孫榮青 ，朱麗超，周新閣，楊宏富，李菲菲，史曉奕

1)鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院ICU 鄭州450052 2)遂平縣第一人民醫(yī)院神經(jīng)外科 遂平463100

△女，1963年12月生，教授，主任醫(yī)師，研究方向:器官保護、膿毒癥，E-mail:rongqing.sun@126.com

腦紅蛋白(neuroglobin，NGB)是2000年由德國Burmester 等［1］首先發(fā)現(xiàn)的人體內(nèi)第三類攜氧球蛋白，主要在腦組織中表達，能夠特異性地向腦組織供氧，具有神經(jīng)保護作用。促紅細胞生成素(erythropoietin，EPO)成年后主要來源于腎臟，由腎小管及管旁毛細血管內(nèi)皮細胞與間質(zhì)細胞合成分泌［2］。已有動物實驗［3］表明，重組人促紅細胞生成素(rhEPO)可以誘導(dǎo)大鼠腦損傷后NGB 的表達。但臨床應(yīng)用rhEPO 觀察其對顱腦損傷患者NGB 表達影響的研究很少。Corwin 等［4-5］研究發(fā)現(xiàn)，與安慰劑相比，大劑量rhEPO 的使用能減輕重癥顱腦損傷患者的病死率。作者應(yīng)用大劑量rhEPO 治療顱腦損傷患者，檢測血清中NGB 的含量，同時監(jiān)測患者血紅蛋白(hemoglobin，HGB)的含量及急性生理學(xué)及慢性健康狀況評分系統(tǒng)Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ，APACHE Ⅱ)評分的變化，綜合評價藥物作用。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 選取2012年8月至2013年6月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院ICU 收治的顱腦損傷患者50例。均經(jīng)過CT 檢查，符合入選標準:①在創(chuàng)傷后24 h 之內(nèi)入院。②格拉斯哥昏迷評分(GCS)3～12分。③無凝血功能障礙。排除標準:①有精神異?；蚱渌窠?jīng)系統(tǒng)器質(zhì)性疾病。②患者有或使用rhEPO 后出現(xiàn)紅細胞增多癥。③有使用rhEPO 的禁忌證。剔除標準:①入住ICU 時間小于2 周。②使用rhEPO 后發(fā)生不良反應(yīng)者。③患者紅細胞壓積持續(xù)增高，男＞0.50(正常值0.40～0.50)，女＞0.45(正常值0.37～0.45)。采用盲法分為rhEPO組30例，對照組20例。兩組的年齡、性別、GCS 分值、損傷類型等差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)。該研究在通過鄭州大學(xué)倫理委員會審核并取得患者本人或家屬同意后進行。

1.2 治療方法 所有患者均于入院當日給予常規(guī)治療，包括應(yīng)用甘露醇、甘油果糖及七葉皂甙酸鈉脫水降顱壓，給予營養(yǎng)神經(jīng)藥物，給予依達拉奉清除氧自由基及頭部持續(xù)冰塊物理降溫等局部亞低溫治療。rhEPO組在此基礎(chǔ)上于入院后第3、6、9、12 天給予rhEPO(沈陽三生藥業(yè)，國藥準字:S20010001，10 000 IU/次，1 次/d)皮下注射。2組治療期間為防止鐵缺乏，常規(guī)口服鐵劑琥珀酸亞鐵薄膜衣片(速力菲，金陵藥業(yè)，國藥準字:H10930005，100 mg/次，2 次/d)、葉酸片(斯利安藥業(yè)，國藥準字:H10970079，0.4 mg/次，頓服)，并補充維生素B12(紫 竹 藥 業(yè)，國 藥 準 字:H11021993，25 μg/次，3 次/d)。

1.3 觀察指標 所有患者均于入院時、入院第4、7、10 和14 天進行監(jiān)測。①一般指標:記錄患者基本的生命體征，包括體溫、呼吸頻率、心率、血壓，進行APACHE Ⅱ評分。②NGB 檢測:采靜脈血3 mL，采用枸櫞酸鈉抗凝劑抗凝，2 h 內(nèi)離心取血清，置－70℃保存。后期統(tǒng)一解凍，采用ELISA 法檢測血清NGB 含量。③HGB 檢測:采靜脈血3 mL，采血后2 h 內(nèi)送鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科生化室檢測，記錄結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 19.0 進行分析，應(yīng)用重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析比較兩組患者不同時間點血清NGB、HGB 含量及APACHE Ⅱ分值，檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

兩組患者不同時間點血清NGB、HGB 含量及APACHE Ⅱ分值的變化見表1～3。rhEPO組患者血清NGB、HGB 含量較對照組增高，且隨時間的變化，rhEPO組患者兩種蛋白表達逐步增高。rhEPO組患者APACHE Ⅱ分值較對照組降低，且隨時間的變化，2組患者APACHE Ⅱ分值均降低，但對照組降低幅度較rhEPO組小。

表1 兩組患者不同時間點血清NGB 含量的變化 μg/L

表2 兩組患者不同時間點血清HGB 含量的變化 μg/L

表3 兩組患者不同時間點APACHE Ⅱ分值的變化

3 討論

王航雁等［6］發(fā)現(xiàn)人體不同組織中均有NGB mRNA 的表達，但不同的組織其表達水平不同，其主要存在于大腦中。珠蛋白家族是一類廣泛存在于細菌、真菌、動植物中的氧和亞鐵血紅素蛋白，其功能包括:結(jié)合氧及轉(zhuǎn)運氧，清除一氧化氮(NO)活性成分或解毒等。NGB 作為珠蛋白家族中的一員，在具備上述功能的同時，還具有進化功能的獨特性［7］，NGB 神經(jīng)元定位［1］和可能的內(nèi)源性神經(jīng)保護因子的功能［8］，使其成為神經(jīng)科學(xué)研究的熱點。

Sun 等［8］報道，通過反義寡聚脫氧核酸轉(zhuǎn)染培養(yǎng)神經(jīng)細胞，未轉(zhuǎn)染組NGB 的表達明顯下降，且在缺氧環(huán)境中NGB 表達的下降加速了神經(jīng)細胞的死亡;重組質(zhì)粒pcDNA-NGB 轉(zhuǎn)染HN33 細胞后，HN33細胞內(nèi)NGB 的含量明顯高于對照組，且發(fā)現(xiàn)NGB的高表達可以降低缺氧環(huán)境中細胞的死亡率。另一項實驗［9］結(jié)果顯示，經(jīng)過NGB-TAT 培養(yǎng)的大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞對氧的敏感性降低，提示NGB 對缺氧性損傷的腦細胞具有保護作用。Herold 等［10］研究認為，NGB 可能具備清除缺氧性腦病體內(nèi)氧化產(chǎn)物的功能，如NO、H2O2、NO2等;Fordel 等［11］的研究結(jié)果表明NGB 在抵御氧化損傷中起重要作用，進一步驗證了Herold 的觀點。王航雁等［12］在另一項研究中發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注損傷大鼠神經(jīng)元NGB 的表達變化呈現(xiàn)時間規(guī)律性，也提示NGB 對缺血缺氧性腦損傷有保護作用。

近年來研究發(fā)現(xiàn)，EPO 受體廣泛存在于各種非造血組織［13］，具有多種非造血作用，是一種全身性的保護性細胞因子［14］。動物實驗［2］表明，rhEPO可以誘導(dǎo)大鼠腦損傷后NGB 的表達。作者臨床應(yīng)用rhEPO 治療顱腦損傷患者，發(fā)現(xiàn)患者血清NGB 含量較對照組明顯升高，且隨時間的變化，血清NGB、HGB 含量逐步增高。APACHE Ⅱ是目前臨床上重癥監(jiān)護病房應(yīng)用最廣泛、最具權(quán)威性的危重病情評估系統(tǒng)，它可用于回顧性評價，也可用于實時評分、跟蹤病情動態(tài)變化、定量反映疾病嚴重程度，可以客觀地評定患者病情及預(yù)測病死率。該研究結(jié)果顯示，使用rhEPO 的患者APACHE Ⅱ分值較對照組下降，說明rhEPO 可以減輕患者病情。

總之，通過臨床應(yīng)用，作者發(fā)現(xiàn)rhEPO 不僅可以促進顱腦損傷患者的NGB 和HGB 的表達，改善患者貧血，減少輸血率，同時又可以降低APACHEⅡ評分，是一種潛在的有效的神經(jīng)保護藥物。但仍有許多未解決的問題，如rhEPO 具體用量問題以及合并其他疾病如腫瘤時其是否可應(yīng)用的問題等。對于rhEPO 如何促進NGB 和HGB 的表達這一機制也不是特別清楚。故對于臨床應(yīng)用rhEPO 還需要更多的理論研究和實驗支持。

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