盧光祥等

【摘 要】目的：通過(guò)與梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）的比較，評(píng)價(jià)其他不同梅毒檢測(cè)方法的符合率。 方法：用TP-ELISA法檢測(cè)3220人份標(biāo)本，將陽(yáng)性88例血清標(biāo)本分別用梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)（TPHA），梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗(yàn)（TPPA）法進(jìn)行復(fù)檢比較。結(jié)果：TPHA與TP-ELISA符合率為93.18（82/88）%；TPPA與TP-ELISA符合率為93.18（82/88）%；TPHA與TPPA符合率100%（82/82）。結(jié)論：ELISA法方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，可實(shí)現(xiàn)操作自動(dòng)化、客觀化，便于質(zhì)量控制，但假陽(yáng)性率高，只可用來(lái)初篩梅毒，不能作為梅毒確認(rèn)試驗(yàn)。TPHA與TPPA兩種方法都不能實(shí)現(xiàn)操作自動(dòng)化，不便于質(zhì)量控制和結(jié)果儲(chǔ)存，但符合率高，可作為梅毒確認(rèn)試驗(yàn)方法。

【關(guān)鍵詞】梅毒；梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)；梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗(yàn)；符合率

【文章編號(hào)】1004-7484（2014）06-3526-01

近年來(lái)，我國(guó)梅毒發(fā)病率有居高不下趨勢(shì)，梅毒血清學(xué)檢驗(yàn)已列入獻(xiàn)血員、臨床患者輸血前后、孕婦、公務(wù)員體檢及各種創(chuàng)傷性疾病檢查前常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目[1]。我院為公務(wù)員體檢單位，選擇比較恰當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法對(duì)公務(wù)員進(jìn)行體檢至關(guān)重要，檢測(cè)梅毒的方法有十多種，為探討梅毒檢測(cè)有一個(gè)好的組合方法，我們將TP-ELISA法篩選出的88例陽(yáng)性標(biāo)本，分別用梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)（TPHA）、梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗(yàn)（TPPA）兩種不同方法進(jìn)行復(fù)檢比較，評(píng)價(jià)這三種檢測(cè)方法的符合程度，進(jìn)行檢測(cè)方法組合，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象 收集我院2013年門診、體檢中心和病房送檢的經(jīng)TP-ELISA檢測(cè)3220人中陽(yáng)性標(biāo)本88份作為檢測(cè)評(píng)價(jià)對(duì)象。

1.2 材料和方法

1.2.1 試劑和儀器 試劑TP-ELISA試劑盒為北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，TP-TPHA試劑盒為美國(guó)美德科學(xué)技術(shù)公司產(chǎn)品，TP-TPPA試劑盒為日本富士株式會(huì)社產(chǎn)品。儀器DNM-9602全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀由北京普朗新技術(shù)有限公司生產(chǎn)，全自動(dòng)快速立式洗板機(jī)由鄭州基波新科技技術(shù)有限公司生產(chǎn)，ESCD-CLASSIIBSC生物安全柜由新加坡生產(chǎn)。

1.2.2 方法 試驗(yàn)方法采取空腹靜脈血3-4ml，分離血清。試驗(yàn)中設(shè)計(jì)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照，同步進(jìn)行各項(xiàng)目室內(nèi)質(zhì)控物監(jiān)測(cè)，TP-ELISA、TPHA、TPPA的檢測(cè)均嚴(yán)格按使用說(shuō)明書操作。

2 結(jié)果

3 討論

3.1梅毒是由蒼白螺旋體引起的一種性傳播疾病。梅毒螺旋體是引起人類梅毒的病原體，人是梅毒的唯一傳染源。梅毒有先天性和獲得型兩種，其傳播途徑有三種，先天性梅毒螺旋體通過(guò)胎盤由母體傳染胎兒，獲得性梅毒主要經(jīng)性接觸和血液傳播，輸血感染是血液傳播的方式之一。近年來(lái)，我國(guó)梅毒的發(fā)病人數(shù)呈急劇上升趨勢(shì)[2]，嚴(yán)重危害了人類和社會(huì)的健康。梅毒的防治主要在于早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療。因此選擇敏感性及特異性均高、快速的梅毒檢測(cè)方法至關(guān)重要。

3.2現(xiàn)階段實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)梅毒的方法有病原學(xué)、血清學(xué)、基因診斷和腦脊液檢查。其中病原學(xué)檢查方法可靠，但易受條件制約，適于科研或教學(xué)使用；血清學(xué)檢查方法分非特異性抗體檢測(cè)試驗(yàn)和特異性抗體檢測(cè)試驗(yàn)，前者方法簡(jiǎn)便，適于早期篩查，后者敏感性強(qiáng)、特異度高，現(xiàn)為梅毒診斷的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS），是所有螺旋體試驗(yàn)中最敏感的方法，特異性也很高，被認(rèn)為是檢測(cè)梅毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”，缺點(diǎn)是不適合療效觀察，且價(jià)格昂貴；基因診斷為新檢測(cè)手段，具有高靈敏度，但目前國(guó)內(nèi)試劑質(zhì)量有待改進(jìn)；腦脊液檢查取樣技術(shù)較難，病人難以接受，送檢率低[3]。

3.3梅毒檢測(cè)分病原學(xué)檢測(cè)、非特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)和特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)等。梅毒的病原學(xué)檢測(cè)有暗視野顯微鏡檢查法、鍍銀染色法、直接免疫熒光法（DFA）、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）等。目前最常用的檢測(cè)方法仍是血清學(xué)檢測(cè)，多為非特異性抗體與特異性抗體聯(lián)合檢測(cè)[4]。梅毒非特異性抗體實(shí)驗(yàn)：可用性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（VDRL）、不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（USR）、梅毒甲苯胺紅不加熱血清學(xué)試驗(yàn)（TRUST）、快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）等檢測(cè)。梅毒特異性抗體實(shí)驗(yàn)：可用熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（TPPA）、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）、梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)（TPHA）、梅毒快速診斷試驗(yàn)（TP-RT）、梅毒螺旋體化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定（TP-CLIA）、梅毒螺旋體抗體免疫印跡試驗(yàn)等檢測(cè)。盡管檢測(cè)方法多樣，不同的檢測(cè)方法對(duì)于梅毒都有其特殊的臨床診斷價(jià)值，但也有其自身局限性。任華愛(ài)等[5] 研究表明在梅毒感染的不同時(shí)期TRUST 檢出率差別較大。RPR試驗(yàn)在抗體含量過(guò)高時(shí)，易出現(xiàn)假陰性反應(yīng)，即前帶現(xiàn)象（prozone phenomenon），RPR試驗(yàn)亦存在生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)[6]；TP-ELISA 法優(yōu)點(diǎn)是可以直接檢測(cè)抗梅毒特異抗體IgM，IgG，能對(duì)抗體分型，能提示梅毒感染的各階段，具有高特異性和高敏感性，對(duì)診斷治療均有益處，缺點(diǎn)是敏感性過(guò)高，容易誤診疾病，在患者血清中梅毒特異性抗體低于其試劑檢測(cè)限時(shí)，就有可能出現(xiàn)假陰性，同時(shí)該法也存在著假陽(yáng)性[7]；TPPA試劑價(jià)格較高，檢測(cè)時(shí)需要將標(biāo)本倍比稀釋，不利于大批量樣本檢測(cè)，且以肉眼判斷結(jié)果，原始數(shù)據(jù)無(wú)法保存 [8]；TPHA試劑價(jià)格比較高， 不利于大批量樣本檢測(cè)，且以肉眼判斷結(jié)果，原始數(shù)據(jù)無(wú)法保存， 不便于質(zhì)量控制。

3.4國(guó)家公務(wù)員局規(guī)定，把TPHA作為公務(wù)員體檢方法，我們通過(guò)三種方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)比對(duì)，TP-ELISA法只能作為篩查試驗(yàn)，TPHA、TPPA法聯(lián)合檢測(cè)可作為診斷梅毒的確認(rèn)試驗(yàn)。聯(lián)合檢測(cè)可為臨床提供準(zhǔn)確、及時(shí)的診斷依據(jù)，可避免誤診、漏診而產(chǎn)生醫(yī)患糾紛；聯(lián)合檢測(cè)還可為預(yù)防控制梅毒提供依據(jù)，也可為臨床診斷梅毒提供可靠診斷數(shù)據(jù)。

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