高璐

摘 要：目的：了解冷藏冷凍對(duì)食品安全的影響。方法：采用PCR檢測(cè)手段對(duì)樣品進(jìn)行初篩，對(duì)最主要的6大類(lèi)冷藏冷凍食品進(jìn)行了李斯特茵檢測(cè)，共計(jì)數(shù)量800份。結(jié)果：所檢測(cè)樣品中李斯特茵污染較為常見(jiàn)、廣泛，樣品陽(yáng)性率2.25%。結(jié)論：冷凍冷藏食品中李斯特茵污染普遍較嚴(yán)重，相關(guān)部門(mén)應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)督管理。

關(guān)鍵詞：利斯特氏茵屬 利斯特氏茵 單核細(xì)胞增生

中圖分類(lèi)號(hào)：R15 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）08（b）-0215-01

食品污染李斯特菌屬種類(lèi)較多，現(xiàn)今發(fā)現(xiàn)以下幾種，即單核細(xì)胞增生性李斯特菌（Listeriamonocytogenes，以下簡(jiǎn)稱(chēng)單增李斯特菌）、格氏李斯特菌（L.grayi）、默氏李斯特菌（L.InuFFayi）、英諾克李斯特菌（L.innocua） 、西爾李斯特菌（L.seeligeri）、威爾斯李斯特菌（L.welshimeri）、綿羊李斯特菌（L.ivanovii） [1]。不同品種的冷藏、冷凍食品李斯特菌的污染程度不一，必須對(duì)帶菌食品進(jìn)行檢測(cè)分析，本研究對(duì)河南鶴壁地區(qū)6大類(lèi)食品即冷凍生肉、生水產(chǎn)品、生禽、豆制品、蔬菜、鮮奶共800份樣品的具體受污染情況進(jìn)行了調(diào)查分析。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）PCR引物、試劑及儀器設(shè)備等。

（2）食品材料。食品的主要來(lái)源是鶴壁市的諸多大型超市，共采集800份樣品，分為冷凍生肉、禽類(lèi)、冷凍生水產(chǎn)品、冷藏生禽類(lèi)、冷凍/冷藏豆制品、冷凍/冷藏蔬菜類(lèi)、鮮奶6類(lèi)。

（3）標(biāo)準(zhǔn)菌株。本次研究采用的標(biāo)準(zhǔn)菌株均來(lái)自中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，提供9種標(biāo)準(zhǔn)菌株，其中包括7種李斯特菌，腸炎沙門(mén)菌（Salmonellaenteritidis）1株，馬紅球菌（Rhodococcll～equi）1株[2]。

1.2 方法

1.2.1 單核細(xì)胞增生性李斯特菌的定性檢驗(yàn)

本次研究的樣品為25 g，樣品的培養(yǎng)需在225 mlLB增菌液中進(jìn)行，溫度為30 ℃，均質(zhì)后培養(yǎng)24 h，從LB增菌液中取1 ml加入增菌液30 ℃繼續(xù)培養(yǎng)24 h，用mini-VIDAS法快速篩選后，陰性結(jié)果報(bào)告未檢出，選擇性科瑪嘉李斯特菌顯色培養(yǎng)基瓊脂平板主要作用為培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的LB增菌液，培養(yǎng)24～48 h后，挑選可疑菌落穿刺血瓊脂平板，培養(yǎng)24 h后，再一次挑取在血瓊脂平板上呈典型的β-溶血的菌落劃非選擇性瓊脂平板TSA，培養(yǎng)后進(jìn)行革蘭染色并用BBL Crystal自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)培養(yǎng)后的純菌落進(jìn)行鑒定[3]。

1.2.2 定量檢測(cè)

采用MPN計(jì)數(shù)法。把25 g試樣放入225 mlLB1增菌液中均質(zhì)，在3個(gè)無(wú)菌空試管中各加入10 mL均質(zhì)液，在6管9 mlLB1增菌液中，3管加1 mlL、3管加0.1 mL均質(zhì)液。培養(yǎng)48 h后，篩選、鑒定同前法。按最終發(fā)現(xiàn)單增李斯特氏菌陽(yáng)性的管數(shù)，查MPN表，報(bào)告計(jì)數(shù)結(jié)果。

1.2.3 血清型鑒定

根據(jù)診斷血清說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 單增李斯特菌帶菌情況

共檢測(cè)800份樣品，在樣品中檢測(cè)出單增李斯特菌陽(yáng)性的概率較高，高達(dá)2.25%，有81個(gè)樣品中存在單增李斯特菌；其中冷凍生肉、禽類(lèi)帶菌率最高，為8.18%；鮮魚(yú)翅帶菌率最高為37.11%，其次為生鮮奶，達(dá)到了14.91%，豬肚、豬舌緊隨其后，帶菌率為9%～15%；冷藏雞、鴨、鴿在5%～9%。冷凍/冷藏豆制品中未發(fā)現(xiàn)李斯特菌，與所選取樣本均為半成品有密切關(guān)系。

2.2 其他李斯特菌帶菌情況

在800份樣品中，除檢測(cè)出單增李斯特菌外，還發(fā)現(xiàn)有格氏李斯特菌占1.62%、威爾斯李斯特菌占1.21%、默氏李斯特菌占0.89%、英諾克李斯特菌占0.69%，4種樣品陽(yáng)性率之和為2.60%，在生鮮奶中發(fā)現(xiàn)其他種類(lèi)的李斯特菌含量最高，占44.83%，其次為冷藏生肉禽類(lèi)占13.55%、冷凍生肉禽類(lèi)占4.69%，蔬菜類(lèi)占1.94%。

3 討論

單增李斯特菌感染人類(lèi)最主要的途徑是通過(guò)糞口傳播，并且是諸多李斯特菌中作用于人類(lèi)的致病菌，部分體制較差、抵抗力低的人群諸如兒童、老年人、孕婦等等容易受感染并引發(fā)相應(yīng)的癥狀。

本研究結(jié)果顯示，生肉禽類(lèi)、生鮮奶、蔬菜類(lèi)等食品雖然經(jīng)過(guò)冷藏冷凍處理，但李斯特菌含量較其他冷藏冷凍食品高，并占據(jù)了最主要的部分，具有較大的危險(xiǎn)性。生鮮奶中細(xì)菌極易繁殖，且繁殖速度快，不易被察覺(jué)，在擠奶以及日常的運(yùn)輸時(shí)所處的環(huán)境較難抑制李斯特菌的生長(zhǎng)，所以生鮮奶中含有相對(duì)較多的李斯特菌和單增李斯特菌。單增李斯特菌對(duì)熱具有一定的防御能力，巴氏消毒對(duì)其基本不起作用，需要在特定條件下作用足夠長(zhǎng)時(shí)間才能將其有效殺死，在日常生鮮奶消毒當(dāng)中一定要注意是否已經(jīng)徹底消毒，以減少或避免因消毒不徹底而引發(fā)李斯特菌大范圍感染[4]。蔬菜類(lèi)的李斯特菌含量相對(duì)較少，然而生吃蔬菜容易引發(fā)李斯特菌的大范圍感染，我國(guó)部分地區(qū)有吃生菜的習(xí)慣，在一定程度上加大了李斯特菌感染的幾率，在這些地區(qū)應(yīng)著重加強(qiáng)食品安全檢測(cè)。通過(guò)本次研究發(fā)現(xiàn)，冷凍/冷藏豆制品的李斯特菌陽(yáng)性率基本為0，表明在冷凍冷藏之前加工處理并采取一定措施對(duì)食物消毒等可減少李斯特菌感染[5]，而普通市面上所銷(xiāo)售的豆制品并不全部由相同的處理，因而帶菌率與此次研究并不平行，注意區(qū)別對(duì)待。在研究過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)，部分腌制食品、冷凍包裝海產(chǎn)品中李斯特菌的含量比同類(lèi)的生肉和新鮮的海產(chǎn)品高，并且具有顯著的差異，部分飲料制品的中李斯特菌含量要明顯高于奶類(lèi)，經(jīng)過(guò)分析，猜測(cè)其原因?yàn)樵趯?duì)原料進(jìn)行加工的過(guò)程中，李斯特菌持續(xù)存在并不斷在高鹽的條件下持續(xù)生長(zhǎng)，食品中李斯特菌含量日漸增加，具有較高的檢出率[6-7]。

本次研究均是對(duì)諸多大型超市進(jìn)行抽樣檢測(cè)，其衛(wèi)生條件相對(duì)較好，在很大程度上要好于普通菜市場(chǎng)，菜市場(chǎng)中的食品受感染的基數(shù)和比例可能更大，更應(yīng)該加強(qiáng)管理監(jiān)督。由于各方面因素的限制，所采集的樣品量有限，所得出的結(jié)果也只能反應(yīng)特定地區(qū)的部分食品的含菌量狀況，并且目前我國(guó)對(duì)于李斯特菌的檢測(cè)手段和方法有待進(jìn)一步提高，以提高檢出率和準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

[1] 王菊光，屈飛飛.2671件直接入口食品大腸茵群和致病菌檢測(cè)分析[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，57（5）：564-565.

[2] 唐麗華，龔紅霞.舟山市食品中單核增生性李斯特茵污染狀況監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（3）：626-627.

[3] 荊紅波，張彥春.順義區(qū)食品中單核增生性李斯特菌的污染狀況調(diào)查[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，57（24）：46174618.

[4] 駱璇，郭紅衛(wèi).上海市豬肉中金黃色葡萄球菌定量風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2010，20（3）：244-249.

[5] 董慶利.低溫蒸煮香腸中大腸桿菌生長(zhǎng)模型參數(shù)的不確定性研究[J].食品科學(xué)，2010，31（5）：5—8.

[6] 陳偉偉，楊育紅，楊毓環(huán)，等.泉州市食品中單核細(xì)胞增生性李斯特菌的定性、定量及耐藥性分析[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2003，15（1）：43—45.

[7] 吳躍進(jìn)，李小春，李毅，等.2007年溫州地區(qū)食源性致病菌污染調(diào)查分析[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2010，22（2）：168-170.endprint

摘 要：目的：了解冷藏冷凍對(duì)食品安全的影響。方法：采用PCR檢測(cè)手段對(duì)樣品進(jìn)行初篩，對(duì)最主要的6大類(lèi)冷藏冷凍食品進(jìn)行了李斯特茵檢測(cè)，共計(jì)數(shù)量800份。結(jié)果：所檢測(cè)樣品中李斯特茵污染較為常見(jiàn)、廣泛，樣品陽(yáng)性率2.25%。結(jié)論：冷凍冷藏食品中李斯特茵污染普遍較嚴(yán)重，相關(guān)部門(mén)應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)督管理。

關(guān)鍵詞：利斯特氏茵屬 利斯特氏茵 單核細(xì)胞增生

中圖分類(lèi)號(hào)：R15 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）08（b）-0215-01

食品污染李斯特菌屬種類(lèi)較多，現(xiàn)今發(fā)現(xiàn)以下幾種，即單核細(xì)胞增生性李斯特菌（Listeriamonocytogenes，以下簡(jiǎn)稱(chēng)單增李斯特菌）、格氏李斯特菌（L.grayi）、默氏李斯特菌（L.InuFFayi）、英諾克李斯特菌（L.innocua） 、西爾李斯特菌（L.seeligeri）、威爾斯李斯特菌（L.welshimeri）、綿羊李斯特菌（L.ivanovii） [1]。不同品種的冷藏、冷凍食品李斯特菌的污染程度不一，必須對(duì)帶菌食品進(jìn)行檢測(cè)分析，本研究對(duì)河南鶴壁地區(qū)6大類(lèi)食品即冷凍生肉、生水產(chǎn)品、生禽、豆制品、蔬菜、鮮奶共800份樣品的具體受污染情況進(jìn)行了調(diào)查分析。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）PCR引物、試劑及儀器設(shè)備等。

（2）食品材料。食品的主要來(lái)源是鶴壁市的諸多大型超市，共采集800份樣品，分為冷凍生肉、禽類(lèi)、冷凍生水產(chǎn)品、冷藏生禽類(lèi)、冷凍/冷藏豆制品、冷凍/冷藏蔬菜類(lèi)、鮮奶6類(lèi)。

（3）標(biāo)準(zhǔn)菌株。本次研究采用的標(biāo)準(zhǔn)菌株均來(lái)自中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，提供9種標(biāo)準(zhǔn)菌株，其中包括7種李斯特菌，腸炎沙門(mén)菌（Salmonellaenteritidis）1株，馬紅球菌（Rhodococcll～equi）1株[2]。

1.2 方法

1.2.1 單核細(xì)胞增生性李斯特菌的定性檢驗(yàn)

本次研究的樣品為25 g，樣品的培養(yǎng)需在225 mlLB增菌液中進(jìn)行，溫度為30 ℃，均質(zhì)后培養(yǎng)24 h，從LB增菌液中取1 ml加入增菌液30 ℃繼續(xù)培養(yǎng)24 h，用mini-VIDAS法快速篩選后，陰性結(jié)果報(bào)告未檢出，選擇性科瑪嘉李斯特菌顯色培養(yǎng)基瓊脂平板主要作用為培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的LB增菌液，培養(yǎng)24～48 h后，挑選可疑菌落穿刺血瓊脂平板，培養(yǎng)24 h后，再一次挑取在血瓊脂平板上呈典型的β-溶血的菌落劃非選擇性瓊脂平板TSA，培養(yǎng)后進(jìn)行革蘭染色并用BBL Crystal自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)培養(yǎng)后的純菌落進(jìn)行鑒定[3]。

1.2.2 定量檢測(cè)

采用MPN計(jì)數(shù)法。把25 g試樣放入225 mlLB1增菌液中均質(zhì)，在3個(gè)無(wú)菌空試管中各加入10 mL均質(zhì)液，在6管9 mlLB1增菌液中，3管加1 mlL、3管加0.1 mL均質(zhì)液。培養(yǎng)48 h后，篩選、鑒定同前法。按最終發(fā)現(xiàn)單增李斯特氏菌陽(yáng)性的管數(shù)，查MPN表，報(bào)告計(jì)數(shù)結(jié)果。

1.2.3 血清型鑒定

根據(jù)診斷血清說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 單增李斯特菌帶菌情況

共檢測(cè)800份樣品，在樣品中檢測(cè)出單增李斯特菌陽(yáng)性的概率較高，高達(dá)2.25%，有81個(gè)樣品中存在單增李斯特菌；其中冷凍生肉、禽類(lèi)帶菌率最高，為8.18%；鮮魚(yú)翅帶菌率最高為37.11%，其次為生鮮奶，達(dá)到了14.91%，豬肚、豬舌緊隨其后，帶菌率為9%～15%；冷藏雞、鴨、鴿在5%～9%。冷凍/冷藏豆制品中未發(fā)現(xiàn)李斯特菌，與所選取樣本均為半成品有密切關(guān)系。

2.2 其他李斯特菌帶菌情況

在800份樣品中，除檢測(cè)出單增李斯特菌外，還發(fā)現(xiàn)有格氏李斯特菌占1.62%、威爾斯李斯特菌占1.21%、默氏李斯特菌占0.89%、英諾克李斯特菌占0.69%，4種樣品陽(yáng)性率之和為2.60%，在生鮮奶中發(fā)現(xiàn)其他種類(lèi)的李斯特菌含量最高，占44.83%，其次為冷藏生肉禽類(lèi)占13.55%、冷凍生肉禽類(lèi)占4.69%，蔬菜類(lèi)占1.94%。

3 討論

單增李斯特菌感染人類(lèi)最主要的途徑是通過(guò)糞口傳播，并且是諸多李斯特菌中作用于人類(lèi)的致病菌，部分體制較差、抵抗力低的人群諸如兒童、老年人、孕婦等等容易受感染并引發(fā)相應(yīng)的癥狀。

本研究結(jié)果顯示，生肉禽類(lèi)、生鮮奶、蔬菜類(lèi)等食品雖然經(jīng)過(guò)冷藏冷凍處理，但李斯特菌含量較其他冷藏冷凍食品高，并占據(jù)了最主要的部分，具有較大的危險(xiǎn)性。生鮮奶中細(xì)菌極易繁殖，且繁殖速度快，不易被察覺(jué)，在擠奶以及日常的運(yùn)輸時(shí)所處的環(huán)境較難抑制李斯特菌的生長(zhǎng)，所以生鮮奶中含有相對(duì)較多的李斯特菌和單增李斯特菌。單增李斯特菌對(duì)熱具有一定的防御能力，巴氏消毒對(duì)其基本不起作用，需要在特定條件下作用足夠長(zhǎng)時(shí)間才能將其有效殺死，在日常生鮮奶消毒當(dāng)中一定要注意是否已經(jīng)徹底消毒，以減少或避免因消毒不徹底而引發(fā)李斯特菌大范圍感染[4]。蔬菜類(lèi)的李斯特菌含量相對(duì)較少，然而生吃蔬菜容易引發(fā)李斯特菌的大范圍感染，我國(guó)部分地區(qū)有吃生菜的習(xí)慣，在一定程度上加大了李斯特菌感染的幾率，在這些地區(qū)應(yīng)著重加強(qiáng)食品安全檢測(cè)。通過(guò)本次研究發(fā)現(xiàn)，冷凍/冷藏豆制品的李斯特菌陽(yáng)性率基本為0，表明在冷凍冷藏之前加工處理并采取一定措施對(duì)食物消毒等可減少李斯特菌感染[5]，而普通市面上所銷(xiāo)售的豆制品并不全部由相同的處理，因而帶菌率與此次研究并不平行，注意區(qū)別對(duì)待。在研究過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)，部分腌制食品、冷凍包裝海產(chǎn)品中李斯特菌的含量比同類(lèi)的生肉和新鮮的海產(chǎn)品高，并且具有顯著的差異，部分飲料制品的中李斯特菌含量要明顯高于奶類(lèi)，經(jīng)過(guò)分析，猜測(cè)其原因?yàn)樵趯?duì)原料進(jìn)行加工的過(guò)程中，李斯特菌持續(xù)存在并不斷在高鹽的條件下持續(xù)生長(zhǎng)，食品中李斯特菌含量日漸增加，具有較高的檢出率[6-7]。

本次研究均是對(duì)諸多大型超市進(jìn)行抽樣檢測(cè)，其衛(wèi)生條件相對(duì)較好，在很大程度上要好于普通菜市場(chǎng)，菜市場(chǎng)中的食品受感染的基數(shù)和比例可能更大，更應(yīng)該加強(qiáng)管理監(jiān)督。由于各方面因素的限制，所采集的樣品量有限，所得出的結(jié)果也只能反應(yīng)特定地區(qū)的部分食品的含菌量狀況，并且目前我國(guó)對(duì)于李斯特菌的檢測(cè)手段和方法有待進(jìn)一步提高，以提高檢出率和準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

[1] 王菊光，屈飛飛.2671件直接入口食品大腸茵群和致病菌檢測(cè)分析[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，57（5）：564-565.

[2] 唐麗華，龔紅霞.舟山市食品中單核增生性李斯特茵污染狀況監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（3）：626-627.

[3] 荊紅波，張彥春.順義區(qū)食品中單核增生性李斯特菌的污染狀況調(diào)查[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，57（24）：46174618.

[4] 駱璇，郭紅衛(wèi).上海市豬肉中金黃色葡萄球菌定量風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2010，20（3）：244-249.

[5] 董慶利.低溫蒸煮香腸中大腸桿菌生長(zhǎng)模型參數(shù)的不確定性研究[J].食品科學(xué)，2010，31（5）：5—8.

[6] 陳偉偉，楊育紅，楊毓環(huán)，等.泉州市食品中單核細(xì)胞增生性李斯特菌的定性、定量及耐藥性分析[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2003，15（1）：43—45.

[7] 吳躍進(jìn)，李小春，李毅，等.2007年溫州地區(qū)食源性致病菌污染調(diào)查分析[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2010，22（2）：168-170.endprint

摘 要：目的：了解冷藏冷凍對(duì)食品安全的影響。方法：采用PCR檢測(cè)手段對(duì)樣品進(jìn)行初篩，對(duì)最主要的6大類(lèi)冷藏冷凍食品進(jìn)行了李斯特茵檢測(cè)，共計(jì)數(shù)量800份。結(jié)果：所檢測(cè)樣品中李斯特茵污染較為常見(jiàn)、廣泛，樣品陽(yáng)性率2.25%。結(jié)論：冷凍冷藏食品中李斯特茵污染普遍較嚴(yán)重，相關(guān)部門(mén)應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)督管理。

關(guān)鍵詞：利斯特氏茵屬 利斯特氏茵 單核細(xì)胞增生

中圖分類(lèi)號(hào)：R15 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）08（b）-0215-01

食品污染李斯特菌屬種類(lèi)較多，現(xiàn)今發(fā)現(xiàn)以下幾種，即單核細(xì)胞增生性李斯特菌（Listeriamonocytogenes，以下簡(jiǎn)稱(chēng)單增李斯特菌）、格氏李斯特菌（L.grayi）、默氏李斯特菌（L.InuFFayi）、英諾克李斯特菌（L.innocua） 、西爾李斯特菌（L.seeligeri）、威爾斯李斯特菌（L.welshimeri）、綿羊李斯特菌（L.ivanovii） [1]。不同品種的冷藏、冷凍食品李斯特菌的污染程度不一，必須對(duì)帶菌食品進(jìn)行檢測(cè)分析，本研究對(duì)河南鶴壁地區(qū)6大類(lèi)食品即冷凍生肉、生水產(chǎn)品、生禽、豆制品、蔬菜、鮮奶共800份樣品的具體受污染情況進(jìn)行了調(diào)查分析。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）PCR引物、試劑及儀器設(shè)備等。

（2）食品材料。食品的主要來(lái)源是鶴壁市的諸多大型超市，共采集800份樣品，分為冷凍生肉、禽類(lèi)、冷凍生水產(chǎn)品、冷藏生禽類(lèi)、冷凍/冷藏豆制品、冷凍/冷藏蔬菜類(lèi)、鮮奶6類(lèi)。

（3）標(biāo)準(zhǔn)菌株。本次研究采用的標(biāo)準(zhǔn)菌株均來(lái)自中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，提供9種標(biāo)準(zhǔn)菌株，其中包括7種李斯特菌，腸炎沙門(mén)菌（Salmonellaenteritidis）1株，馬紅球菌（Rhodococcll～equi）1株[2]。

1.2 方法

1.2.1 單核細(xì)胞增生性李斯特菌的定性檢驗(yàn)

本次研究的樣品為25 g，樣品的培養(yǎng)需在225 mlLB增菌液中進(jìn)行，溫度為30 ℃，均質(zhì)后培養(yǎng)24 h，從LB增菌液中取1 ml加入增菌液30 ℃繼續(xù)培養(yǎng)24 h，用mini-VIDAS法快速篩選后，陰性結(jié)果報(bào)告未檢出，選擇性科瑪嘉李斯特菌顯色培養(yǎng)基瓊脂平板主要作用為培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的LB增菌液，培養(yǎng)24～48 h后，挑選可疑菌落穿刺血瓊脂平板，培養(yǎng)24 h后，再一次挑取在血瓊脂平板上呈典型的β-溶血的菌落劃非選擇性瓊脂平板TSA，培養(yǎng)后進(jìn)行革蘭染色并用BBL Crystal自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)培養(yǎng)后的純菌落進(jìn)行鑒定[3]。

1.2.2 定量檢測(cè)

采用MPN計(jì)數(shù)法。把25 g試樣放入225 mlLB1增菌液中均質(zhì)，在3個(gè)無(wú)菌空試管中各加入10 mL均質(zhì)液，在6管9 mlLB1增菌液中，3管加1 mlL、3管加0.1 mL均質(zhì)液。培養(yǎng)48 h后，篩選、鑒定同前法。按最終發(fā)現(xiàn)單增李斯特氏菌陽(yáng)性的管數(shù)，查MPN表，報(bào)告計(jì)數(shù)結(jié)果。

1.2.3 血清型鑒定

根據(jù)診斷血清說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 單增李斯特菌帶菌情況

共檢測(cè)800份樣品，在樣品中檢測(cè)出單增李斯特菌陽(yáng)性的概率較高，高達(dá)2.25%，有81個(gè)樣品中存在單增李斯特菌；其中冷凍生肉、禽類(lèi)帶菌率最高，為8.18%；鮮魚(yú)翅帶菌率最高為37.11%，其次為生鮮奶，達(dá)到了14.91%，豬肚、豬舌緊隨其后，帶菌率為9%～15%；冷藏雞、鴨、鴿在5%～9%。冷凍/冷藏豆制品中未發(fā)現(xiàn)李斯特菌，與所選取樣本均為半成品有密切關(guān)系。

2.2 其他李斯特菌帶菌情況

在800份樣品中，除檢測(cè)出單增李斯特菌外，還發(fā)現(xiàn)有格氏李斯特菌占1.62%、威爾斯李斯特菌占1.21%、默氏李斯特菌占0.89%、英諾克李斯特菌占0.69%，4種樣品陽(yáng)性率之和為2.60%，在生鮮奶中發(fā)現(xiàn)其他種類(lèi)的李斯特菌含量最高，占44.83%，其次為冷藏生肉禽類(lèi)占13.55%、冷凍生肉禽類(lèi)占4.69%，蔬菜類(lèi)占1.94%。

3 討論

單增李斯特菌感染人類(lèi)最主要的途徑是通過(guò)糞口傳播，并且是諸多李斯特菌中作用于人類(lèi)的致病菌，部分體制較差、抵抗力低的人群諸如兒童、老年人、孕婦等等容易受感染并引發(fā)相應(yīng)的癥狀。

本研究結(jié)果顯示，生肉禽類(lèi)、生鮮奶、蔬菜類(lèi)等食品雖然經(jīng)過(guò)冷藏冷凍處理，但李斯特菌含量較其他冷藏冷凍食品高，并占據(jù)了最主要的部分，具有較大的危險(xiǎn)性。生鮮奶中細(xì)菌極易繁殖，且繁殖速度快，不易被察覺(jué)，在擠奶以及日常的運(yùn)輸時(shí)所處的環(huán)境較難抑制李斯特菌的生長(zhǎng)，所以生鮮奶中含有相對(duì)較多的李斯特菌和單增李斯特菌。單增李斯特菌對(duì)熱具有一定的防御能力，巴氏消毒對(duì)其基本不起作用，需要在特定條件下作用足夠長(zhǎng)時(shí)間才能將其有效殺死，在日常生鮮奶消毒當(dāng)中一定要注意是否已經(jīng)徹底消毒，以減少或避免因消毒不徹底而引發(fā)李斯特菌大范圍感染[4]。蔬菜類(lèi)的李斯特菌含量相對(duì)較少，然而生吃蔬菜容易引發(fā)李斯特菌的大范圍感染，我國(guó)部分地區(qū)有吃生菜的習(xí)慣，在一定程度上加大了李斯特菌感染的幾率，在這些地區(qū)應(yīng)著重加強(qiáng)食品安全檢測(cè)。通過(guò)本次研究發(fā)現(xiàn)，冷凍/冷藏豆制品的李斯特菌陽(yáng)性率基本為0，表明在冷凍冷藏之前加工處理并采取一定措施對(duì)食物消毒等可減少李斯特菌感染[5]，而普通市面上所銷(xiāo)售的豆制品并不全部由相同的處理，因而帶菌率與此次研究并不平行，注意區(qū)別對(duì)待。在研究過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)，部分腌制食品、冷凍包裝海產(chǎn)品中李斯特菌的含量比同類(lèi)的生肉和新鮮的海產(chǎn)品高，并且具有顯著的差異，部分飲料制品的中李斯特菌含量要明顯高于奶類(lèi)，經(jīng)過(guò)分析，猜測(cè)其原因?yàn)樵趯?duì)原料進(jìn)行加工的過(guò)程中，李斯特菌持續(xù)存在并不斷在高鹽的條件下持續(xù)生長(zhǎng)，食品中李斯特菌含量日漸增加，具有較高的檢出率[6-7]。

本次研究均是對(duì)諸多大型超市進(jìn)行抽樣檢測(cè)，其衛(wèi)生條件相對(duì)較好，在很大程度上要好于普通菜市場(chǎng)，菜市場(chǎng)中的食品受感染的基數(shù)和比例可能更大，更應(yīng)該加強(qiáng)管理監(jiān)督。由于各方面因素的限制，所采集的樣品量有限，所得出的結(jié)果也只能反應(yīng)特定地區(qū)的部分食品的含菌量狀況，并且目前我國(guó)對(duì)于李斯特菌的檢測(cè)手段和方法有待進(jìn)一步提高，以提高檢出率和準(zhǔn)確性。

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