巢秦++李敏
摘 要 以多糖提取率為指標(biāo),應(yīng)用單因素試驗(yàn)方法考查表面活性劑、液料比、超聲功率、超聲溫度、超聲時間對苦瓜中總多糖提取率的影響,并通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝。結(jié)果表明,表面活性劑(吐溫80)的用量為9 μL,最佳工藝條件是:提取溫度60℃,液料比1∶35,提取功率70%,提取時間
30 min。
關(guān)鍵詞 表面活性劑;苦瓜;多糖;超聲法;工藝
中圖分類號:TQ914 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1673-890X(2014)12-0115-03
苦瓜,葫蘆科苦瓜屬(Momordica)一年生草本攀緣植物果實(shí)??喙暇哂邢钋鍩帷⒚髂拷舛局π1]。苦瓜種子和果實(shí)具有很強(qiáng)的生理活性,具有明顯的降血糖、抗腫瘤、殺精等作用。目前,已分離出三萜、甾類、生物堿、蛋白、有機(jī)酸及多糖等[2]??喙现械亩嗵鞘且环N重要的活性成分,具有降血糖,抗氧化,抗腫瘤,提高免疫力等作用。本實(shí)驗(yàn)采用的超聲法協(xié)同表面活性劑通過正交實(shí)驗(yàn)來優(yōu)化苦瓜多糖的提取工藝
研究。
1 材料與試劑
1.1 材料
苦瓜購買于吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院周邊蔬菜超市,洗凈,切片,曬干,備用。
1.2 試劑
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(吉林生物制品檢驗(yàn)所),3,5-二硝基水楊酸,氫氧化鈉,無水亞硫酸鈉,乙
醇等。
2 方法
2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密稱取在120℃下減壓干燥至恒重的葡萄糖對照品100 mg于100 mL容量瓶中,加適量蒸餾水,溶解,放冷,并定容至刻度,即得濃度為1 mg/mL葡萄糖對照品溶液。
2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
取6支20 mL具塞刻度試管,準(zhǔn)確量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0 mL,0.2 mL,0.4 mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0 mL加蒸餾水至2 mL,DNS 1.5 mL,將各管搖勻,在沸水浴中準(zhǔn)確加熱5 min,取出,冷卻至室溫,蒸餾水定容至10 mL,混勻,于520 nm處測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),葡萄糖含量(mg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.3 多糖提取及測定方法
精密稱取0.5 g樣品于50 mL錐形瓶中,加入適量蒸餾水,適量表面活性劑,超聲波提取,過濾至50 mL容量瓶中,蒸餾水定容至50 mL,待測。準(zhǔn)確移取待測液2 mL于20 mL具塞試管,加入DNS試劑1.5 mL,搖勻,沸水浴加熱5 min,取出,冷卻至室溫,蒸餾水定容至10 mL,顛倒混勻,520 nm處測定樣品吸光度[3]。
2.4 單因素試驗(yàn)
2.4.1 超聲功率對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,提取時間為20 min,功率分別為50%,60%,70%,80%,90%(W)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.2 料液比對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,提取時間為20 min,功率為80%,液料比分別為1∶10,1∶20,1∶30,1∶40,1∶50(g/mL)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.3 提取時間對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,功率為80%,提取時間分別為15、20、25、30、
35(min)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.4 提取溫度對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在功率為80%,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,提取時間為20 min,提取溫度分別為40、50、60、70、80(℃)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.5 正交試驗(yàn)設(shè)計
在前期單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取對多糖提取影響顯著的因素,設(shè)計合理的正交實(shí)驗(yàn)。
3 結(jié)果與分析
3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取吐溫80的量為
9 μL,以對提取影響比較大的液料比,提取時間,提取功率,提取溫度四個因素設(shè)計L9(34)正交實(shí)驗(yàn)[4],試驗(yàn)因素與4 結(jié)語
與傳統(tǒng)提取方法相比,超聲提取能大大提高提取過程的傳質(zhì)效率,而表面活性劑又具有增溶作用,這使苦瓜細(xì)胞組織中的多糖成分能夠更加迅速釋放,提高提取效率,縮短提取時間,大大提高了苦瓜多糖的提取效率。通過本實(shí)驗(yàn)得到最佳提取條件為,表面活性劑(吐溫80)的用量為9 μL,提取溫度60℃,液料比1∶35,提取功率70%,提取時間30 min。這對苦瓜多糖的結(jié)構(gòu)的分析及其功效研究和開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn)
[1] 查青,董英,徐斌.藥食兩用植物(Ⅱ)-苦瓜的藥理作用研究概況[J].食品研究與開發(fā),2005,26(3):33-35.
[2] 鐘正.苦瓜多糖研究綜述[J].廣東化工,2011,2(38):91.
[3] 趙凱,許鵬舉,谷廣燁.3,5-二硝基水楊酸比色法測定還原糖含量的研究[J].食品科學(xué),2008,29(8):534-536.
[4] 何雁,馬志慶.醫(yī)藥數(shù)理統(tǒng)計[M].北京:科學(xué)出版社,2009,3:101-172.
(責(zé)任編輯:劉昀)endprint
摘 要 以多糖提取率為指標(biāo),應(yīng)用單因素試驗(yàn)方法考查表面活性劑、液料比、超聲功率、超聲溫度、超聲時間對苦瓜中總多糖提取率的影響,并通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝。結(jié)果表明,表面活性劑(吐溫80)的用量為9 μL,最佳工藝條件是:提取溫度60℃,液料比1∶35,提取功率70%,提取時間
30 min。
關(guān)鍵詞 表面活性劑;苦瓜;多糖;超聲法;工藝
中圖分類號:TQ914 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1673-890X(2014)12-0115-03
苦瓜,葫蘆科苦瓜屬(Momordica)一年生草本攀緣植物果實(shí)??喙暇哂邢钋鍩?、明目解毒之功效[1]??喙戏N子和果實(shí)具有很強(qiáng)的生理活性,具有明顯的降血糖、抗腫瘤、殺精等作用。目前,已分離出三萜、甾類、生物堿、蛋白、有機(jī)酸及多糖等[2]??喙现械亩嗵鞘且环N重要的活性成分,具有降血糖,抗氧化,抗腫瘤,提高免疫力等作用。本實(shí)驗(yàn)采用的超聲法協(xié)同表面活性劑通過正交實(shí)驗(yàn)來優(yōu)化苦瓜多糖的提取工藝
研究。
1 材料與試劑
1.1 材料
苦瓜購買于吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院周邊蔬菜超市,洗凈,切片,曬干,備用。
1.2 試劑
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(吉林生物制品檢驗(yàn)所),3,5-二硝基水楊酸,氫氧化鈉,無水亞硫酸鈉,乙
醇等。
2 方法
2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密稱取在120℃下減壓干燥至恒重的葡萄糖對照品100 mg于100 mL容量瓶中,加適量蒸餾水,溶解,放冷,并定容至刻度,即得濃度為1 mg/mL葡萄糖對照品溶液。
2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
取6支20 mL具塞刻度試管,準(zhǔn)確量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0 mL,0.2 mL,0.4 mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0 mL加蒸餾水至2 mL,DNS 1.5 mL,將各管搖勻,在沸水浴中準(zhǔn)確加熱5 min,取出,冷卻至室溫,蒸餾水定容至10 mL,混勻,于520 nm處測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),葡萄糖含量(mg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.3 多糖提取及測定方法
精密稱取0.5 g樣品于50 mL錐形瓶中,加入適量蒸餾水,適量表面活性劑,超聲波提取,過濾至50 mL容量瓶中,蒸餾水定容至50 mL,待測。準(zhǔn)確移取待測液2 mL于20 mL具塞試管,加入DNS試劑1.5 mL,搖勻,沸水浴加熱5 min,取出,冷卻至室溫,蒸餾水定容至10 mL,顛倒混勻,520 nm處測定樣品吸光度[3]。
2.4 單因素試驗(yàn)
2.4.1 超聲功率對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,提取時間為20 min,功率分別為50%,60%,70%,80%,90%(W)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.2 料液比對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,提取時間為20 min,功率為80%,液料比分別為1∶10,1∶20,1∶30,1∶40,1∶50(g/mL)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.3 提取時間對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,功率為80%,提取時間分別為15、20、25、30、
35(min)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.4 提取溫度對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在功率為80%,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,提取時間為20 min,提取溫度分別為40、50、60、70、80(℃)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.5 正交試驗(yàn)設(shè)計
在前期單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取對多糖提取影響顯著的因素,設(shè)計合理的正交實(shí)驗(yàn)。
3 結(jié)果與分析
3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取吐溫80的量為
9 μL,以對提取影響比較大的液料比,提取時間,提取功率,提取溫度四個因素設(shè)計L9(34)正交實(shí)驗(yàn)[4],試驗(yàn)因素與4 結(jié)語
與傳統(tǒng)提取方法相比,超聲提取能大大提高提取過程的傳質(zhì)效率,而表面活性劑又具有增溶作用,這使苦瓜細(xì)胞組織中的多糖成分能夠更加迅速釋放,提高提取效率,縮短提取時間,大大提高了苦瓜多糖的提取效率。通過本實(shí)驗(yàn)得到最佳提取條件為,表面活性劑(吐溫80)的用量為9 μL,提取溫度60℃,液料比1∶35,提取功率70%,提取時間30 min。這對苦瓜多糖的結(jié)構(gòu)的分析及其功效研究和開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn)
[1] 查青,董英,徐斌.藥食兩用植物(Ⅱ)-苦瓜的藥理作用研究概況[J].食品研究與開發(fā),2005,26(3):33-35.
[2] 鐘正.苦瓜多糖研究綜述[J].廣東化工,2011,2(38):91.
[3] 趙凱,許鵬舉,谷廣燁.3,5-二硝基水楊酸比色法測定還原糖含量的研究[J].食品科學(xué),2008,29(8):534-536.
[4] 何雁,馬志慶.醫(yī)藥數(shù)理統(tǒng)計[M].北京:科學(xué)出版社,2009,3:101-172.
(責(zé)任編輯:劉昀)endprint
摘 要 以多糖提取率為指標(biāo),應(yīng)用單因素試驗(yàn)方法考查表面活性劑、液料比、超聲功率、超聲溫度、超聲時間對苦瓜中總多糖提取率的影響,并通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝。結(jié)果表明,表面活性劑(吐溫80)的用量為9 μL,最佳工藝條件是:提取溫度60℃,液料比1∶35,提取功率70%,提取時間
30 min。
關(guān)鍵詞 表面活性劑;苦瓜;多糖;超聲法;工藝
中圖分類號:TQ914 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1673-890X(2014)12-0115-03
苦瓜,葫蘆科苦瓜屬(Momordica)一年生草本攀緣植物果實(shí)??喙暇哂邢钋鍩?、明目解毒之功效[1]??喙戏N子和果實(shí)具有很強(qiáng)的生理活性,具有明顯的降血糖、抗腫瘤、殺精等作用。目前,已分離出三萜、甾類、生物堿、蛋白、有機(jī)酸及多糖等[2]??喙现械亩嗵鞘且环N重要的活性成分,具有降血糖,抗氧化,抗腫瘤,提高免疫力等作用。本實(shí)驗(yàn)采用的超聲法協(xié)同表面活性劑通過正交實(shí)驗(yàn)來優(yōu)化苦瓜多糖的提取工藝
研究。
1 材料與試劑
1.1 材料
苦瓜購買于吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院周邊蔬菜超市,洗凈,切片,曬干,備用。
1.2 試劑
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(吉林生物制品檢驗(yàn)所),3,5-二硝基水楊酸,氫氧化鈉,無水亞硫酸鈉,乙
醇等。
2 方法
2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密稱取在120℃下減壓干燥至恒重的葡萄糖對照品100 mg于100 mL容量瓶中,加適量蒸餾水,溶解,放冷,并定容至刻度,即得濃度為1 mg/mL葡萄糖對照品溶液。
2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
取6支20 mL具塞刻度試管,準(zhǔn)確量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0 mL,0.2 mL,0.4 mL,0.6 mL,0.8 mL,1.0 mL加蒸餾水至2 mL,DNS 1.5 mL,將各管搖勻,在沸水浴中準(zhǔn)確加熱5 min,取出,冷卻至室溫,蒸餾水定容至10 mL,混勻,于520 nm處測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),葡萄糖含量(mg)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.3 多糖提取及測定方法
精密稱取0.5 g樣品于50 mL錐形瓶中,加入適量蒸餾水,適量表面活性劑,超聲波提取,過濾至50 mL容量瓶中,蒸餾水定容至50 mL,待測。準(zhǔn)確移取待測液2 mL于20 mL具塞試管,加入DNS試劑1.5 mL,搖勻,沸水浴加熱5 min,取出,冷卻至室溫,蒸餾水定容至10 mL,顛倒混勻,520 nm處測定樣品吸光度[3]。
2.4 單因素試驗(yàn)
2.4.1 超聲功率對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,提取時間為20 min,功率分別為50%,60%,70%,80%,90%(W)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.2 料液比對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,提取時間為20 min,功率為80%,液料比分別為1∶10,1∶20,1∶30,1∶40,1∶50(g/mL)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.3 提取時間對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在提取溫度為50℃,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,功率為80%,提取時間分別為15、20、25、30、
35(min)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.4.4 提取溫度對提取效果的影響
準(zhǔn)確稱取0.5 g苦瓜粉末5份,在功率為80%,表面活性劑為6 μL,液料比為1∶20,提取時間為20 min,提取溫度分別為40、50、60、70、80(℃)的條件下按上述方法提取,測得吸光度值A(chǔ),計算提取率。
2.5 正交試驗(yàn)設(shè)計
在前期單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取對多糖提取影響顯著的因素,設(shè)計合理的正交實(shí)驗(yàn)。
3 結(jié)果與分析
3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取吐溫80的量為
9 μL,以對提取影響比較大的液料比,提取時間,提取功率,提取溫度四個因素設(shè)計L9(34)正交實(shí)驗(yàn)[4],試驗(yàn)因素與4 結(jié)語
與傳統(tǒng)提取方法相比,超聲提取能大大提高提取過程的傳質(zhì)效率,而表面活性劑又具有增溶作用,這使苦瓜細(xì)胞組織中的多糖成分能夠更加迅速釋放,提高提取效率,縮短提取時間,大大提高了苦瓜多糖的提取效率。通過本實(shí)驗(yàn)得到最佳提取條件為,表面活性劑(吐溫80)的用量為9 μL,提取溫度60℃,液料比1∶35,提取功率70%,提取時間30 min。這對苦瓜多糖的結(jié)構(gòu)的分析及其功效研究和開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn)
[1] 查青,董英,徐斌.藥食兩用植物(Ⅱ)-苦瓜的藥理作用研究概況[J].食品研究與開發(fā),2005,26(3):33-35.
[2] 鐘正.苦瓜多糖研究綜述[J].廣東化工,2011,2(38):91.
[3] 趙凱,許鵬舉,谷廣燁.3,5-二硝基水楊酸比色法測定還原糖含量的研究[J].食品科學(xué),2008,29(8):534-536.
[4] 何雁,馬志慶.醫(yī)藥數(shù)理統(tǒng)計[M].北京:科學(xué)出版社,2009,3:101-172.
(責(zé)任編輯:劉昀)endprint