劉玉倩 寧 均 劉 青

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院內(nèi)分泌科，吉林 長(zhǎng)春 130021)

糖尿病腎病(DN)也已成為慢性腎衰竭的主要原因〔1〕。DN的發(fā)病機(jī)制尚未明確，現(xiàn)有研究其受遺傳易感性、血流動(dòng)力學(xué)因素、氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子等多種因素影響。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-1(TGF)-β1和骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)-7在DN中的作用逐漸成為研究的熱點(diǎn)。本研究觀察DN及患者血清TGF-β1，BMP-7的變化，為進(jìn)一步指導(dǎo)臨床治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 2011年7月至2012年7月吉林大學(xué)第一醫(yī)院住院2型糖尿病(T2DM)患者96例，均符合1999年WHO的診斷和分型標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)尿微量白蛋白/肌酐值(ACR)(<30 mg/g,30～300 mg/g,>300 mg/g),分為正常白蛋白尿A組32例，微量白蛋白尿B組31例，臨床白蛋白尿C組24例；另外選擇同期門診健康體檢者為正常對(duì)照D組24例。

排除病例：(1)不符合上述納入標(biāo)準(zhǔn)者；(2)在測(cè)定血清TGF-β1、BMP-7之前曾應(yīng)用過(guò)大量糖皮質(zhì)激素者；(3)嚴(yán)重肝腎功能受損或結(jié)締組織疾病者；(4)合并腫瘤或惡性血液病者；(5)血壓不達(dá)標(biāo)者。

1.2方法 所有受試者均禁食8 h以上，于次日清晨采肘靜脈空腹血，離心后取血清2 ml 保存于-40℃的冰箱中。采用北京愛(ài)普華美生物科技有限公司TGF-β1、BMP-7酶聯(lián)免疫吸附試劑盒檢測(cè)血清TGF-β1，BMP-7濃度，隨機(jī)尿液測(cè)定ACR。

糖化血紅蛋白(HbA1c)及ACR測(cè)定采用德國(guó)西門子糖化血紅蛋白/尿微量白蛋白分析儀，血液生化指標(biāo)測(cè)定采用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特LX20全自動(dòng)生化分析儀,空腹血糖(FPG)采用葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化酶法，總膽固醇(TC)采用免疫化學(xué)比色法，尿素氮(BUN)采用脲酶比色法，血肌酐(Cr)采用肌氨酸氧化酶法，甘油三酯(TG)采用甘油磷酸氧化酶-過(guò)氧化酶法，體重指數(shù)(BMI)=體重/身高2(kg/m2)。

2 結(jié) 果

2.1糖尿病各組血清中各臨床指標(biāo)比較 糖尿病各組及健康對(duì)照組相比，年齡、性別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，與健康對(duì)照組相比，糖尿病各組TGF-β1濃度水平降低，C組與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與健康對(duì)照組比較，糖尿病各組BMP-7濃度水平升高(P<0.05)。見(jiàn)表1。

糖尿病各組間，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、TG、TC、HbA1c無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；B組與A組比較，F(xiàn)PG、TGF-β1水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；C組與A組比較，BMP-7、TGF-β1、ACR、BUN、Cr、BMI水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C組與B組比較BMP-7、ACR、BUN、Cr、FPG水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血清TGF-β1水平與ACR呈正相關(guān)(r=0.433,P<0.001)，與BMP-7呈負(fù)相關(guān)(r=-0.493,P<0.001)。

2.2糖尿病各組中患者ACR水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析 A組中ACR與BMP-7呈負(fù)相關(guān)(r=-0.403，P<0.05)，與TGF-β1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.141，P>0.05)，與LDL-C、TG、TC、HbA1c、BMI、BUN、Cr、FPG無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。B組中ACR與BMP-7呈負(fù)相關(guān)(r=-0.413，P<0.05)，與TGF-β1呈正相關(guān)(r=0.4，P<0.05)，與FPG呈正相關(guān)(r=0.046，P<0.05)，與Cr呈正相關(guān)(r=0.345，P<0.05)，與LDL-C、TG、TC、HbA1c、BMI、BUN，無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。

C組中ACR與BMP-7呈負(fù)相關(guān)(r=-0.353，P<0.05)，與TGF-β1呈正相關(guān)(r=0.832，P<0.001)，ACR與LDL-C呈正相關(guān)(R=0.41，P<0.05),與BUN、TG、TC、HbA1c、BMI、Cr、FPG無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。

2.3糖尿病組中ACR水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析 整體糖尿病組ACR與BMP-7呈負(fù)相關(guān)(r=-0.493,P<0.001)，與TGF-β1呈正相關(guān)(r=0.433,P<0.001)，與LDL-C呈正相關(guān)(r=0.295，P<0.05)，與Cr呈正相關(guān)(r=0.327,P<0.05)，與糖尿病家族史、BUN、TG、TC、BMI、FPG無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。

表1 各組臨床指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

TGF-β家族是一組可調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化的蛋白質(zhì)家族，這類細(xì)胞因子可使正常的成纖維細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化，故而命名為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子〔2〕。而在腎臟中，TGF-β1含量最高。鑒于大量的臨床及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究可知，TGF-β1通過(guò)多種途徑對(duì)腎臟造成損傷。TGF-β是重要的腎臟纖維化的啟動(dòng)因子，DN的腎臟纖維化本質(zhì)是源自于管狀上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(EMT),而TGF-β1可啟動(dòng)并完成整個(gè)EMT過(guò)程〔3〕；TGF-β1升高時(shí)，便刺激系膜細(xì)胞合成IV型膠原蛋白，IV型膠原蛋白使細(xì)胞外基質(zhì)降解所需要的酶合成減少，活性減低，合成多于降解，最終腎小球系膜細(xì)胞、近曲小管上皮細(xì)胞及足細(xì)胞等多種細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)堆積〔4,5〕；在DN早期可介導(dǎo)足細(xì)胞凋亡。

BMP-7也稱為成骨蛋白-1(OP-1)，是TGF-β超家族的一個(gè)亞群，其高表達(dá)于集合管、髓袢升支厚壁段、遠(yuǎn)端小管及腎小球臟層上皮細(xì)胞(足細(xì)胞)〔6〕，BMP-7的作用機(jī)制是防止腎小管萎縮、腎管狀上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，阻斷單側(cè)輸尿管梗阻導(dǎo)致的上皮細(xì)胞凋亡及保持腎臟正常形態(tài)、功能等作用。許多實(shí)驗(yàn)研究均證明，BMP-7是TGF-β重要的拮抗因子。BMP-7在腎小球系膜細(xì)胞激活BMP-RII和減少蛋白激酶C(PKC)觸發(fā)信號(hào)以防止高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，起著重要的抗氧化的作用〔7〕。最近研究發(fā)現(xiàn)，BMP-7在腎發(fā)生早期促進(jìn)EMT，在腎功能逐漸喪失及腎臟纖維化中通過(guò)BMP-7抑制鈣黏蛋白、α-肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、纖連蛋白、I型膠原蛋白等因子的依賴物質(zhì)，從而以抵消TGF-β1介導(dǎo)的EMT，以減緩腎衰竭的進(jìn)展〔7,8〕。

在本實(shí)驗(yàn)中，A組中ACR與TGF-β1呈負(fù)相關(guān),這可能是TGF-β1系統(tǒng)功能下降引起的一種代償性反應(yīng)。但整體糖尿病組ACR與TGF-β1呈正相關(guān)，在日后的研究中需要加大樣本量進(jìn)一步證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)顯示，隨DN進(jìn)展，血清BMP-7水平逐漸升高，且與ACR呈正相關(guān)。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)也提示糖尿病ACR正常時(shí)，血清BMP-7濃度已升高，對(duì)BMP-7和TGF-β1進(jìn)行評(píng)估比傳統(tǒng)的監(jiān)測(cè)蛋白尿及腎小球?yàn)V過(guò)率能更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)出腎臟疾病終點(diǎn)〔9〕。因此血清BMP-7可能成為診斷早期DN的新的敏感指標(biāo)，同時(shí)為DN的治療提供新的靶點(diǎn)。

4 參考文獻(xiàn)

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