趙麗平++喬新榮++殷東林

摘要：采用簡單熱水浸提法提取信陽紅茶多糖，探討料液比、提取時間、提取溫度等因素對多糖提取率及葡萄糖激酶活性的影響。結果表明：提取紅茶多糖的最佳工藝條件為料液比1 g ∶25 mL、提取時間6 h、提取溫度95 ℃，該工藝條件下多糖的提取率為3.50%，葡萄糖激酶的相對酶活比值達到3.12。多糖提取率與葡萄糖激酶的相對酶活并不呈正相關關系。

關鍵詞：信陽紅茶；多糖；葡萄糖激酶；提取工藝

中圖分類號： TS201.1文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）10-0263-02

收稿日期：2013-12-08

基金項目：河南省茶產業(yè)發(fā)展研究計劃（編號：KX13J11）。

作者簡介：趙麗平（1979—），女，河南許昌人，碩士，講師，主要從事生物化學方面的教學與研究。E-mail：zhaoliping19790224@163.com。信陽毛尖歷史悠久，而且香氣濃郁，甘醇爽口，是中國十大名茶之一。近幾年來，河南省信陽市又生產出紅茶新品種，名為“信陽紅”[1]。據報道，綠茶的抗氧化性主要來自于茶多酚，而紅茶的抗氧化性主要來自于茶多糖。一直以來，人們對信陽綠茶多酚的研究較多，而對信陽紅茶多糖的研究較少。研究表明，茶多糖具有降血糖、降血脂、降血壓、減慢心率、增加冠脈流量、抗氧化、抗血栓及抗凝血等作用[2-5]。茶多糖的提取方法有很多種，本研究采用操作簡單、投資少的水提法提取紅茶多糖，并應用正交設計優(yōu)選法對紅茶多糖的提取工藝進行研究。同時為揭示多糖的高提取效率與其高活性之間的相關性，以葡萄糖激酶為例，系統(tǒng)考察了提取條件對多糖活性的影響，以期為紅茶多糖生物活性的系統(tǒng)研究及將其作為藥用及食品等多方面功能原料的開發(fā)提供理論參考依據。

1材料與方法

1.1材料與試劑

信陽紅茶，購自河南省信陽市茶市；試驗動物為昆明種小鼠，由信陽農林學院動物科學系飼養(yǎng)。

分析純無水乙醇、丙酮、氯仿-正丁醇（武漢中天化工責任有限公司）；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、ATP、NADP（Solarbio公司）。

1.2儀器與設備

MZ-10粉碎機（青島邁科隆粉體技術設備有限公司）；101A-2型電熱鼓風干燥箱（上海賀德實驗設備公司）；DK-S24 型電熱數顯恒溫水浴鍋（上海精密科學儀器有限公司）；FA1004型電子天平（上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠）；LD5-2A型離心機（湘儀離心機儀器有限公司）；721分光光度計（上海光學儀器廠）。

1.3試驗方法[6-10]

1.3.1單因素試驗將一定量的紅茶在烘箱中干燥后用粉碎機粉碎，得紅茶細粉末，用熱水浸提，采用不同料液比（g ∶mL）、不同提取時間和不同提取溫度提取紅茶多糖。（1）料液比試驗。2.1單因素試驗結果

2.1.1料液比對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖1可知，在提取溫度和提取時間一定時，提取率隨料液比的增大呈現先增加后減小的趨勢。料液比1 g ∶20 mL時的提取率達最大值，而隨液料比進一步加大，提取率反而下降，原因可能是由于隨著液料比增大，溶液的黏度降低，紅茶多糖的擴散阻力降低，從而有利于多糖的溶出，使多糖得率逐漸提高；但液料比過大會引起后續(xù)提取過程中多糖的損失，導致多糖得率減小。因此從全方位考慮，本試驗選擇的料液比的3個水平為1 g ∶15 mL、1 g ∶20 mL、1 g ∶25 mL作為正交試驗的料液比因素。

2.1.2提取時間對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖2可以看出，在提取溫度和料液比一定時，隨著提取時間的延長，提取率呈現出先增加后減小的趨勢，以提取6.0 h的提取率最高，在6.0 h以后，隨著提取時間延長，提取率有所下降。這是因為在提取的初始階段，隨著時間延長，紅茶多糖的溶解越來越充分，從而使多糖的提取率逐漸升高；當提取一定時間后，溶出的雜質也越來越多，溶液的黏度增加了，從而阻礙了多糖的擴散溶出，使多糖提取率反而下降；此外，也可能是提取時間過長導致紅茶多糖部分降解所致?；谔崛⌒?、提取成本方面的考慮，將6.0 h定為紅茶多糖的較佳提取時間，選取5.5、6.0、6.5 h作為正交試驗時間因素的3個水平。

2.1.3提取溫度對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖3可以看出，紅茶提取率隨著溫度的升高明顯增加。在 90 ℃ 左右時，紅茶多糖提取率的上升開始不很明顯；當溫度超過95 ℃時，提取率有下降趨勢，這可能是因為溫度過高時容易引起多糖的降解，因此提取率下降，而溫度過低則不利于多糖物質的溶出。因此，選擇95 ℃作為紅茶多糖的最佳提取溫度，選擇85、90、95 ℃作為正交試驗溫度因素的3個水平。

2.2正交試驗結果

各因素水平設計見表1，試驗結果見表2。

3結論

紅茶多糖提取過程中會受到多因素的影響，其中料液比、浸提時間和浸提溫度均會對紅茶多糖得率產生影響。本試驗中，料液比對多糖提取率的影響最大，其次是浸提溫度，最后為浸提時間；但從本試驗結果來看，提取率與葡萄糖激酶相對酶活并不呈正相關關系。影響紅茶多糖提取率及酶活的因素

很多，除了上述因素外，多糖提取方法、茶葉的采摘時期、除蛋白試劑的種類和方法等都會影響紅茶多糖提取率。因此今后還需要對這些因素進行分析，以進一步優(yōu)化提取條件，提高提取率，從而在綜合多方面因素的基礎上探討提取率與多糖酶活性的關系。同時，對紅茶多糖其他方面的研究，如分離純化、組分鑒定、分子測量和生物活性測定等也有待深入。

參考文獻：

[1]佚名. “信陽紅”今年產值25億元[J]. 中國茶葉，2012（1）：25.

[2]王莉英，俞茂華. 茶多糖的組分及其生物活性[J]. 中國臨床醫(yī)學，2004，11（5）：924-925.

[3]倪德江，陳玉瓊，謝筆鈞，等. 綠茶、烏龍茶、紅茶的茶多糖組成、抗氧化及降血糖作用研究[J]. 營養(yǎng)學報，2004，26（1）：57-60.

[4]王超，施曉云，祁楊. 茶多糖提取及其穩(wěn)定性研究[J]. 江蘇科技大學學報：自然科學版，2011，25（2）：187-190.

[5]劉素強，鐘應富，吳全，等. 茶多糖的研究及其利用[J]. 南方農業(yè)，2009，3（5）：111-113.

[6]趙麗平，肖穎，董翠. 信陽綠茶中茶多糖提取工藝研究[J]. 江蘇農業(yè)科學，2012，40（10）：245-246.

[7]章銀良，李紅旗，高峻，等. 螺旋藻多糖提取新工藝的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，1999，25（2）：15-18.

[8]林標聲，楊生玉，胡曉冰，等. 茯苓液體培養(yǎng)法中羧甲基茯苓多糖（CMP）的提取、純化及鑒定[J]. 河南大學學報：自然科學版，2008，38（3）：296-300.

[9]王紅慶，趙麗平，朱曉明. 槐花多糖提取工藝的研究[J]. 湖北農業(yè)科學，2011，50（13）：2733-2735.

[10]周向軍，高義霞，袁毅君，等. 烏龍茶多糖提取工藝及抗氧化作用研究[J]. 中國釀造，2011（8）：80-84.

摘要：采用簡單熱水浸提法提取信陽紅茶多糖，探討料液比、提取時間、提取溫度等因素對多糖提取率及葡萄糖激酶活性的影響。結果表明：提取紅茶多糖的最佳工藝條件為料液比1 g ∶25 mL、提取時間6 h、提取溫度95 ℃，該工藝條件下多糖的提取率為3.50%，葡萄糖激酶的相對酶活比值達到3.12。多糖提取率與葡萄糖激酶的相對酶活并不呈正相關關系。

關鍵詞：信陽紅茶；多糖；葡萄糖激酶；提取工藝

中圖分類號： TS201.1文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）10-0263-02

收稿日期：2013-12-08

基金項目：河南省茶產業(yè)發(fā)展研究計劃（編號：KX13J11）。

作者簡介：趙麗平（1979—），女，河南許昌人，碩士，講師，主要從事生物化學方面的教學與研究。E-mail：zhaoliping19790224@163.com。信陽毛尖歷史悠久，而且香氣濃郁，甘醇爽口，是中國十大名茶之一。近幾年來，河南省信陽市又生產出紅茶新品種，名為“信陽紅”[1]。據報道，綠茶的抗氧化性主要來自于茶多酚，而紅茶的抗氧化性主要來自于茶多糖。一直以來，人們對信陽綠茶多酚的研究較多，而對信陽紅茶多糖的研究較少。研究表明，茶多糖具有降血糖、降血脂、降血壓、減慢心率、增加冠脈流量、抗氧化、抗血栓及抗凝血等作用[2-5]。茶多糖的提取方法有很多種，本研究采用操作簡單、投資少的水提法提取紅茶多糖，并應用正交設計優(yōu)選法對紅茶多糖的提取工藝進行研究。同時為揭示多糖的高提取效率與其高活性之間的相關性，以葡萄糖激酶為例，系統(tǒng)考察了提取條件對多糖活性的影響，以期為紅茶多糖生物活性的系統(tǒng)研究及將其作為藥用及食品等多方面功能原料的開發(fā)提供理論參考依據。

1材料與方法

1.1材料與試劑

信陽紅茶，購自河南省信陽市茶市；試驗動物為昆明種小鼠，由信陽農林學院動物科學系飼養(yǎng)。

分析純無水乙醇、丙酮、氯仿-正丁醇（武漢中天化工責任有限公司）；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、ATP、NADP（Solarbio公司）。

1.2儀器與設備

MZ-10粉碎機（青島邁科隆粉體技術設備有限公司）；101A-2型電熱鼓風干燥箱（上海賀德實驗設備公司）；DK-S24 型電熱數顯恒溫水浴鍋（上海精密科學儀器有限公司）；FA1004型電子天平（上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠）；LD5-2A型離心機（湘儀離心機儀器有限公司）；721分光光度計（上海光學儀器廠）。

1.3試驗方法[6-10]

1.3.1單因素試驗將一定量的紅茶在烘箱中干燥后用粉碎機粉碎，得紅茶細粉末，用熱水浸提，采用不同料液比（g ∶mL）、不同提取時間和不同提取溫度提取紅茶多糖。（1）料液比試驗。2.1單因素試驗結果

2.1.1料液比對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖1可知，在提取溫度和提取時間一定時，提取率隨料液比的增大呈現先增加后減小的趨勢。料液比1 g ∶20 mL時的提取率達最大值，而隨液料比進一步加大，提取率反而下降，原因可能是由于隨著液料比增大，溶液的黏度降低，紅茶多糖的擴散阻力降低，從而有利于多糖的溶出，使多糖得率逐漸提高；但液料比過大會引起后續(xù)提取過程中多糖的損失，導致多糖得率減小。因此從全方位考慮，本試驗選擇的料液比的3個水平為1 g ∶15 mL、1 g ∶20 mL、1 g ∶25 mL作為正交試驗的料液比因素。

2.1.2提取時間對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖2可以看出，在提取溫度和料液比一定時，隨著提取時間的延長，提取率呈現出先增加后減小的趨勢，以提取6.0 h的提取率最高，在6.0 h以后，隨著提取時間延長，提取率有所下降。這是因為在提取的初始階段，隨著時間延長，紅茶多糖的溶解越來越充分，從而使多糖的提取率逐漸升高；當提取一定時間后，溶出的雜質也越來越多，溶液的黏度增加了，從而阻礙了多糖的擴散溶出，使多糖提取率反而下降；此外，也可能是提取時間過長導致紅茶多糖部分降解所致?；谔崛⌒?、提取成本方面的考慮，將6.0 h定為紅茶多糖的較佳提取時間，選取5.5、6.0、6.5 h作為正交試驗時間因素的3個水平。

2.1.3提取溫度對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖3可以看出，紅茶提取率隨著溫度的升高明顯增加。在 90 ℃ 左右時，紅茶多糖提取率的上升開始不很明顯；當溫度超過95 ℃時，提取率有下降趨勢，這可能是因為溫度過高時容易引起多糖的降解，因此提取率下降，而溫度過低則不利于多糖物質的溶出。因此，選擇95 ℃作為紅茶多糖的最佳提取溫度，選擇85、90、95 ℃作為正交試驗溫度因素的3個水平。

2.2正交試驗結果

各因素水平設計見表1，試驗結果見表2。

3結論

紅茶多糖提取過程中會受到多因素的影響，其中料液比、浸提時間和浸提溫度均會對紅茶多糖得率產生影響。本試驗中，料液比對多糖提取率的影響最大，其次是浸提溫度，最后為浸提時間；但從本試驗結果來看，提取率與葡萄糖激酶相對酶活并不呈正相關關系。影響紅茶多糖提取率及酶活的因素

很多，除了上述因素外，多糖提取方法、茶葉的采摘時期、除蛋白試劑的種類和方法等都會影響紅茶多糖提取率。因此今后還需要對這些因素進行分析，以進一步優(yōu)化提取條件，提高提取率，從而在綜合多方面因素的基礎上探討提取率與多糖酶活性的關系。同時，對紅茶多糖其他方面的研究，如分離純化、組分鑒定、分子測量和生物活性測定等也有待深入。

參考文獻：

[1]佚名. “信陽紅”今年產值25億元[J]. 中國茶葉，2012（1）：25.

[2]王莉英，俞茂華. 茶多糖的組分及其生物活性[J]. 中國臨床醫(yī)學，2004，11（5）：924-925.

[3]倪德江，陳玉瓊，謝筆鈞，等. 綠茶、烏龍茶、紅茶的茶多糖組成、抗氧化及降血糖作用研究[J]. 營養(yǎng)學報，2004，26（1）：57-60.

[4]王超，施曉云，祁楊. 茶多糖提取及其穩(wěn)定性研究[J]. 江蘇科技大學學報：自然科學版，2011，25（2）：187-190.

[5]劉素強，鐘應富，吳全，等. 茶多糖的研究及其利用[J]. 南方農業(yè)，2009，3（5）：111-113.

[6]趙麗平，肖穎，董翠. 信陽綠茶中茶多糖提取工藝研究[J]. 江蘇農業(yè)科學，2012，40（10）：245-246.

[7]章銀良，李紅旗，高峻，等. 螺旋藻多糖提取新工藝的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，1999，25（2）：15-18.

[8]林標聲，楊生玉，胡曉冰，等. 茯苓液體培養(yǎng)法中羧甲基茯苓多糖（CMP）的提取、純化及鑒定[J]. 河南大學學報：自然科學版，2008，38（3）：296-300.

[9]王紅慶，趙麗平，朱曉明. 槐花多糖提取工藝的研究[J]. 湖北農業(yè)科學，2011，50（13）：2733-2735.

[10]周向軍，高義霞，袁毅君，等. 烏龍茶多糖提取工藝及抗氧化作用研究[J]. 中國釀造，2011（8）：80-84.

摘要：采用簡單熱水浸提法提取信陽紅茶多糖，探討料液比、提取時間、提取溫度等因素對多糖提取率及葡萄糖激酶活性的影響。結果表明：提取紅茶多糖的最佳工藝條件為料液比1 g ∶25 mL、提取時間6 h、提取溫度95 ℃，該工藝條件下多糖的提取率為3.50%，葡萄糖激酶的相對酶活比值達到3.12。多糖提取率與葡萄糖激酶的相對酶活并不呈正相關關系。

關鍵詞：信陽紅茶；多糖；葡萄糖激酶；提取工藝

中圖分類號： TS201.1文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）10-0263-02

收稿日期：2013-12-08

基金項目：河南省茶產業(yè)發(fā)展研究計劃（編號：KX13J11）。

作者簡介：趙麗平（1979—），女，河南許昌人，碩士，講師，主要從事生物化學方面的教學與研究。E-mail：zhaoliping19790224@163.com。信陽毛尖歷史悠久，而且香氣濃郁，甘醇爽口，是中國十大名茶之一。近幾年來，河南省信陽市又生產出紅茶新品種，名為“信陽紅”[1]。據報道，綠茶的抗氧化性主要來自于茶多酚，而紅茶的抗氧化性主要來自于茶多糖。一直以來，人們對信陽綠茶多酚的研究較多，而對信陽紅茶多糖的研究較少。研究表明，茶多糖具有降血糖、降血脂、降血壓、減慢心率、增加冠脈流量、抗氧化、抗血栓及抗凝血等作用[2-5]。茶多糖的提取方法有很多種，本研究采用操作簡單、投資少的水提法提取紅茶多糖，并應用正交設計優(yōu)選法對紅茶多糖的提取工藝進行研究。同時為揭示多糖的高提取效率與其高活性之間的相關性，以葡萄糖激酶為例，系統(tǒng)考察了提取條件對多糖活性的影響，以期為紅茶多糖生物活性的系統(tǒng)研究及將其作為藥用及食品等多方面功能原料的開發(fā)提供理論參考依據。

1材料與方法

1.1材料與試劑

信陽紅茶，購自河南省信陽市茶市；試驗動物為昆明種小鼠，由信陽農林學院動物科學系飼養(yǎng)。

分析純無水乙醇、丙酮、氯仿-正丁醇（武漢中天化工責任有限公司）；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、ATP、NADP（Solarbio公司）。

1.2儀器與設備

MZ-10粉碎機（青島邁科隆粉體技術設備有限公司）；101A-2型電熱鼓風干燥箱（上海賀德實驗設備公司）；DK-S24 型電熱數顯恒溫水浴鍋（上海精密科學儀器有限公司）；FA1004型電子天平（上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠）；LD5-2A型離心機（湘儀離心機儀器有限公司）；721分光光度計（上海光學儀器廠）。

1.3試驗方法[6-10]

1.3.1單因素試驗將一定量的紅茶在烘箱中干燥后用粉碎機粉碎，得紅茶細粉末，用熱水浸提，采用不同料液比（g ∶mL）、不同提取時間和不同提取溫度提取紅茶多糖。（1）料液比試驗。2.1單因素試驗結果

2.1.1料液比對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖1可知，在提取溫度和提取時間一定時，提取率隨料液比的增大呈現先增加后減小的趨勢。料液比1 g ∶20 mL時的提取率達最大值，而隨液料比進一步加大，提取率反而下降，原因可能是由于隨著液料比增大，溶液的黏度降低，紅茶多糖的擴散阻力降低，從而有利于多糖的溶出，使多糖得率逐漸提高；但液料比過大會引起后續(xù)提取過程中多糖的損失，導致多糖得率減小。因此從全方位考慮，本試驗選擇的料液比的3個水平為1 g ∶15 mL、1 g ∶20 mL、1 g ∶25 mL作為正交試驗的料液比因素。

2.1.2提取時間對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖2可以看出，在提取溫度和料液比一定時，隨著提取時間的延長，提取率呈現出先增加后減小的趨勢，以提取6.0 h的提取率最高，在6.0 h以后，隨著提取時間延長，提取率有所下降。這是因為在提取的初始階段，隨著時間延長，紅茶多糖的溶解越來越充分，從而使多糖的提取率逐漸升高；當提取一定時間后，溶出的雜質也越來越多，溶液的黏度增加了，從而阻礙了多糖的擴散溶出，使多糖提取率反而下降；此外，也可能是提取時間過長導致紅茶多糖部分降解所致?；谔崛⌒?、提取成本方面的考慮，將6.0 h定為紅茶多糖的較佳提取時間，選取5.5、6.0、6.5 h作為正交試驗時間因素的3個水平。

2.1.3提取溫度對紅茶多糖化合物提取率的影響由圖3可以看出，紅茶提取率隨著溫度的升高明顯增加。在 90 ℃ 左右時，紅茶多糖提取率的上升開始不很明顯；當溫度超過95 ℃時，提取率有下降趨勢，這可能是因為溫度過高時容易引起多糖的降解，因此提取率下降，而溫度過低則不利于多糖物質的溶出。因此，選擇95 ℃作為紅茶多糖的最佳提取溫度，選擇85、90、95 ℃作為正交試驗溫度因素的3個水平。

2.2正交試驗結果

各因素水平設計見表1，試驗結果見表2。

3結論

紅茶多糖提取過程中會受到多因素的影響，其中料液比、浸提時間和浸提溫度均會對紅茶多糖得率產生影響。本試驗中，料液比對多糖提取率的影響最大，其次是浸提溫度，最后為浸提時間；但從本試驗結果來看，提取率與葡萄糖激酶相對酶活并不呈正相關關系。影響紅茶多糖提取率及酶活的因素

很多，除了上述因素外，多糖提取方法、茶葉的采摘時期、除蛋白試劑的種類和方法等都會影響紅茶多糖提取率。因此今后還需要對這些因素進行分析，以進一步優(yōu)化提取條件，提高提取率，從而在綜合多方面因素的基礎上探討提取率與多糖酶活性的關系。同時，對紅茶多糖其他方面的研究，如分離純化、組分鑒定、分子測量和生物活性測定等也有待深入。

參考文獻：

[1]佚名. “信陽紅”今年產值25億元[J]. 中國茶葉，2012（1）：25.

[2]王莉英，俞茂華. 茶多糖的組分及其生物活性[J]. 中國臨床醫(yī)學，2004，11（5）：924-925.

[3]倪德江，陳玉瓊，謝筆鈞，等. 綠茶、烏龍茶、紅茶的茶多糖組成、抗氧化及降血糖作用研究[J]. 營養(yǎng)學報，2004，26（1）：57-60.

[4]王超，施曉云，祁楊. 茶多糖提取及其穩(wěn)定性研究[J]. 江蘇科技大學學報：自然科學版，2011，25（2）：187-190.

[5]劉素強，鐘應富，吳全，等. 茶多糖的研究及其利用[J]. 南方農業(yè)，2009，3（5）：111-113.

[6]趙麗平，肖穎，董翠. 信陽綠茶中茶多糖提取工藝研究[J]. 江蘇農業(yè)科學，2012，40（10）：245-246.

[7]章銀良，李紅旗，高峻，等. 螺旋藻多糖提取新工藝的研究[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，1999，25（2）：15-18.

[8]林標聲，楊生玉，胡曉冰，等. 茯苓液體培養(yǎng)法中羧甲基茯苓多糖（CMP）的提取、純化及鑒定[J]. 河南大學學報：自然科學版，2008，38（3）：296-300.

[9]王紅慶，趙麗平，朱曉明. 槐花多糖提取工藝的研究[J]. 湖北農業(yè)科學，2011，50（13）：2733-2735.

[10]周向軍，高義霞，袁毅君，等. 烏龍茶多糖提取工藝及抗氧化作用研究[J]. 中國釀造，2011（8）：80-84.