張繁榮,胡志輝,周世力,孫齊英,許國權(quán),李鵬
(江漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,武漢,430056)
食用菌營養(yǎng)豐富,具有非常高的營養(yǎng)價(jià)值。相關(guān)測(cè)定結(jié)果表明[1],鮮蘑菇的蛋白質(zhì)含量為8.5%,而且含有人體所需的8種氨基酸,其中賴氨酸和亮氨酸的含量尤為豐富。食用菌中的蛋白質(zhì)含量略低于肉類和蛋類,明顯高于蔬菜及瓜果,且屬于優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì),含有18種氨基酸,而且其生理活性極高,吸收率可高達(dá)80%以上。食用菌中脂肪的含量較低,而且以不飽和脂肪酸為主[2,3],如香菇、黑木耳、銀耳中的不飽和脂肪酸分別占75%、73.1%、69.2%,另外,食用菌中不但不含膽固醇,而且含豐富的類甾醇[4]。
CTP-5消毒劑是深圳某公司新開發(fā)的一種綠色環(huán)保的新型氧化性消毒劑,它的終產(chǎn)物為CO2、O2、H2O,對(duì)環(huán)境沒有為害。因此,本試驗(yàn)用CTP-5(深圳)對(duì)食用菌基質(zhì)進(jìn)行滅菌,并對(duì)其滅菌效果進(jìn)行了檢測(cè)了,以期尋找出更為理想的消毒劑以及較為合理的消毒劑濃度,以減少消毒劑對(duì)環(huán)境的影響,增強(qiáng)資源的合理利用,積極響應(yīng)建設(shè)兩型社會(huì)的號(hào)召。
食用菌培養(yǎng)料的雜菌污染主要由霉菌造成,本試驗(yàn)選用馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)真菌培養(yǎng)基。滅菌對(duì)象是食用菌培養(yǎng)料之一的棉籽殼。將消毒劑配成不同濃度梯度,對(duì)棉籽殼進(jìn)行滅菌消毒,觀察新型環(huán)保消毒劑CTP-5對(duì)棉籽殼的滅菌效果。
馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)配制:去皮馬鈴薯 200 g,葡萄糖 20 g,瓊脂 20 g,蒸餾水1 000 mL。
先將馬鈴薯洗凈去皮并切片,用電子天平稱取200.0 g,加入所需2/3的蒸餾水于燒杯內(nèi),煮沸30 min后過濾,再加葡萄糖20.0 g,慢慢加入瓊脂12.0~15.0 g,攪拌,使瓊脂完全溶解,調(diào)pH值至7.0,最后將過濾液補(bǔ)足到1 000 mL,高壓蒸汽滅菌后備用。
表1 不同濃度的CTP-5消毒效果比較
圖1 高壓滅菌對(duì)照與蒸餾水空白對(duì)照
CTP-5消毒劑的配制:配制濃度分別為1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L 的 CTP-51和 CTP-52消毒劑,消毒劑現(xiàn)配現(xiàn)用。
①棉籽殼的消毒 每組選取6顆棉籽殼,將其分別放入裝有濃度為 1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L 的 CTP-51和 CTP-52消毒液的培養(yǎng)皿中,蓋好,常溫下消毒30 min。并將用蒸餾水浸泡過的棉籽殼和用高壓蒸汽滅菌的棉籽殼作為對(duì)照。
②培養(yǎng)基的接種 用無菌操作方法取出經(jīng)不同濃度的CTP-5處理的棉籽殼,用鑷子以兩行平行的方式放置于滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上,使棉籽殼在培養(yǎng)基上盡量擺放均勻。20℃恒溫下培養(yǎng)48 h,檢查各平板中微生物的生長(zhǎng)情況,并記錄結(jié)果。同時(shí)設(shè)置蒸餾水和高壓滅菌的對(duì)照組,每處理重復(fù)3次。
圖2 不同CTP-51濃度對(duì)食用菌基質(zhì)的滅菌效果
由圖2和圖3表明,隨著CTP-5消毒劑濃度的增加,培養(yǎng)基上的菌落數(shù)減少,消毒效果增加。CTP-51的消毒濃度為0~8.0 mg/L時(shí),培養(yǎng)物周圍有大量的真菌和細(xì)菌菌落,消毒濃度為16.0 mg/L時(shí),培養(yǎng)物周圍仍有菌落存在,但數(shù)量?jī)H為0~2個(gè),消毒不徹底(圖1)。CTP-52消毒效果整體優(yōu)于 CTP-51,其濃度為1.0 mg/L時(shí),培養(yǎng)物周圍有較多的真菌和細(xì)菌菌落,但較相同濃度的 CTP-51處理少,CTP-52消毒濃度為2.0~8.0 mg/L時(shí),大多數(shù)培養(yǎng)物周圍無菌落生長(zhǎng),僅有少數(shù)培養(yǎng)物周圍有1~2個(gè)菌落存在,濃度達(dá)到16.0 mg/L時(shí),培養(yǎng)物周圍完全沒有菌落生長(zhǎng),與高壓滅菌的對(duì)照組效果一樣,達(dá)到徹底的消毒效果(圖1)。
圖2 不同CTP-52濃度對(duì)食用菌基質(zhì)的滅菌效果
在生產(chǎn)上常用的食用菌培養(yǎng)料的滅菌方法是在常壓下將培養(yǎng)料置于滅菌灶內(nèi)加溫至100℃,保持8~10 h,或用高壓蒸汽滅菌,一般在0.138 MPa、126℃條件下滅菌1~2 h。該方法所需滅菌時(shí)間長(zhǎng)、耗能高、用工多,且對(duì)有些雜菌的生長(zhǎng)只能起到抑制作用,因此,在接種食用菌菌種后易誘使雜菌再度生長(zhǎng)。本試驗(yàn)采用的CTP-5消毒劑是深圳某公司新開發(fā)的一種綠色環(huán)保的新型氧化性消毒劑,它的終產(chǎn)物為 CO2、O2、H2O,無殘留,無污染,無公害,符合綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展的需要,而且高效,節(jié)約成本。
CTP-5消毒劑對(duì)棉籽殼良好的消毒滅菌效果在本試驗(yàn)得到了體現(xiàn),但本試驗(yàn)僅僅是對(duì)培養(yǎng)料之一的棉籽殼進(jìn)行消毒滅菌,至于對(duì)其他的培養(yǎng)料如木屑、玉米芯、秸稈、甘蔗渣、稻草等是否有效或有效的消毒滅菌濃度還有待進(jìn)一步試驗(yàn)。另外,CTP-5消毒劑對(duì)食用菌菌絲的生長(zhǎng)萌發(fā)、出菇產(chǎn)量等的影響也還有待進(jìn)一步試驗(yàn)。
[1]王賀祥.食用菌栽培學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2008:22-25.
[2]趙經(jīng)周,辛春德,聶艷秋.食用菌的藥用價(jià)值[J].中國林副特產(chǎn),1996(2):13-20.
[3]王志敏.消毒與滅菌方法的選擇[J].醫(yī)藥工程設(shè)計(jì),2003,24(3):39-46.
[4]趙順起,孟繁珍,高燕華,等.我國食用菌的藥用研究[J].生物技術(shù),1993,3(3):9-11.