李艷芳，史淑紅，李騰華，李榮霞

(河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，石家莊050000)

子宮內(nèi)膜異位癥(EMs)是婦科常見病之一，其發(fā)病機(jī)理有多種學(xué)說，但已知異位病灶的形成離不開充足的血液供應(yīng)，新生血管是異位病灶形成的必要條件［1］。血管的形成依賴促血管生長因子及抑制血管生成因子的共同調(diào)控［2］。VEGF是促血管生成的關(guān)鍵因子［3］，可通過結(jié)合子宮內(nèi)膜上相應(yīng)受體VEGFR-1(mflt-1)和VEGFR-2(KDR)發(fā)揮其血管形成作用，參與 EMs的發(fā)?。?］;血管內(nèi)皮生長因子可溶性受體(sflt-1)是mflt-1的稀有剪接形式，Kendall等［5］首先對sFlt-1進(jìn)行描述，其僅保留了配體結(jié)合區(qū)域，可與VEGF緊密相連，而不具有酪氨酸激酶活性，導(dǎo)致VEGF功能受到抑制，成為VEGF的天然抑制劑。我們觀察了EMs患者血清及腹腔液中sflt-1的表達(dá)變化，并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年6月～2012年6月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院因EMs行腹腔鏡手術(shù)治療的患者48例，年齡20～48歲。均經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)診斷。根據(jù)美國生育協(xié)會(huì)(R-AFs)分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ～Ⅱ期15例，Ⅲ～Ⅳ期33例，選擇同期因卵巢良性腫瘤、宮頸病變、漿膜下肌瘤、輸卵管疾病行腹腔鏡手術(shù)的非EMs患者30例，年齡22～48歲。兩組患者均月經(jīng)規(guī)律，未合并其他外科疾病，術(shù)前6個(gè)月未接受激素類藥物治療，6個(gè)月內(nèi)無妊娠及哺乳史。兩組年齡、BMI、月經(jīng)周期及孕產(chǎn)次差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 血清及腹腔液中VEGF與sflt-1水平測定 術(shù)前生化管采集患者靜脈血5 mL，3 000 r/min離心15 min，取上清液，分管儲(chǔ)存于-70℃冰箱中待測。術(shù)中采集患者腹腔液約5 mL，3 000 r/min離心15 min，取上清液，分管儲(chǔ)存于-70℃冰箱中待測。采用ELISA法測定血清及腹腔液中游離VEGF和sflt-1水平，最終反應(yīng)板在Bio-Rad 2250酶標(biāo)檢測儀于450 nm處讀取光密度值，所測值按照標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成VEGF及sflt-1水平。以VEGF/sflt-1比值計(jì)算VEGF活性指數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)結(jié)果采用±s表示;非正態(tài)分布資料用中位數(shù)(四分位間距)［M(QR)］表示。組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用 Pearson相關(guān)分析法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

EMs組血清及腹腔液 VEGF、sflt-1水平及VEGF活性指數(shù)均高于對照組，且Ⅲ～Ⅳ期者高于Ⅰ～Ⅱ期者(P均＜0.05)。見表2。

表2 兩組血清及腹腔液VEGF、sflt-1水平及VEGF活性指數(shù)比較(±s)

表2 兩組血清及腹腔液VEGF、sflt-1水平及VEGF活性指數(shù)比較(±s)

注:與對照組相比，*P ＜0.05;與Ⅲ～ Ⅳ期者相比，#P ＜0.05

組別 n VEGF(pg/mL)sflt-1(pg/mL)VEGF 活性指數(shù)血清 腹腔液EMs血清 腹腔液 血清 腹腔液組Ⅰ～ Ⅱ期 15 390.6 ± 99.3* 732.6 ± 49.7* 230.0 ±89.6* 455.8 ± 66.4* 2.0 ±0.6* 1.9 ±0.4*Ⅲ～ Ⅳ期 33 600.4 ±100.2*# 1 002.3 ±123.7*# 254.4 ±90.7*# 488.8 ±102.5*# 3.1 ±1.2*# 2.5 ±0.6*#對照組 30 120.6 ± 44.4 413.5 ± 88.4 98.0 ±19.3 287.0 ± 61.8 1.3 ±0.5 1.3 ±0.3

3 討論

VEGF是目前已知的促血管形成的關(guān)鍵因子，依賴與子宮內(nèi)膜上相應(yīng)受體mflt-1和KDR結(jié)合發(fā)揮其促血管形成作用［4］，其與KDR結(jié)合促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移已被較多的研究所證實(shí)。但實(shí)際flt-1在選擇性剪接過程中產(chǎn)生兩種單體即 mflt-1和sflt-1，目前認(rèn)為mflt-1在成人血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中都有表達(dá)且在血管形成中起促進(jìn)作用［6］;sflt-1僅保留配體結(jié)合區(qū)域，不具有酪氨酸激酶活性，可與flt-1競爭，并與VEGF緊密相連，但結(jié)合后又因其缺少細(xì)胞跨膜區(qū)而導(dǎo)致生物學(xué)功能抑制，成為VEGF的抑制劑。sflt-1在妊娠期高血壓疾?。?］及多種腫瘤中的抗血管形成作用研究較為成熟，但在EMs方面的研究尚不多。

我們前期研究證實(shí)，sflt-1的異常表達(dá)在EMs疾病發(fā)生、發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用，有望成為EMs治療的新靶點(diǎn)。近年來針對 sflt-1在子癇前期［8～11］、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)及抗血管治療腫瘤已取得一定進(jìn)展。在EMS治療中，Hull等［11］建議 sflt-1可作為抗血管藥物，但具體及機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。Yasmin等［12］研究發(fā)現(xiàn)sflt-1能減少細(xì)胞間質(zhì)VEGF水平，并可降低細(xì)胞表面KDR的活性，從而減少血管生成。Zhu等［13］發(fā)現(xiàn)sflt-1能有效抑制單核巨噬細(xì)胞遷移，阻止釋放VEGF，降低VEGF水平，間接發(fā)揮其抑制血管形成的作用。

本研究結(jié)果顯示，EMs組血清及腹腔液中VEGF及sflt-1水平較對照組明顯升高，且Ⅲ～Ⅳ期中晚期者高于Ⅰ～Ⅱ期者，說明VEGF導(dǎo)致的血管生成作用是EMs發(fā)病的基礎(chǔ)，參與疾病進(jìn)展。在本研究中，sflt-1作為抗血管生成的因子，EMs組較對照組也輕度升高，但較VEGF的升高幅度小。VEGF活性指數(shù)反映VEGF促血管生成及sflt-1抗血管生成作用的平衡關(guān)系，活性指數(shù)升高提示促血管生成占優(yōu)勢，EMs組血清及腹腔液中VEGF活性指數(shù)高于對照組，且臨床分期Ⅲ～Ⅳ期者活性指數(shù)最高，間接反映了在EMs患者血清及腹腔液中VEGF與sflt-1的調(diào)節(jié)失去平衡，有利于異位病灶血管形成。

綜上所述，我們認(rèn)為，sflt-1在EMs的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，具體的作用機(jī)理尚有待于進(jìn)一步探究，sflt-1有望成為治療EMs新的靶點(diǎn)。

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