，由于不同企業(yè)西林瓶底部差異較大，并且部分企業(yè)樣品為疏松的塊狀物，因此測樣方式將對圖譜質量產生影響，建議試驗人員應規(guī)范操作。

1 國家藥典編委會主編.中國藥典(二部).北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.240.

2 胡昌勤，馮艷春.近紅外光譜假藥識別系統(tǒng)的設想及可行性探討.中國藥事，2004，18：250-254.

3 劉緒平，馮艷春，胡昌勤，等.頭孢拉定膠囊劑通用性近紅外定量分析模型的建立.藥物分析雜志，2008，28：722-724.

4 侯少瑞，馮艷春，胡昌勤，等.近紅外光譜法快速分析注射用頭孢曲松鈉及其水分含量.藥物分析雜志，2008，28：936-938.

5 劉偉，范可青，包艷春，等.運用車載近紅外光譜儀測定六味地黃丸水分.中國藥事，2008，22：703-705.

6 金少鴻.藥品檢測車的研制及其應用.中國藥事，2007，21：8-11.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.22.057

050092 石家莊市，河北省藥品不良反應監(jiān)測中心(李永輝)；河北省食品藥品檢驗院(郄冰冰、郭永輝)

R 917

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1002-7386(2014)22-3490-02

2014-05-22)