鐘 偉 劉晗璐 張鐵濤 張海華 常忠娟 劉鳳華 李光玉

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動物分子生物學(xué)省部共建實驗室，長春 130112)

蛋氨酸和賴氨酸是毛皮動物機(jī)體重要的必需氨基酸，分別作為第一限制性和第二限制性氨基酸對毛皮動物生長發(fā)育發(fā)揮重要作用［1］。飼糧中這2種氨基酸是否得到滿足不僅影響著其他氨基酸的代謝，而且也影響著蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物等營養(yǎng)物質(zhì)的代謝［2］。銀狐是狐屬，肉食性動物，對蛋白質(zhì)需求量較高，生產(chǎn)中銀狐養(yǎng)殖多采用干飼料飼喂或干飼料與鮮飼料搭配飼喂方式，往往只關(guān)注蛋白質(zhì)、脂肪等主要營養(yǎng)物質(zhì)的含量，忽視氨基酸平衡問題，造成氮排放增加、飼養(yǎng)成本增加、污染環(huán)境等養(yǎng)殖問題。目前國內(nèi)外關(guān)于銀狐氨基酸需要量尚缺乏相關(guān)的研究報道，銀狐對氨基酸需要量標(biāo)準(zhǔn)多根據(jù)經(jīng)驗值或參考其他同屬動物。因此，本試驗配制相同蛋白質(zhì)水平的試驗飼糧，通過添加不同水平的賴氨酸和蛋氨酸研究其對冬毛生長期銀狐生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率、血清生化指標(biāo)及毛皮性狀的影響，從而確定冬毛生長期銀狐適宜的飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平，以期為銀狐養(yǎng)殖生產(chǎn)中適合的氨基酸配比提供生產(chǎn)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼糧與試驗設(shè)計

銀狐基礎(chǔ)飼糧配制參考 NRC(1982)［3］狐貂營養(yǎng)需求標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合生產(chǎn)實踐經(jīng)驗，其組成及營養(yǎng)水平見表1。采用二因子試驗設(shè)計，賴氨酸添加水平分別為0、0.50%，蛋氨酸添加水平分別為0、0.25%、0.50%、0.75%，試驗設(shè)計見表 2?；A(chǔ)飼糧中賴氨酸和蛋氨酸含量分別為1.15%和0.66%。蛋氨酸為DL－蛋氨酸，日本住友化學(xué)公司生產(chǎn)，含量≥98.8%;賴氨酸含量≥98.8%，購自長春大成飼料股份有限公司。

1.2 試驗動物與飼養(yǎng)管理

試驗選取70只120日齡、平均體重為(5 973±94)g的健康雄性銀狐，隨機(jī)分成7組，每組10個重復(fù)，每個重復(fù)1只銀狐。試驗在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所毛皮動物實驗基地完成。試驗動物單籠飼養(yǎng)。試驗從2011年10月15日開始至2011年12月13日結(jié)束，預(yù)試期7 d，正試期51 d，每天早、晚各飼喂1次，自由飲水。

1.3 消化代謝試驗

預(yù)試期每天準(zhǔn)確稱量、記錄飼喂量和剩余料量，計算采食量，觀察動物健康和采食狀況。試驗開始30 d后，于2011年11月15—18日進(jìn)行消化代謝試驗，每組選擇8只采食和排便正常、體況接近的銀狐進(jìn)行消化代謝試驗。消化代謝試驗共進(jìn)行4 d，利用自制的糞盤進(jìn)行全糞收集，65℃烘干，粉碎后過40目篩保存用于常規(guī)營養(yǎng)成分含量的測定。

1.4 測定指標(biāo)及方法

測定基礎(chǔ)飼糧中干物質(zhì)(DM)、粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)及糞樣中常規(guī)營養(yǎng)成分含量，賴氨酸和蛋氨酸含量采用氨基酸分析儀(日立L－8900)測定。血清總蛋白(TP)含量采用雙縮脲法;尿素氮(UN)含量采用二乙酰一肟法測定;白蛋白(ALB)含量采用溴甲酚綠法;血清總氨基酸(TAA)含量采用銅離子絡(luò)合法;以上血清生化指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定。血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性均采用中生北控生物科技股份有限公司試劑盒測定。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

表2 試驗設(shè)計Table 2 Experimental design %

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2003進(jìn)行整理，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SAS 8.0軟件中GLM程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，多重比較采用Duncan氏法進(jìn)行，其中 P＜0.01 為差異極顯著，P＜0.05 為差異顯著，P＞0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐生長性能的影響

由表3可知，飼糧賴氨酸和蛋氨酸交互作用或飼糧中賴氨酸、蛋氨酸單一作用對冬毛期銀狐生長性能影響不顯著(P＞0.05)。但賴氨酸和蛋氨酸添加組末重和平均日采食量比對照組有增加趨勢(P＞0.05)。

表3 飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐生長性能影響Table 3 Effects of dietary lysine and methionine levels on growth performance of silver fox during the furring growth period

2.2 飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表4可知，飼糧賴氨酸和蛋氨酸的交互作用對冬毛期銀狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率均無顯著影響(P＞0.05)。飼糧賴氨酸水平對干物質(zhì)采食量、蛋白質(zhì)采食量、脂肪采食量、蛋白質(zhì)排出量及蛋白質(zhì)消化率無顯著影響(P＞0.05)，對干物質(zhì)排出量、干物質(zhì)消化率及脂肪排出量產(chǎn)生顯著影響(P＜0.05)，對脂肪消化率產(chǎn)生極顯著影響(P＜0.01);隨著飼糧賴氨酸水平增加，干物質(zhì)消化率和脂肪消化率極顯著升高(P＜0.01)，干物質(zhì)排出量和脂肪排出量顯著降低(P＜0.05)。飼糧蛋氨酸水平對干物質(zhì)采食量、蛋白質(zhì)采食量、脂肪采食量、蛋白質(zhì)排出量、脂肪排出量、干物質(zhì)消化率、蛋白質(zhì)消化率和脂肪消化率均無顯著影響(P＞0.05)，僅對干物質(zhì)排出量產(chǎn)生顯著影響(P＜0.05)。飼糧添加0.50%賴氨酸組營養(yǎng)物質(zhì)消化率均高于未添加賴氨酸水平組，且營養(yǎng)物質(zhì)排出量也均低于未添加賴氨酸水平組，6組飼糧干物質(zhì)消化率、蛋白質(zhì)消化率和脂肪消化率均高于對照組和其他試驗組。

表4 飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響Table 4 Effects of dietary lysine and methionine levels on nutrient digestibility of silver fox during the furring growth period

2.3 飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，飼糧賴氨酸和蛋氨酸交互作用對血清總氨基酸含量產(chǎn)生極顯著影響(P＜0.01)，4組血清總氨基酸含量顯著低于對照組和其他試驗組，對血清總蛋白、白蛋白、尿素氮含量及ALT、AST活性無顯著影響(P＞0.05)。飼糧賴氨酸水平對血清總氨基酸含量產(chǎn)生極顯著影響(P＜0.01)，且隨飼糧賴氨酸水平升高，血清總氨基酸含量極顯著升高(P＜0.01);飼糧賴氨酸水平對血清AST活性產(chǎn)生極顯著影響(P＜0.01)，且隨著飼糧賴氨酸水平升高，血清AST活性極顯著降低(P＜0.01);飼糧賴氨酸水平對其他指標(biāo)無顯著影響(P＞0.05)。飼糧蛋氨酸水平對血清總氨基酸含量產(chǎn)生極顯著影響(P＜0.01)，且隨飼糧蛋氨酸水平升高，血清總氨基酸含量呈先升高后降低再升高趨勢;飼糧蛋氨酸水平對其他指標(biāo)無顯著影響(P＞0.05)。

表5 飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary lysine and methionine levels on serum biochemical parameters of silver fox during the furring growth period

2.4 飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐毛皮性狀的影響

由表6可知，飼糧賴氨酸和蛋氨酸交互作用對冬毛期銀狐體長、鮮皮長、鮮皮重及皮張厚度影響不顯著(P＞0.05)。飼糧賴氨酸或蛋氨酸水平對冬毛期銀狐體長、鮮皮長、鮮皮重及皮張厚度無顯著影響(P＞0.05)，但是7組的各項毛皮指標(biāo)要略優(yōu)于對照組和其他試驗組。

3 討論

在毛皮動物飼糧中添加賴氨酸和蛋氨酸可以節(jié)約蛋白質(zhì)飼料成本，同時平衡動物機(jī)體內(nèi)氨基酸含量，更有利于促進(jìn)動物生長和發(fā)育。蛋氨酸是毛皮動物的第一限制性氨基酸［4］。通過研究在低蛋白質(zhì)飼糧中添加賴氨酸和蛋氨酸對藍(lán)狐生長性能的影響，得出藍(lán)狐第一限制性氨基酸是蛋氨酸，第二限制性氨基酸是賴氨酸［1］，完全不同于豬、雞［5－6］。銀狐與藍(lán)狐是同一種屬，對氨基酸的代謝利用與藍(lán)狐相似。本試驗在銀狐適宜蛋白質(zhì)水平下添加不同水平賴氨酸和蛋氨酸，來探求適宜的賴氨酸和蛋氨酸添加水平，得出飼糧賴氨酸和蛋氨酸水平對冬毛期銀狐生長性能影響不顯著。這可能由于狐生長后期體重增長緩慢，生長期藍(lán)狐在102日齡后生長速度緩慢，至154日齡后身體增長基本終止，生長后期主要是毛皮的快速生長階段［7］，因此銀狐攝入的賴氨酸和蛋氨酸主要用于毛皮的生長，在體重方面影響不明顯。這與Clausen等［8］研究結(jié)果相一致。

本試驗得出飼糧賴氨酸和蛋氨酸交互作用對營養(yǎng)物質(zhì)采食量、消化率沒有產(chǎn)生影響，但賴氨酸或蛋氨酸單獨(dú)作用對營養(yǎng)物質(zhì)采食量、排出量及消化率產(chǎn)生不同影響，當(dāng)飼喂添加這2種氨基酸的飼糧后，就可以促進(jìn)氨基酸的平衡，加強(qiáng)機(jī)體內(nèi)的物質(zhì)代謝，進(jìn)而提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。飼糧賴氨酸水平對蛋白質(zhì)采食量及其消化率無顯著影響，與劉鳳華［9］報道相一致，但是飼糧蛋氨酸水平對各種營養(yǎng)物質(zhì)消化率無顯著影響，與李光玉等［10］報道不一致，原因可能在于銀狐與水貂對氨基酸的需要量不同，也可能由于所處的生長時期不同導(dǎo)致蛋氨酸在2種動物體內(nèi)的代謝水平不盡相同導(dǎo)致。飼糧賴氨酸水平提高了干物質(zhì)和脂肪消化率，由于賴氨酸是L－肉堿合成的必不可少的物質(zhì)，L－肉堿的主要作用是參與胞內(nèi)脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)，轉(zhuǎn)運(yùn)長鏈脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜以便進(jìn)行β－氧化。在斷奶仔豬飼糧中添加一定量的肉堿可提高脂肪利用效率［11］。因此，本試驗飼糧賴氨酸水平增加提高了飼糧中肉堿合成量，從而提高了動物對脂肪消化率。水貂飼糧中添加適宜水平的氨基酸對營養(yǎng)物質(zhì)消化率有一定的促進(jìn)作用［12］。毛皮動物機(jī)體本身不能合成賴氨酸和蛋氨酸，而在毛皮動物基礎(chǔ)飼糧中如不特殊注意氨基酸的添加水平，就會造成這2種限制性氨基酸的缺乏，使機(jī)體內(nèi)的物質(zhì)代謝受到一定阻障，從而影響機(jī)體的生長發(fā)育［2］。

血清總蛋白含量在一定程度上反映飼糧蛋白質(zhì)的營養(yǎng)水平與蛋白質(zhì)的消化代謝的相互關(guān)系［13］。血清白蛋白相比血清總蛋白，對飼糧蛋白質(zhì)的變化更加敏感［14］。本試驗不同組別的試驗飼糧蛋白質(zhì)水平是一致的，所以這2個指標(biāo)沒有顯著差別。血清尿素氮含量可以準(zhǔn)確的反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況，氨基酸平衡良好時，血清尿素氮含量下降［15］。本試驗中賴氨酸和蛋氨酸添加組的尿素氮含量雖未達(dá)到差異顯著水平，但7組相對較低。ALT和AST參與動物機(jī)體內(nèi)各種非必需氨基酸的合成和轉(zhuǎn)化，且在氨基酸和糖代謝過程中發(fā)揮極其重要的作用，2種酶的活性能反映出動物組織的損傷程度，活性過高表明組織器官受損［16］，本試驗中飼糧賴氨酸水平對血清AST活性產(chǎn)生顯著影響，添加0.5%賴氨酸組血清AST活性顯著低于未添加組，表明添加賴氨酸組對組織的保護(hù)程度要優(yōu)于未添加組;各組間血清ALT活性雖然未達(dá)到差異顯著水平，但7組血清ALT和AST活性均低于對照組和其他試驗組。血清中總氨基酸含量反映動物機(jī)體內(nèi)氨基酸平衡和代謝程度，血清中總氨基酸含量較高，表明氨基酸代謝效果較好，本試驗中飼糧蛋氨酸和賴氨酸交互作用、蛋氨酸或賴氨酸單一作用對血清總氨基酸含量產(chǎn)生極顯著影響。5和7組顯著高于對照組和其他試驗組，表明飼糧中添加0.50%賴氨酸和 0.25%或 0.75%蛋氨酸，銀狐體內(nèi)氨基酸代謝效果相對較好。所以綜合各項血液指標(biāo)，7組氨基酸代謝相對優(yōu)于其他試驗組。

本試驗得出飼糧中賴氨酸和蛋氨酸水平對毛皮性狀未產(chǎn)生顯著影響，這與 Tyopponen等［17］、Zhang 等［18］和 Clausen 等［8］研究結(jié)果基本一致，但本試驗隨賴氨酸和蛋氨酸水平遞增，體長、鮮皮長、鮮皮重、皮張厚度均呈升高趨勢，皮張厚度反映出皮張的延展性和拉伸性，表明添加賴氨酸和蛋氨酸有促進(jìn)毛皮生長的趨勢。從本試驗的毛皮性能指標(biāo)綜合分析，7組要優(yōu)于對照組和其他試驗組。

4 結(jié) 論

從降低飼養(yǎng)成本與減少環(huán)境污染角度考慮，冬毛生長期銀狐飼糧中添加0.50%賴氨酸(實際含量 1.65%)和 0.25%蛋氨酸(實際含量 0.91%)是較適合銀狐生產(chǎn)的。

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