張洪濤 張靜宇 張炳團(tuán) 王 錚 李少文

BC369治療小鼠L1210白血病有明顯效果[1]。為此，我們采用BC369對(duì)小鼠鼠源性腎癌(REN-ca)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，進(jìn)一步觀察BC369對(duì)小鼠腎癌生長(zhǎng)的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

Baib/C近交系健康小鼠、體重(17±2)g，雌雄兼半(雌未孕)，共30只,由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所購(gòu)進(jìn)，二級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，合格證為SCXK(京)2008-0001，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)SYXK(京)2008-0016。

1.2 瘤株

腎癌細(xì)胞系(Ren-Ca)由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所提供。

1.3 腫瘤移植

腎癌(Ren-Ca)離體細(xì)胞系液氮復(fù)蘇后，經(jīng)多次傳代培養(yǎng)，消化離心，以107/ml 的細(xì)胞濃度(0.2 ml)接種于健康Baib/C小鼠皮下，15天后形成1 cm大小的實(shí)體腫瘤，斷頸處死小鼠，70%酒精浸泡1 min，無(wú)菌條件下剝離腫瘤，剪成1 mm3大小的組織塊，選擇新鮮無(wú)壞死的腫瘤組織，用生理鹽水洗五遍，組織勻漿器輕輕研磨至細(xì)胞懸液，150目細(xì)胞篩過(guò)濾，活瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)，配置瘤細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度為1×107/ml，于每只鼠右側(cè)腋窩皮下接種0.1 ml(1×106/ml)瘤細(xì)胞懸液。

1.4 藥物

BC369為天津市澤世德生物醫(yī)藥有限公司試制，1 mg/瓶，-20 ℃保存，注射時(shí)用1 ml無(wú)菌生理鹽水溶解。環(huán)磷酰胺(CTX)系上海第十二制藥廠生產(chǎn)，100 mg/支。

1.5 實(shí)驗(yàn)分組

接種腫瘤細(xì)胞次日將30只小鼠隨機(jī)分為三組，每組10只，陰性對(duì)照組(NS)10只，陽(yáng)性對(duì)照組(CTX)10只，創(chuàng)新藥組(BC369)10只；記錄每組小鼠體重。

1.6 給藥方法

接種腫瘤細(xì)胞后次日開(kāi)始給藥，每天一次，共10次，每組小鼠均為腹腔注射。NS組：25 ml/kg，即每只小鼠每天腹腔注射生理鹽水0.5 ml，10次。CTX組：25 mg(25 ml)/kg，即每只小鼠每天腹腔注射環(huán)磷酰胺注射液0.5 mg(0.5 ml)/次，10次。BC369組：25 mk(25 ml)/kg，即每只小鼠每天注射BC369注射液0.5 mg(0.5 ml)/次，10次。

1.7 檢測(cè)指標(biāo)

終止治療后次日，稱各組小鼠體重，然后斷頸處死，剝離腫瘤體稱重。按公式計(jì)算腫瘤抑制率[2]。

腫瘤抑制率(%)=(C-T)÷C×100%，式中T為給藥組平均瘤重；C為陰性對(duì)照組平均瘤重。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)[3]。

2 結(jié)果

BC369對(duì)鼠源腎癌(REN-ca)的生長(zhǎng)有明顯抑制作用；且荷瘤小鼠體重增加，見(jiàn)表1和圖1、圖2。

圖1 BC369腹腔注射對(duì)鼠源腎癌(REN-ca)瘤重的影響

圖2 BC369腹腔注射對(duì)鼠源腎癌(REN-ca)的抑制作用

3 討論

近年來(lái)，腎癌的發(fā)病率明顯增高，目前，早期腎癌施行根治性腎癌切除術(shù)，但一經(jīng)診斷已有30%的病例發(fā)生轉(zhuǎn)移；輔助治療(內(nèi)分泌、免疫、化療)來(lái)緩解患者的主觀和客觀癥狀，延長(zhǎng)生存期。我們根據(jù)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特征，研究一種靶標(biāo)式雙重作用(殺傷和免疫)的生物藥BC369。經(jīng)過(guò)對(duì)小鼠各種鼠源性腫瘤和人源性腫瘤實(shí)驗(yàn)，均有不同程度的效果，為此對(duì)鼠源性腎癌進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)，其腫瘤抑制率為(84.17±2.91)%,P<0.001。當(dāng)然，動(dòng)物與人有區(qū)別，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較滿意，對(duì)人就不一定，有待于今后申報(bào)臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)。

表1 BC369對(duì)小鼠腎癌(REN-CA)生長(zhǎng)和體重的影響

腹腔注射BC369治療鼠源腎癌(REN-CA)的腫瘤抑制率為(84.17±2.91)%，P<0.001。而化學(xué)治療組(CTX)的腫瘤抑制率為(33.81±1.22)%，P<0.05。兩者相比，存在明顯差異，P<0.05。初步實(shí)驗(yàn)表明BC369治療腎癌效果優(yōu)于環(huán)磷酰胺(CTX)；臨床上CTX對(duì)腎癌不敏感[4]，此次實(shí)驗(yàn)CTX結(jié)果不如BC369，與此有關(guān)。

[1] 張炳團(tuán)，晏雄偉,張洪濤，等.BC369治療小鼠L1210白血病的作用研究〔J〕.中國(guó)特色醫(yī)藥雜志，2001，8(4)：11-12.

[2] 張炳團(tuán),張靜宇,張洪燕，等.BC369對(duì)鼠源腸癌(C26)的療效分析〔J〕.實(shí)用癌癥雜志,2012,27(3):224-225.

[3] 張炳團(tuán),張洪濤,張靜宇，等.BC369對(duì)人源胰腺癌的治療作用〔J〕.實(shí)用癌癥雜志,2013,28(1):91-93.

[4] 李振主編.惡性腫瘤的化學(xué)治療與免疫治療〔M〕.第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1990：267-272.