楊海兵 劉偉 曹春華

【摘 要】目的：觀察和分析p53、血管內皮生長因子（VEGF）在鼻咽癌患者組織中的表達及臨床意義。方法：收集40例鼻咽癌患者的組織蠟塊，隨機取同期鼻咽部慢性粘膜炎患者活檢蠟塊40例作對照。用免疫組化方法檢測組織蠟塊中p53、VEGF蛋白表達情況，并分析其臨床意義。

【關鍵詞】鼻咽癌；p53；血管內皮生長因子

【中圖分類號】R737.14 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484（2014）06-3428-01

【Abstract】Objective：To investigate the expressions and significance of p53 and vascular endothelial growth factor（VEGF） in tissue of nasopharyngeal carcinoma（ NPC）. Methods ：Forceps biopsies of 40 cases with NPC and 40 cases with chronicity blennymenitis of pars nasalis pharynges measured the expressions of p53 and VEGF by immunohis-tochemical staining analysis.Results：The expressions of p53 and VEGF in NPC were significantly higher than those in chronicity blennymenitis of pars nasalis pharynges （P<0.05）. Conclusion：p53 and VEGF may play an important role in the process of nasopharyngeal carcinoma.

【Key words】Nasopharyngeal carcinoma； p53； Vascular Endothelial Growth Factor

鼻咽癌（ Nasopharyngeal Carcinoma，NPC）是我國南方常見惡性腫瘤，研究表明， 鼻咽癌的癌變過程中存在大量差異表達基因，而p53 是重要的抑瘤基因，當 p53 基因缺失或發(fā)生異常，可使細胞遺傳特性發(fā)生改變： 出現染色體畸變；血管內皮生長因子（VEGF）在鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展中可能起重要的作用，是特異的血管內皮刺激因子。本研究對40例鼻咽癌患者癌組織中p53和VEGF蛋白表達水平進行檢測并分析其臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇我院 2013年1月～2013年12月的鼻咽癌患者病例40例，其中男性30 例，同時隨機選取同期送檢的慢性鼻咽炎對照組40例。年齡31～75歲，平均年齡52.76±12.32歲。所有組織均常規(guī)經10%中性福爾馬林液固定、石蠟包埋。本組40例鼻咽癌有35例伴頸淋巴結轉移，40例鼻咽癌組織學類型均為非角化型未分化癌。

1.2 主要試劑

Envision試劑（Dako），P53單克隆抗體（Santa Cruz），PBS和TBS緩沖液（國藥集團），VEGF免疫組化試劑盒（即用型Max Vision TM，福建邁新公司），DBA（Sigma），BCIP/NBT（amreMCo）， RMPI-1640（GIBCO）。

1.3 免疫組化檢測p53和VEGF的表達，采用免疫組織化學法染色，將上述標本4μm連續(xù)切片，按檢測試劑盒說明書的檢測步驟進行操作。結果判斷： p53免疫組化染色及VEGF免疫組化染色均以細胞核內出現棕黃色染色為陽性，。采用JVC TK-C1481BEC彩色攝像機、OLYMPUS BH2型生物顯微鏡、MIQAS醫(yī)學圖像定量分析系統(tǒng)及醫(yī)學圖像定量分析軟件進行分析。每張切片隨機選取4個不重復視野，將呈現為棕黃色者視作陽性目標，用圖像分析軟件測定面積，取平均值作為最終結果。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用 SPSS13.0 統(tǒng)計軟件分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

3 討論

腫瘤的發(fā)生發(fā)展的生物學過程極其復雜。p53蛋白基因突變是各類惡性腫瘤中最常見的基因變化之一，鐘碧玲等[1]研究了 43 例鼻咽癌標本，發(fā)現 p53 基因的過表達與鼻咽癌中癌細胞增殖活性呈正相關，且證實了突變型 p53有促進細胞增殖作用?，F研究認為，p53 在鼻咽癌細中的高表達提示p53 基因突變型或野生型 p53 功能改變可促使鼻咽癌的發(fā)生。大量實驗表明血管生成是惡性腫瘤生長和轉移的關鍵因素，腫瘤的持續(xù)生長必須依賴新生血管的形成[2-3]，其中VEGF為最為重要，在血管生成過程中，可增加血管通透性，促進血管內皮細胞增殖，促使新生血管形成，其生物活性與實體瘤的生長關系亦十分密切，現已發(fā)現多種惡性腫瘤中VEGF高表達，并認為其與腫瘤的生長和血管形成有密切關系[4]。研究表明VEGF在多種惡性腫瘤有較高水平的表達，如肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌等，并與腫瘤的預后有關，VEGF與頭頸部腫瘤也具有十分密切的關系[5]，而有關鼻咽癌中VEGF的表達報道較少，奚小彥等[6]研究VEGF的高表達與鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關。

本研究表明鼻咽癌患者組織標本中p53和VEGF水平明顯增高，進一步表明兩者在鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展中可能起一定的作用。且p53和VEGF的表達呈正相關，提示在鼻咽癌患者中p53可能通過上調VEGF的表達，調節(jié)腫瘤血管的生成。因此，p53和VEGF的檢測有助于對鼻咽癌患者的監(jiān)測和隨訪，對鼻咽癌治療效果的判斷及復發(fā)的監(jiān)測可能有一定的臨床意義和參考價值，且方法簡便可行，易于開展。

參考文獻

[1] 鐘碧玲，宋永生.鼻咽癌中p53蛋白的積聚對瘤細胞有絲分裂和凋亡的影響[J].癌癥，2000，19（5）： 432.

[2] Beround C，Soussi T.p53gene mutation ： software anddatabase [J].Nucleic Acids Res，1998，2（1）：200-204.

[3] Fujita Y， Abe R， Shimizu H. Clinical approaches toward tumor angiogenes： past， present and future[J]. Curr Pharm Des， 2008，14（36）：3820-3834.

[4] Fish JE， Santoro MM， Morton SU， et al. miR-126 regulates angiogenic signaling and vascular integrity[J]. Dev Cell， 2008，15（2）： 272-284.

[5]Joo YH，Jung CK， Kim MS， et al. Relationship between vascular endothelial growth factor and Notchl expression and lymphatic metastasis in tongue Cancer[J]. Otolaryngol Head Neck surg，2009，140（4）： 512-518.

[6]奚少彥，吳秋良，宗永生，等. 環(huán)氧化酶-2，表皮生長因子受體與Ki-667在鼻咽癌中表達的臨床病理意義[J]，廣東醫(yī)學，2012，33（10）：1422-1425.