王志東 張子軍

鐵在人體中含量約為4 g, 主要存在兩類功能性結(jié)構(gòu)中。一種含量占70%左右, 以紅細(xì)胞中的血紅蛋白、肌纖維中的肌紅蛋白的形式存在；另一種含量占30%, 以鐵蛋白或含鐵血黃素等貯存鐵的形式貯存于骨髓和肝、脾中。鐵是線粒體呼吸鏈和核糖核酸氧化酶及還原酶的組成成分, 在體內(nèi)氧化-還原反應(yīng)中起著重要作用。而肝臟是其貯存和代謝的重要器官, 因此, 肝臟鐵代謝異常與肝臟疾病密切相關(guān)。通過(guò)對(duì)2006年1月～2013年12月115例慢性乙型肝炎的肝組織中的沉積性含鐵血黃素染色, 以期了解其與慢性乙型肝炎分級(jí)和分期的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 慢性乙型肝炎患者共計(jì)115例。男75例,女40例, 年齡21～61歲, 平均年齡31.4歲。慢性乙型肝炎診斷的分級(jí)和分期根據(jù)2005年9月中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的《病毒性肝炎防治方案》進(jìn)行。依據(jù)分級(jí)和分期的結(jié)果進(jìn)行分組［輕度(A)、中度(B)、重度(C)］, 每組33例；另設(shè)肝硬化組(16例)?？傆?jì)四組。

1.2 研究方法 以中性甲醛固定肝穿組織、85%～100%梯度酒精脫水、二甲苯透明、650石蠟包埋。切片厚度3～4 μm, 每例切4張, 分別進(jìn)行常規(guī)染色(HE法)、網(wǎng)狀纖維染色(Gomori法)、膠原纖維染色(Masson法)和含鐵血黃素染色(Schmeltzer法)［1］。切片根據(jù)常規(guī)染色、網(wǎng)狀纖維染色、膠原纖維染色進(jìn)行慢性乙型肝炎的分級(jí)和分期；鐵染色結(jié)果觀察：①顯色程度：分弱、中、強(qiáng), 分別用1、2、3表示。②顯色范圍：a.高倍視野顯色范圍<1/4；b.高倍視野顯色范圍1/4～2/4；c.高倍視野顯色范圍2/4～3/4；d.高倍視野顯色范圍>3/4。③顯色指數(shù)=顯色程度×顯色范圍：取其均數(shù)為每張切片檢測(cè)指標(biāo)的最終顯色指數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 網(wǎng)狀纖維染色中, 網(wǎng)狀纖維被染成黑色, 背景呈淡黃色；膠原纖維染色中, 膠原纖維被染成綠色, 背景呈紅色。

2.2 含鐵血黃素染色中, 鐵顆粒被染為藍(lán)色, 背景呈淡紅色。在輕、中度兩組可見(jiàn)肝細(xì)胞內(nèi)少量陽(yáng)性表達(dá)；重度及肝硬化組陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)明顯增多, 并與肝纖維化程度呈明顯的正相關(guān)性。重度肝炎及肝硬化組織中含鐵血黃素染色的表達(dá)明顯高于輕度及中度慢性肝炎(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 慢性乙型肝炎分級(jí)分期含鐵血黃素(±s)

表1 慢性乙型肝炎分級(jí)分期含鐵血黃素(±s)

注：重度肝炎及肝硬化組織中含鐵血黃素表達(dá)明顯高于輕度及中度慢性肝炎, aP<0.01

項(xiàng)目 含鐵血黃素輕度A(G0-2S0-2)1.50±1.26中度B(G3S3)3.30±1.64重度C(G4S4)6.00±3.63a肝硬化 8.01±3.28a

3 討論

肝臟鐵負(fù)荷增加所導(dǎo)致的結(jié)果常表現(xiàn)為肝臟纖維化或肝硬化。其病理組織學(xué)表現(xiàn)為肝組織門脈區(qū)最先積聚鐵而最易受損, 肝細(xì)胞中存在異常多的棕色色素(含鐵血黃素沉積)與組織內(nèi)增多的結(jié)締組織, 在鐵過(guò)載后期表現(xiàn)更為明顯。

這項(xiàng)研究結(jié)果表明, 慢性乙型肝炎肝組織分級(jí)分期的逐漸增高, 肝組織內(nèi)含鐵血黃素染色指數(shù)也逐漸增加, 特別在重型肝炎和肝硬化的肝組織中增加明顯。慢性乙型肝炎肝組織中含鐵血黃素染色指數(shù)增加, 推測(cè)和下列因素相關(guān)：①肝細(xì)胞壞死時(shí), 細(xì)胞中的貯存鐵進(jìn)入血液, 進(jìn)而又被其他細(xì)胞吸收。②肝臟炎癥, 門脈壓力增高, 導(dǎo)致脾功能亢進(jìn), 紅細(xì)胞破壞增加, 血中血紅蛋白增加, 肝細(xì)胞吸收鐵負(fù)荷增加。③肝臟炎癥導(dǎo)致其鐵轉(zhuǎn)化的能力下降。

肝臟纖維化與鐵過(guò)剩程度有關(guān), 有作者發(fā)現(xiàn)鐵過(guò)剩的大鼠肝貯脂細(xì)胞內(nèi)膠原合成及Disse間隙內(nèi)膠原沉積增加, 提示鐵可直接促進(jìn)肝膠原合成［2］。鐵過(guò)?？纱龠M(jìn)自由基及脂質(zhì)過(guò)氧化的發(fā)生與溶酶體破壞, 導(dǎo)致細(xì)胞損傷［3］。鐵過(guò)剩引起肝纖維化可能也因自由基與膠質(zhì)過(guò)氧化使溶酶體破壞導(dǎo)致細(xì)胞損傷, 激活間質(zhì)膠原合成系統(tǒng), 從而引起肝纖維化。

Sebastiani等［4］通過(guò)回顧性研究發(fā)現(xiàn)：慢性乙型肝炎患者, 肝臟鐵沉積和血清鐵水平升高都很常見(jiàn), 而血清鐵的水平與鐵蛋白水平正相關(guān), 從而間接說(shuō)明慢性乙型肝炎患者的血清鐵蛋白水平是普遍升高的。馮紅萍［5］對(duì)89例慢性乙型重癥肝炎患者動(dòng)態(tài)檢測(cè)甲胎蛋白與血清鐵蛋白的變化情況時(shí)發(fā)現(xiàn), 血清鐵蛋白隨病情加重而逐漸升高, 以重癥肝炎升高最為顯著。而且, 隨著病情的轉(zhuǎn)化, 血清鐵蛋白水平也隨之變化, 最終生存下來(lái)的患者血清鐵蛋白由高轉(zhuǎn)低, 而最終死亡的患者血清鐵蛋白則持續(xù)處于高水平, 證實(shí)了血清鐵蛋白與肝臟病變嚴(yán)重程度一致。

從既往的研究成果及本項(xiàng)研究結(jié)果看, 在乙型肝炎的發(fā)病過(guò)程中, 機(jī)體鐵負(fù)荷過(guò)重增加了肝細(xì)胞的損傷。若采取一些減輕機(jī)體鐵負(fù)荷的方法, 如：低鐵飲食、避免不必要的大量輸血等, 可能會(huì)減輕乙肝患者的肝損傷。

［1］中華醫(yī)學(xué)會(huì)編叢.臨床技術(shù)操作規(guī)范病理學(xué)分冊(cè).北京：人民軍醫(yī)出版社, 2004(04):1.

［2］Pietrangelo A, Rocchi E, Schiaffonati L, et al.Liver gene expression during chronic dietary iron overload in rats.Hepatology, 1990(11):798.

［3］Ozaki M, Kawabata T, Awai M.Iron-catalyzed Hydroxyl radicals in vitro.Biochem , 1998(250):589.

［4］Sebastiani G, Tempesta D, Alberti A.Hepatic iron overload is common in chronic hepatitis B and is more severe in patients coinfected with hepatitis D virus.J Viral Hepat, 2012(19):170-176.

［5］馮紅萍.甲胎蛋白與血清鐵蛋白聯(lián)合檢測(cè)在慢性乙型重癥肝炎中的臨床意義.現(xiàn)代診斷與治療, 2007(18):232-233.