周芳芳

(長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院婦科，湖北 荊州 434020)

江濤

(長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 荊州 434020)

近年來不孕不育癥的發(fā)病率呈上升趨勢，研究發(fā)現(xiàn)生殖系統(tǒng)支原體感染與不孕不育癥的發(fā)病有著密切關(guān)聯(lián)[1-2]。解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum ,Uu)和人型支原體(Mycoplasma hominis ,Mh)為目前常見的造成泌尿生殖道感染的支原體類型。盡管治療支原體感染的新藥不斷面市，但是由于普遍存在的不合理用藥問題，導(dǎo)致支原體對各種藥物的耐藥率逐漸上升。我們對本院生殖中心不孕不育患者進(jìn)行Uu和Mh的檢測和藥敏分析，以期指導(dǎo)臨床合理用藥和提高療效。

1 對象與方法

1.1 對象

研究對象為2011年1月到2013年1月來我院生殖中心接受檢查和治療的不孕不育患者共403例，其中女性267例，年齡24～37(28.27±3.12)歲；男性136例，年齡25～39(29.48±3.39)歲。女性病例排除生殖器官畸形、卵巢功能障礙、子宮內(nèi)膜異位癥、染色體異常者，男性病例排除性功能障礙、精索靜脈曲張、無精癥者，均符合不孕不育癥診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 標(biāo)本采集

男性病人禁欲3～7d后手淫法取精液于干燥消毒量杯內(nèi)，女性病人用無菌拭子取宮頸分泌物置無菌管內(nèi)立即送檢，已使用抗生素者收集樣本前5d停藥。

1.3 試劑與儀器

試劑為法國生物-梅里埃公司生產(chǎn)的Mycoplasma IST 2支原體培養(yǎng)鑒定及藥敏試劑盒，儀器為上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠生產(chǎn)的PYX—DHS型恒溫培養(yǎng)箱。

1.4 檢測方法

嚴(yán)格按照試劑操作手冊要求進(jìn)行。將試劑盒放置室溫平衡溫度后，將棉拭子或200μl液體標(biāo)本放入肉湯(R1)中，混勻后，將肉湯倒入R2(凍干尿素-精氨酸肉湯)內(nèi)，震蕩使之徹底溶解，在試條中的每個小杯中加入上述溶液55μl，然后在每個小杯中加入兩滴無菌礦物油，蓋好試條。放入(35±1)℃培養(yǎng)24h后觀察Uu培養(yǎng)結(jié)果，48h后觀察Mh培養(yǎng)結(jié)果。若鑒定及培養(yǎng)各微孔混濁且變紅表示有污染，應(yīng)做其他檢查或重新試驗(yàn)；培養(yǎng)及鑒定孔觀察顯示由黃變紅，提示有支原體生長。Uu培養(yǎng)孔 24h后變紅表示有Uu感染，Uu≥104ccu/ml；Mh培養(yǎng)孔48h后變紅表示有Mh感染，Mh≥104ccu/ml；上述2孔在48h均變紅提示Uu、Mh混合感染。觀察藥敏孔，若有變紅表現(xiàn)，提示Mh和(或)Uu生長，表示對此藥物有耐藥性；若觀察顯示藥敏感孔未變色，提示對此藥物敏感。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均運(yùn)用Excel軟件完成，不同性別間支原體感染率的比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同性別患者支原體感染情況

總標(biāo)本數(shù)為403例，陽性標(biāo)本數(shù)為109例，總陽性率為27.0%。其中女性患者的陽性率為31.0%,而男性患者陽性率為19.1%，女性患者的陽性率顯著高于男性患者(P<0.01)；女性患者Uu陽性率為30.3%，顯著高于男性患者的17.6%(P<0.01)。不同性別患者支原體感染情況見表1。

表1 不同性別患者支原體感染情況

注：*與女性患者陽性率比較，P<0.01。

2.2 支原體陽性標(biāo)本藥敏試驗(yàn)結(jié)果

由于Mh單獨(dú)感染和Uu+Mh混合感染標(biāo)本數(shù)有限，其藥敏結(jié)果在此暫不做分析，Uu對強(qiáng)力霉素和原始霉素最敏感，而對紅霉素耐藥性最嚴(yán)重，6種藥物的敏感性分析結(jié)果見表2。

表2 Uu對6種藥物的敏感性分析

3 討論

支原體廣泛存在于自然界中，是一類無細(xì)胞壁的最小原核型微生物，能感染人類的支原體約10余種，其中Uu和Mh最為常見，常引起女性宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎等疾病而導(dǎo)致不孕[3]，而在男性則可以引起前列腺炎，影響精子活動度、濃度、形態(tài)及DNA結(jié)構(gòu)從而導(dǎo)致不育[4]。本研究中，不孕不育患者的支原體總感染率為27.0%，女性患者的支原體感染率顯著高于男性，可能與女性的生殖道結(jié)構(gòu)更易受支原體感染有關(guān)。

由表2可看出，Uu的耐藥率最高為紅霉素(40.6%)，其次為氧氟沙星(34.6%)、四環(huán)素(20.8%)，與國內(nèi)其它報(bào)道相似[5]。中介度最高為氧氟沙星(28.8%)，其次為紅霉素(21.8%)、四環(huán)素(17.8%)，但氧氟沙星具有細(xì)胞內(nèi)濃度分布高的特點(diǎn)，所以其中介度可視為有效。另外據(jù)國內(nèi)外的研究報(bào)道，左旋氧氟沙星的抗菌活性比氧氟沙星強(qiáng)兩倍，是目前比較理想的喹諾酮類抗支原體藥物[6]。常用抗Uu藥物中，敏感率由高到低依次為強(qiáng)力霉素>原始霉素>交沙霉素>四環(huán)素>紅霉素>氧氟沙星，原始霉素毒性較大。因此治療UU感染，在未做藥敏實(shí)驗(yàn)的條件下，應(yīng)首選強(qiáng)力霉素及交沙霉素。

支原體無細(xì)胞壁，所以抑制細(xì)胞壁合成的抗菌藥物如β-內(nèi)酰胺類對支原體無作用，目前用于治療支原體感染的藥物其機(jī)制主要是阻礙支原體組蛋白合成或抑制核酸形成，如大環(huán)內(nèi)酯類及喹諾酮類。以前對于支原體耐藥的機(jī)理研究比較少，隨著近年來支原體感染率及耐藥率的不斷上升，對于其耐藥機(jī)理的研究在不斷深入，可用于治療支原體感染的新藥也不斷出現(xiàn)，已有研究證明長期接觸低濃度藥物會使支原體產(chǎn)生耐藥性，其原因可能是由于低濃度藥物會誘導(dǎo)某些耐藥基因的點(diǎn)突變[7-8]。因此，對于支原體感染病人，應(yīng)盡可能先進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，然后選擇敏感藥物進(jìn)行治療，并且治療過程用藥要足量，療程盡可能短，以避免低濃度藥物與支原體長期接觸而產(chǎn)生耐藥性。

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